抑制let-7i上调CCND2及E2F2促进心肌细胞再生及损伤后心脏功能恢复的研究

发布时间：2022-01-10 03:53

　　背景和目的冠状动脉闭塞由病变血管粥样斑块内或内膜下出血、管腔内血栓形成或动脉持久性痉挛,使管腔发生完全或不完全的闭塞,导致心脏灌注不足,使得心脏组织的缺血,可破坏心肌细胞而引起的心肌梗死。心肌细胞对于维持心脏功能是至关重要的。成熟的心肌细胞处于终末分化状态,永久性地退出细胞周期,几乎没有再生能力,无法实现心肌损伤后的自我修复。哺乳动物心脏损伤发生后主要反应是心肌纤维化、非收缩性疤痕组织的形成,使心脏功能受损,最终导致心衰发生。因此,促进退出细胞周期的心肌细胞再次进入细胞周期,补充丢失的心肌细胞,是实现心肌再生的关键（1）。在胚胎早期,小鼠心肌细胞的增殖水平很高,从胚胎第10-12天附近细胞增殖水平开始下降。出生后第2周,许多心肌细胞发生“细胞质不分裂”有丝分裂,产生双核心肌细胞。之后大多数心肌细胞处于细胞周期停滞状态（2,3）。近年在成年哺乳动物的心脏中发现存在心肌细胞增殖现象（4）。然而,心肌细胞增殖能力极其有限,且远不足以恢复损伤后的心脏功能（5,6）。目前有关出生后阶段如何发生不可逆的细胞周期停滞机制尚不清楚。因此,通过分析新生及成年心肌细胞的细胞周期活性之间的差异,了解心肌细胞... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．１?ｌｅｔ－７ｉ在小鼠的心肌细胞表达水平分别取Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ新生１天龄、７天龄、

图２．１心肌梗死心电图??４．６左心室（ＬＶ）纤维化面枳分析??进行Ｍａｓｓｏｎ＇ｓ染色以定量损伤后左心室中的纤淮化区域。装备有ＣＣＤ??（Ｍａｇｎａ－Ｆｉｒｅ?ＴＭ）相机的Ｏｌｙｍｐｕｓ?ＢＸ４１显微镜在每张载玻片上捕获ＬＶ??区域图像。使用Ｉｍａｇｅ?Ｊ测量每个图像的ＬＶ纤维化面积和总ＬＶ面积，并??将纤维化面积报告为总ＬＶ面积的百分比。??４．７?Ｍａｓｓｏｎ?染色??￥有关试剂的配制：??Ｍａｓｓｏｎ复合染色液：酸性复红?ｌｇ??丽春红?２ｇ??橘黄Ｇ?２ｇ??０．２５％?醋酸?３００ｍｌ??亮绿染色液高绿ＳＦ?Ｏ．ｌｇ??

用冠脉左支结扎方建２８天成年小鼠心肌梗死，心梗注射腺相关病毒（ＡＡＶ９－ａｎｔｉ－ｌｅｔ－７ｉｏｒＡＡＶ９－ＮＣ），分别通过免疫焚光检、ＴＵＮＥＬ的染色的阳性心肌细胞数量，用以观察不同组别心肌细胞增殖及??情况。通过Ｍａｓｓｏｎ染色，观察不同组别心肌梗死面积变化。通过心脏Ｍ??声观察心肌梗死０天、７天后、１４天、２１天、２８天后，以左室收缩／舒张??内径、左室短轴缩短率及左室射血分数为指标观察左心室功能变化。??结果??生１天小鼠左心室心肌内感染Ａｄ－ｌｅｔ－７ｉ及Ａｄ－ＮＣ，免疫荧光测定标记有关??细咆增殖的指标（ＥｄＵ、ｐＨ３）及细胞边界（ＷＧＡ），结果显示ＥｄＵ、ｐＨ３??率百分比较空病毒组明显下降，过表达ｌｅｔ－７ｉ后心肌细胞体积增大，提示??细胞有丝分裂及增殖数量在ｌｅｔ－７ｉ过表达后受到抑制。如图２．２－２．４所示。??＜０．０５，ｎ＝４）。??Ｈｏｅｃｈｓｔ?／?ｃＴｎＴ?／?ｖｉｍｅｎｔｉｎ??

【参考文献】：
期刊论文
[1]Pursuing meaningful end-points for stem cell therapy assessment in ischemic cardiac disease[J]. Maria Dorobantu,Nicoleta-Monica Popa-Fotea,Mihaela Popa,Iulia Rusu,Miruna Mihaela Micheu.  World Journal of Stem Cells. 2017(12)



本文编号：3580001