PI3K/ERK1/2/NF-κB/PPARα/SCAD信号途径对心肌纤维化的调控

发布时间：2022-10-20 13:39

　　目的:短链酰基辅酶A脱氢酶（short-chain acyl-Co A dehydrogenase,SCAD）是线粒体脂肪酸β氧化的限速酶。前期研究显示,PPARα介导了SCAD对心肌纤维化的调控作用。本文旨在研究PI3K/ERK1/2/NF-κB/PPARα/SCAD信号途径对心肌纤维化的调控作用,阐明SCAD调控心肌纤维化的新机制。方法:1、采用自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHR）作为心肌纤维化模型,并进行游泳运动干预。Western blot检测PI3K p110α、PI3K p110γ、p-ERK1/2、p-IκBα、p-p65蛋白表达变化。Western blot及Real-time PCR检测SCAD、PPARα及纤维化指标α-SMA、Collagen I和Collagen III蛋白和m RNA水平。同时检测SCAD酶活性、ATP含量及游离脂肪酸含量。2、采用血管紧张素II（angiotensin,Ang II）刺激原代培养正常大鼠的心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFs）构建心肌纤维化体外模型... 

【文章页数】：98 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 心肌纤维化
    1.2 心脏能量代谢
    1.3 PI3K/NF-κB信号途径的研究现状
    1.4 ERK1/2/PPARα信号途径的研究现状
    1.5 SCAD研究现状
    1.6 结语
    1.7 研究思路
第二章 PI3K/ERK1/2/NF-κB/PPARα/SCAD信号途径在心肌纤维化动物模型中的表达变化及游泳运动的影响
    2.1 前言
    2.2 实验材料
        2.2.1 实验动物
        2.2.2 主要药物与试剂
        2.2.3 主要实验仪器和器材
        2.2.4 主要试剂的配置
    2.3 实验方法
        2.3.1 游泳运动
        2.3.2 大鼠尾动脉收缩压检测
        2.3.3 超声心动图
        2.3.4 心脏胶原形态检查
        2.3.5 心肌组织Real-time PCR分析
        2.3.6 心肌组织蛋白Western blot分析
        2.3.7 心肌组织SCAD酶活性检测
        2.3.8 心肌组织ATP含量的检测
        2.3.9 心肌组织游离脂肪酸含量检测
        2.3.10 心肌组织羟脯氨酸含量测定
        2.3.11 EMSA分析
        2.3.12 实验分组
    2.4 统计学分析
    2.5 实验结果
        2.5.1 各组大鼠血压的变化
        2.5.2 各组大鼠超声心动图参数的变化
        2.5.3 各组大鼠心肌组织形态学变化
        2.5.4 各组大鼠心肌组织信号分子的表达变化及游泳运动的干预
        2.5.5 各组大鼠心肌组织能量代谢的变化及游泳运动的干预
        2.5.6 各组大鼠心肌组织PPARα蛋白质与DNA探针结合活性的变化
    2.6 讨论
第三章 PI3K/ERK1/2/NF-κB/PPARα/SCAD信号途径在AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞中的变化
    3.1 前言
    3.2 实验材料
        3.2.1 实验动物
        3.2.2 主要药物和试剂
        3.2.3 主要实验仪器和器材
        3.2.4 主要试剂配置
    3.3 实验方法
        3.3.1 原代心肌成纤维细胞培养
        3.3.2 心肌成纤维细胞Real-time PCR分析
        3.3.3 心肌成纤维细胞Western blot分析
        3.3.4 心肌成纤维细胞增殖率检测
        3.3.5 心肌成纤维细胞SCAD酶活性检测
        3.3.6 心肌成纤维细胞ATP含量检测
        3.3.7 心肌成纤维细胞游离脂肪酸含量检测
        3.3.8 心肌成纤维细胞羟脯氨酸含量检测
        3.3.9 实验分组
    3.4 统计学分析
    3.5 结果
        3.5.1 AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞中信号分子的表达变化
        3.5.2 AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞能量代谢和细胞增殖的变化
    3.6 讨论
第四章 SCAD对心肌纤维化的作用受NF-κB调控
    4.1 前言
    4.2 实验材料
        4.2.1 实验动物
        4.2.2 主要试剂与药物
        4.2.3 主要仪器和器械
        4.2.4 主要试剂配置
    4.3 实验方法
        4.3.1 原代心肌成纤维细胞培养
        4.3.2 心肌成纤维细胞增值率检测
        4.3.3 心肌成纤维细胞Real-time PCR分析
        4.3.4 心肌成纤维细胞Western blot分析
        4.3.5 心肌成纤维细胞SCAD酶活性检测
        4.3.6 心肌成纤维细胞ATP含量检测
        4.3.7 心肌成纤维细胞游离脂肪酸含量检测
        4.3.8 心肌成纤维细胞羟脯氨酸含量检测
        4.3.9 实验分组
    4.4 统计学分析
    4.5 结果
        4.5.1 Maslinic acid对心肌成纤维细胞p-p65 表达的影响
        4.5.2 LPS与 Maslinic acid对 AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞p-p65、PPARα及SCAD表达的影响
        4.5.3 LPS与 Maslinic acid对 AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞能量代谢和细胞增殖的影响
