VEGF165对人胚肾293细胞KCNQ1/KCNE1电流的影响及机制探讨
发布时间：2022-01-24 16:28
研究背景和目的血管内皮生长因子165在机体内具有强大的促进血管生成的作用,利用这一特性,人们将其视为治疗心肌梗死等缺血性疾病的潜在突破点。许多研究表明:VEGF165能够减少心肌梗死面积,促进干细胞迁移至缺血部位,预防心室重构,抗心肌细胞凋亡,通过多个途径发挥保护心肌细胞的作用。但VEGF165对心肌细胞电活动的直接影响及可能的机制仍未阐明。Iks通道在哺乳动物的心肌细胞上广泛分布,是影响心肌细胞动作电位复极过程的重要离子通道。目前认为Iks通道由α亚单位（KCNQ1基因编码）和β亚单位（KCNE1基因编码）组成。本实验运用细胞转染和膜片钳等技术,分析VEGF165对异源表达的KCNQ1/KCNE1通道电流的影响,并探讨其可能的机制。研究方法将人胚肾293细胞随机分为对照组、实验A组和实验B组,对照组细胞正常培养,不做特殊处理,实验A组细胞导入含有KDR、KCNQ1和KCNE1基因的质粒,实验B组细胞导入含KDR和KCNQ1基因的质粒,外源基因导入约48小时后,PCR技术被用来验证转染是否成功。实验A组和实验B组人胚肾293细胞均经同样浓度的...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PCR检测实验A组的目的基因表达情况
结 果1 PCR 结果PCR 结果见图 1。由图可见，对照组中的人胚肾 293 细胞无 KCNQ1、KCNE1和 KDR 条带，在实验 A 组中，导入 KDR、KCNQ1 和 KCNE1 基因的人胚肾 293细胞可见明显条带，说明转染成功，转入的三个目的基因均可以有效表达。同理可见图 2，在实验 B 组中，导入人胚肾 293 细胞的 KCNQ1 和 KDR 基因亦能有效的表达。图 1. PCR 检测实验 A 组的目的基因表达情况
11图 3. VEGF165 对实验 A 组人胚肾 293 细胞 KCNQ1/KCNE1 电流的影响（样本量 n=7）A、在 100ng/ml 浓度的 VEGF165 处理前后，KCNQ1/KCNE1 电流的记录图像；B、VEGF165 处理前后的 KCNQ1/KCNE1 标准化激活电流的 I-V曲线；C、VEGF165 处理前后的 KCNQ1/KCNE1 标准化尾电流的 I-V曲线
【参考文献】：
期刊论文
[1]升清降浊汤联合重组人血管内皮抑制素腹腔灌注对恶性腹水患者血管内皮生长因子的影响[J]. 冯高飞,陈若,易舒婧,涂轩,刘鹏,钟元涛,胡世平. 中国中西医结合消化杂志. 2019(01)
[2]Safety and efficacy of frequency-domain optical coherence tomography in evaluating and treating intermediate coronary lesions[J]. Mohammad Reeaze Khurwolah,Hao-Yu Meng,Yong-Sheng Wang,Lian-Sheng Wang,Xiang-Qing Kong. World Journal of Cardiology. 2018(11)
[3]冠心病规范化二级预防的临床结果分析[J]. 赵桂琴,狄文娟,郭振峰. 医学综述. 2018(21)
[4]高血压视网膜病变与冠心病的相关性分析[J]. 王彦斌,陈小平,尚小森. 中西医结合心脑血管病杂志. 2018(15)
[5]科研工作者对干细胞移植伦理认知的质性研究及启示[J]. 刘博,张浩为. 中国医学伦理学. 2018(07)
[6]《中国心血管病报告2017》要点解读[J]. 马丽媛,吴亚哲,王文,陈伟伟. 中国心血管杂志. 2018(01)
[7]NSCLC相关的恶性胸腔积液中VEGF表达及临床意义研究进展[J]. 陈瑶,卢宏达. 江汉大学学报(自然科学版). 2018(01)
