血管平滑肌细胞通过分泌bFGF降低心肌缺血再灌注诱导的凋亡和自噬

发布时间：2022-01-09 17:26

　　背景:心肌缺血再灌注损伤是导致心肌缺血、心脏手术后血运重建预后不好的主要原因之一,研究表明血管平滑肌细胞可以减轻缺血再灌注损伤,改善大鼠心梗后心功能的作用,但其作用机制目前仍知之甚少,该研究旨在探讨血管平滑肌细胞是通过何种机制降低心肌缺血再灌注损伤的。方法:1:体外实验:①组织贴壁法原代培养大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）,通过细胞形态及免疫荧光法鉴定α-SMA。采用CoC12 600μmol/L8h/16h化学性缺氧建立H9C2心肌细胞I/R细胞模型;②采用Transwell共培养技术共培养I/R心肌H9C2细胞/VSMCs;设5组:Control组、I/R组、I/R+VSMCs组、I/R+VSMCs+FGFR1抑制剂组、I/R+bFGF组MTT观察细胞活力、流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹（westernblot）测cleaved caspase3、Bcl-2、LC3II/I、p62的表达,观察VSMC对I/R心肌细胞的保护作用;③Elisa检测bFGF含量明确VSMCs对I/R心肌细胞保护作用中bFGF的地位;④western bolt分析P13K/Akt-mTOR、Fo... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：101 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１大鼠胸主动脉ＶＳＭＣｓ原代培养及鉴定Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ：?１００?ｎｍ．??

察缺血再灌注情况下血管平滑肌细胞对心肌细胞的保护作用。结果发现当Ｉ／Ｒ心??肌细胞与血管平滑肌细胞共培养后，与单纯Ｉ／Ｒ心肌细胞比较共培养组心肌细胞??活性得到大大改善，且有统计学差异（Ｐ＜?０．０５）（见图３Ａ）。通过图３Ｂ散点??图发现在Ｉ／Ｒ?Ｈ９Ｃ２心肌细胞与ＶＳＭＣｓ共培养组中右上象限细胞数较单纯Ｉ／Ｒ组??明显减少，心肌细胞凋亡率亦明显下降（Ｐ＜０．０５）（图３Ｂ和Ｃ），说明与ＶＳＭＣ??共培养可以降低Ｉ／Ｒ心肌细胞凋亡。??Ａ?Ｃ??０８?１?５０１?＊??Ｔ?求??０６?■?ＢＨ?０?４０■??〇?—ｒ—??？?ｒ１！?－?３０＇??ｎａ４＇?Ｈ?－ｒ??□?＊?〇?２０－?一?￣￣??〇?￣Ｔ?ａ??０．２－?ｍｍ?戀ｆｔ?〇．?ｉ〇－??＜??窮?ｒｏ－ＬＩ?ＬＪ?１—Ｉ——??０?０?＾??????Ｃｏｎ?Ｉ／Ｒ?ＩＲ＋ＶＳＭＣｓ??Ｃｏｎ?Ｉ／Ｒ?ＩＲ＋ＶＳＭＣｓ??

心肌细胞自噬流活化、自噬增加。而当与血管平滑肌细胞共培养时，ｐ６２表达较??单纯Ｉ／Ｒ组心肌细胞显著升高（Ｐ＜０．０１），ＬＣ３Ｈ／ＬＣ３Ｉ则显著下降（Ｐ＜０．０１），??说明ＶＳＭＣｓ可以大大降低Ｉ／Ｒ诱导的Ｈ９Ｃ２心肌细胞过度自噬（图３Ｄ－Ｆ）。??３５??

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3579141