血糖异常对心肌梗死大鼠内质网应激介导心肌细胞凋亡的作用和机制研究

发布时间：2021-12-31 23:54

　　目的：观察血糖异常下急性心肌梗死（acute myocardial infarction, AM I）大鼠心肌组织形态学变化及血糖异常是否会加重AMI大鼠心肌组织的凋亡程度,确定血糖异常加重AMI大鼠心肌组织凋亡程度是否通过内质网应激（endoplasmic reticulum stress, ERS）途径介导的,并进一步探讨高、低血糖AMI大鼠ERS介导心肌细胞凋亡的具体途径,进而为研发与应用阻断ERS药物提供证据。方法：1.以SPF级健康雄性Wistar大鼠为研究对象,依据随机原则将动物分成6组,分别为低血糖假手术组（SL,n=13）、正常血糖假手术组（SN,n=13）、高血糖假手术组（SH,n=13）,低血糖AMI组（ML,n=13）、正常血糖AMI组（MN,n=13）和高血糖AMI组（MH,n=13）。采用注射胰岛素5U/kg或25%葡萄糖1.5g/kg,同时结扎左冠状动脉前降支的方法建立大鼠低、高血糖兼AMI模型,假手术组只穿线不结扎。2.采用血糖仪检测法和心电图（electrocardiogram, ECG）评价动物模型。3.采用HE染色法观察血糖异常下AMI大鼠心肌组织的... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
ABSTRACT
第一章 引言
第二章 实验方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要仪器设备
    2.2 实验试剂
    2.3 主要溶液及试剂的配制
        2.3.1 2%戊巴比妥钠溶液的配制
        2.3.2 4%中性多聚甲醛固定液的配制
        2.3.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶的配制
        2.3.4 30%丙烯酰胺的配制
        2.3.5 10%过硫酸铵的配制
        2.3.6 10%SDS的配制
        2.3.7 电泳缓冲液的配制
        2.3.8 电转缓冲液的配制
        2.3.9 TBST溶液的配制
        2.3.10 显影液的配制
        2.3.11 定影液的配制
    2.4 实验方法
        2.4.1 实验动物分组
        2.4.2 动物模型制备
        2.4.3 标本采集
        2.4.4 HE染色
        2.4.5 TUNEL凋亡检测
        2.4.6 免疫组化染色
        2.4.7 real time-PCR分析
        2.4.8 Western Blot检测
    2.5 统计学处理
第三章 实验结果
    3.1 动物模型的评价
    3.2 HE染色对不同血糖水平AMI大鼠心肌组织形态学的分析
    3.3 TUNEL染色对不同血糖水平AMI大鼠心肌细胞凋亡的分析
    3.4 不同血糖水平AMI大鼠ERS标志蛋白GRP78 MRNA及蛋白的表达
    3.5 不同血糖水平AMI大鼠ERS应激感受蛋白ATF-6、IRE-1及PERK MRNA及蛋白的表达
        3.5.1 ATF6的表达
        3.5.2 IRE-1的表达
        3.5.3 PERK的表达
    3.6 不同血糖水平AMI大鼠ERS下游凋亡信号分子CASPASE 12、CHOP MRNA及蛋白的表达
        3.6.1 Caspase 12的表达
        3.6.2 CHOP的表达
第四章 讨论
    4.1 动物模型的评价
    4.2 血糖异常AMI大鼠心肌组织病变程度增加
    4.3 血糖异常AMI大鼠心肌细胞凋亡程度增加
    4.4 血糖异常通过ERS介导AMI大鼠心肌细胞的凋亡：高、低血糖分别通过IRE-1,IRE-1和ATF6途径激活CHOP促进心肌细胞的凋亡
第五章 结论
参考文献
在学期间的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]内质网应激与血管内皮细胞凋亡的研究进展[J]. 邱志凌,张军平,郭晓辰.  中国医学科学院学报. 2014(01)
[2]5-HT1B受体增强野百合碱诱导的肺性高血压大鼠的肺血管对5-HT收缩反应（英文）[J]. 王怀良,董旭,章新华,邢军.  Acta Pharmacologica Sinica. 2001(03)



本文编号：3561227