[8]膜片钳技术在慢性痛大鼠背根神经节神经元电生理学特性改变中的应用[J]. 蔡捷,方东,李松,邢国刚. 中国疼痛医学杂志. 2017(01)
[9]血管内皮生长因子促进慢性心肌梗死血管生成[J]. 陈成,钱军岭,陈涛,葛敏,王东进. 医学研究杂志. 2016(11)
[10]视觉神经细胞电生理技术研究进展[J]. 邢家铭,严兴科,马重兵,盛雪燕,朱田田,韩雅迪. 中国中医眼科杂志. 2014(04)
本文编号：3606911
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PCR检测实验A组的目的基因表达情况
结 果1 PCR 结果PCR 结果见图 1。由图可见，对照组中的人胚肾 293 细胞无 KCNQ1、KCNE1和 KDR 条带，在实验 A 组中，导入 KDR、KCNQ1 和 KCNE1 基因的人胚肾 293细胞可见明显条带，说明转染成功，转入的三个目的基因均可以有效表达。同理可见图 2，在实验 B 组中，导入人胚肾 293 细胞的 KCNQ1 和 KDR 基因亦能有效的表达。图 1. PCR 检测实验 A 组的目的基因表达情况
11图 3. VEGF165 对实验 A 组人胚肾 293 细胞 KCNQ1/KCNE1 电流的影响（样本量 n=7）A、在 100ng/ml 浓度的 VEGF165 处理前后，KCNQ1/KCNE1 电流的记录图像；B、VEGF165 处理前后的 KCNQ1/KCNE1 标准化激活电流的 I-V曲线；C、VEGF165 处理前后的 KCNQ1/KCNE1 标准化尾电流的 I-V曲线
【参考文献】：
期刊论文
[1]升清降浊汤联合重组人血管内皮抑制素腹腔灌注对恶性腹水患者血管内皮生长因子的影响[J]. 冯高飞,陈若,易舒婧,涂轩,刘鹏,钟元涛,胡世平. 中国中西医结合消化杂志. 2019(01)
[2]Safety and efficacy of frequency-domain optical coherence tomography in evaluating and treating intermediate coronary lesions[J]. Mohammad Reeaze Khurwolah,Hao-Yu Meng,Yong-Sheng Wang,Lian-Sheng Wang,Xiang-Qing Kong. World Journal of Cardiology. 2018(11)
[3]冠心病规范化二级预防的临床结果分析[J]. 赵桂琴,狄文娟,郭振峰. 医学综述. 2018(21)
[4]高血压视网膜病变与冠心病的相关性分析[J]. 王彦斌,陈小平,尚小森. 中西医结合心脑血管病杂志. 2018(15)
[5]科研工作者对干细胞移植伦理认知的质性研究及启示[J]. 刘博,张浩为. 中国医学伦理学. 2018(07)
[6]《中国心血管病报告2017》要点解读[J]. 马丽媛,吴亚哲,王文,陈伟伟. 中国心血管杂志. 2018(01)
[7]NSCLC相关的恶性胸腔积液中VEGF表达及临床意义研究进展[J]. 陈瑶,卢宏达. 江汉大学学报(自然科学版). 2018(01)
[8]膜片钳技术在慢性痛大鼠背根神经节神经元电生理学特性改变中的应用[J]. 蔡捷,方东,李松,邢国刚. 中国疼痛医学杂志. 2017(01)
[9]血管内皮生长因子促进慢性心肌梗死血管生成[J]. 陈成,钱军岭,陈涛,葛敏,王东进. 医学研究杂志. 2016(11)
[10]视觉神经细胞电生理技术研究进展[J]. 邢家铭,严兴科,马重兵,盛雪燕,朱田田,韩雅迪. 中国中医眼科杂志. 2014(04)
本文编号：3606911
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