    4.6 讨论
第五章 SCAD对心肌纤维化的作用受ERK1/2 调控
    5.1 前言
    5.2 实验材料
        5.2.1 实验动物
        5.2.2 主要试剂与药物
        5.2.3 主要仪器和器械
        5.2.4 主要试剂配置
    5.3 实验方法
        5.3.1 原代心肌成纤维细胞培养
        5.3.2 心肌成纤维细胞增值率检测
        5.3.3 心肌成纤维细胞Real-time PCR分析
        5.3.4 心肌成纤维细胞Western blot分析
        5.3.5 心肌成纤维细胞SCAD酶活性检测
        5.3.6 心肌成纤维细胞ATP含量检测
        5.3.7 心肌成纤维细胞游离脂肪酸含量检测
        5.3.8 心肌成纤维细胞羟脯氨酸含量检测
        5.3.9 实验分组
    5.4 统计学分析
    5.5 结果
        5.5.1 EGF与 PD98059对AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞p-IκBα、p-p65、PPARα、SCAD表达的影响
        5.5.2 EGF与 PD98059对AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞能量代谢和细胞增殖的影响
    5.6 讨论
第六章 SCAD对心肌纤维化的作用受PI3K p110α/γ调控
    6.1 前言
    6.2 实验材料
        6.2.1 实验动物
        6.2.2 主要试剂与药物
        6.2.3 主要仪器和器械
        6.2.4 主要试剂配置
    6.3 实验方法
        6.3.1 原代心肌成纤维细胞培养
        6.3.2 心肌成纤维细胞增值率检测
        6.3.3 心肌成纤维细胞Real-time PCR
        6.3.4 心肌成纤维细胞Western blot分析
        6.3.5 心肌成纤维细胞SCAD酶活性检测
        6.3.6 心肌成纤维细胞ATP含量检测
        6.3.7 心肌成纤维细胞游离脂肪酸含量检测
        6.3.8 心肌成纤维细胞羟脯氨酸含量检测
        6.3.9 实验分组
    6.4 统计学分析
    6.5 结果
        6.5.1 不同浓度的A66 对心肌成纤维细胞PI3K p110α表达的影响
        6.5.2 A66对AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞PI3K/ERK1/2/NF-κB/PPARα/SCAD信号途径的影响
        6.5.3 A66对AngⅡ处理的心肌成纤维细胞能量代谢和细胞增殖的影响
        6.5.4 不同浓度的AS605240 对心肌成纤维细胞PI3K p110γ表达的影响
        6.5.5 AS605240对AngⅡ刺激心肌成纤维细胞PI3K/ERK1/2/NF-κB/PPARα/SCAD信号途径的影响
        6.5.6 AS605240对AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞能量代谢和细胞增殖的影响
    6.6 讨论
总结与展望
    总结与创新
    不足与展望
参考文献
致谢
附录一 英文缩略词表
附录二 在硕士研究生期间完成的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]北五味子多糖通过ERK1/2通路对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖的作用机制[J]. 孙红霞,胡波,林慧娇.  北华大学学报(自然科学版). 2019(05)
[2]短链酰基辅酶A脱氢酶在大鼠心肌梗死后心力衰竭中的变化及有氧运动的干预作用[J]. 廖英勤,李忠洪,舒朝辉,钟小艺,苏永少,马智超,刘培庆,路静,臧林泉,潘雪刁,周四桂.  中华危重病急救医学. 2019 (02)
[3]PI3K/Akt信号通路调节心脏功能的研究进展[J]. 杨立霞,王楠,刘洋.  心脏杂志. 2018(03)
[4]野黄芩苷对血管紧张素Ⅱ诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞的增殖及ERK1/2、p38 MAPK信号通路的影响[J]. 辛博,陈力,万丽丽,郭澄.  中国药房. 2018(05)
[5]SIRT6在心血管疾病中的作用研究进展[J]. 张晓英,张致英.  中国药理学通报. 2018(02)
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博士论文
[1]miR-154上调Wnt/β-catenin信号通路在心肌纤维化中的作用机制研究[D]. 孙丽叶.山东大学 2017
[2]STAT1/3与ERK1/2通路协同调控高糖诱导的鼠CFs增殖和胶原合成[D]. 戴斌.天津医科大学 2016
[3]瘦素诱导心肌细胞肥大的机制研究[D]. 侯宁.广州医学院 2010

硕士论文
[1]短链酰基辅酶A脱氢酶在高血压血管重构中的作用[D]. 李忠洪.广东药科大学 2018
[2]短链酰基辅酶A脱氢酶在心肌纤维化中的作用[D]. 舒朝辉.广东药科大学 2017
[3]SIRT3通过调控β-catenin/PPARγ通路抑制ANG Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞转分化[D]. 严芳英.山东大学 2017
[4]c-Myc/NFκB/AP1调控c1orf109启动子活性的研究[D]. 许春梦.哈尔滨工业大学 2016
[5]TGR5对血管紧张素Ⅱ诱导乳小鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及机制[D]. 吴建利.西南医科大学 2016
[6]ERK1/2/PPARα/SCAD信号途径对生理性和病理性心肌细胞肥大的调控研究[D]. 黄秋菊.广东药学院 2015
[7]TWEAK通过NF-κB途径促进大鼠心肌成纤维细胞增殖并表达基质金属蛋白酶9[D]. 王德金.山东大学 2012
[8]尾加压素Ⅱ对血管外膜成纤维细胞表达单核细胞趋化蛋白-1的作用及机制研究[D]. 包世林.汕头大学 2010



本文编号：3694621