ApoA-Ⅰ通过TTP降解Snail/Slug抑制血管内皮细胞间质转化的机制研究

发布时间：2022-01-06 06:46

　　[目的]内皮细胞向间充质细胞转变（EndMT）的过程中伴随着转录因子和细胞因子表达的变化,这与血管内皮细胞受损紧密相关。据相关研究报道,转化生长因子β1（TGF-β1）在诱导EndMT形成过程中起到关键作用。而且最近研究指出,EndMT可以促进动脉粥样硬化（As）的发生发展。流行病学研究表明,载脂蛋白A-I（ApoA-I）水平与心血管疾病风险呈负相关。据本课题组前期研究及与相关文献报道已证实,ApoA-I表现出显著的抗As作用,过表达ApoA-I能够显著抑制As的进展。ApoA-I能够抑制TGF-β1诱导的EndMT,但关于ApoA-I在TGF-β1诱导的EndMT中确切作用尚未完全清楚。锌指蛋白36（TTP）可以识别并且与相应mRNA 3’UTR富含AU元件（AREs）结合,导致其相应mRNA不稳定性增加,促进其降解,并且有研究发现ApoA-I可以影响TTP的功能。ApoA-I是否调控其他通路抑制TGF-β1诱导的EndMT尚不清楚。因此,本研究的目的是ApoA-I是否可以通过TTP调控Snail/Slug mRNA的降解,抑制EndMT。[方法]在加入或不加入ApoA-I（50μg... 

【文章来源】：南华大学湖南省

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ApoA-I抑制HCAEC中TGF-β诱导的EndMTA.用CD31（绿色）和α-SMA（红色）抗体进行双重免疫荧光染色

南华大学硕士学位论文14挥作用，我们检测SnailmRNA、SlugmRNA与Snail及Slug蛋白水平。结果显示，TGF-β1显著增加了HUVECs中Snail和Slug的mRNA和蛋白表达。然而，ApoA-I抑制了TGF-β1对Snail和Slug的mRNA和蛋白表达上调作用（图4.2A和4.2B）。因此综上所述，我们得出ApoA-I通过降低Slug和Snail抑制TGF-β1诱导的EndMT。图4.2ApoA-I抑制TGF-β1诱导的EndMT中Snail和Slug的变化情况。用TGF-β1和/或ApoA-I在不同的时间段（0、6、12和24小时）处理HCAEC。用TGF-β1或ApoA-I处理HCAEC24小时，提取RNA和蛋白质并进行PCR（A）和Westernblot（B）。*P<0.05;**P<0.01（n=3）4.2ApoA-I通过TTP降解Snail和SlugmRNA抑制TGF-β1诱导的EndMT。已有研究表明，ApoA-I能够抑制TGF-β1诱导的EndMT，TTP在人类巨噬细胞中与ApoA-I相关的抗炎反应中发挥关键作用[22]。TTP可以识别并结合在相关基因mRNA3’UTR的ARE结构，促进mRNA降解。且有研究发现ApoA-I可以影响TTP的功能[23]。我们从上述实验结果得出ApoA-I通过降低Snail和Slug

的作用。为了研究 TTP 是否参与 ApoA-I 通过降低 Slug 和 Snail 抑制 TGF-β1 诱导的 EndMT 过程并在其中在其中起到的作用。首先我们为了确定 TTP 在 ApoA-I抑制 TGF-β1 诱导的 EndMT 过程中表达情况，我们使用 Western Blot 和 PCR 检测 HUVECs 的 Control 组、TGF-β1 组和 TGF-β1+apoA-I 组的三组 TTP 及 TTP mRNA 水平。发现与 Control 组相比，TGF-β1 组 TTP 蛋白及 mRNA 水平有上升趋势但无统计学意义。与 TGF-β1 组相比，TGF-β1+apoA-I 组中 TTP 及 TTP mRNA 水平显著升高（图 4.3）。由此我们得出 ApoA-I 促进 TTP 表达抑制 TGF-β1诱导的 EndMT 过程。


本文编号：3571954