肾素（前体）受体在H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用及机制研究

发布时间：2024-05-14 02:09

　　心肌梗死的临床研究已余百年，虽已取得迅猛卓著进展，但其治疗仍是心血管医生面临的严峻挑战。经皮冠状动脉介入治疗（PCI）是急性心梗再灌注治疗的主要措施，且安全有效。但冠脉再通后常会出现心肌缺血再灌注损伤（IschamicReperfusion Injury,IRI），临床表现为急性心肌梗死患者冠脉再通，梗死心肌再灌注后段时间，有的患者却出现心律失常、心力衰竭甚至心源性猝死等系列病情反而恶化的表现，严重影响患者预后，成为目前阻碍急性心梗患者急诊再灌注治疗获益的主要难题。IRI是临床常见的病理生理过程，但其机制尚未完全阐明。研究认为，氧自由基增加、钙超载、心肌能量代谢异常、中性粒细胞激活、血管内皮细胞功能障碍等均参与了心肌IRI，并互为因果，最终导致心肌细胞凋亡和坏死。在心肌IRI中，细胞凋亡起到了重要作用，介导心肌IRI细胞凋亡的信号转导途径复杂多样，也是目前的研究热点之。深入了解心肌IRI及其致心肌细胞凋亡的分子生物学机制，阻断促发心肌IRI特别是细胞凋亡的信号转导通路，抑制心肌IRI，减少心肌细胞的缺失，改善心脏功能具有极其重要的临床意义。近年来研究证实肾素—血管紧张素系统(renin...

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第一部分 缺氧复氧导致肾素（前体）受体在 H9c2 胚胎大鼠心肌细胞中的表达变化
    （一） 前言
    （二） 材料和方法
        1、 实验材料
        2、 H9c2 细胞培养及传代
        3、 免疫细胞化学方法和步骤
        4、 免疫荧光方法和步骤
        5、 RT-PCR 检测 (P)RR mRNA 表达
        6、 siRNA 干扰实验
        7、 Real-Time PCR 检测(P)RR mRNA 的表达
        8、 心肌细胞缺氧/复氧模型的建立
        9、 实验分组
        10、 Western blot 方法测定(P)RR 蛋白表达
    （三） 数据统计方法
    （四） 结果
        1、 (P)RR 在 H9c2 胚胎大鼠心肌细胞中的表达
        2、 (P)RR 干扰的效率检测结果
        3、 缺氧复氧致(P)RR 蛋白表达的变化
    （五） 讨论
    （六） 结论
    （七） 参考文献
第二部分 缺氧复氧致 H9c2 心肌细胞凋亡及炎症因子表达增加
    （一） 前言
    （二） 材料和方法
        1、 实验材料
        2、 H9c2 细胞培养及传代
        3、 心肌细胞缺氧/复氧模型的建立
        4、 Annexin V-FITC／PI 双染法检测细胞凋亡步骤
        5、 Western blot 方法检测 Caspase-3 蛋白表达
        6、 ELISA 方法测定炎症因子表达
    （三） 数据统计方法
    （四） 结果
        1、 Annexin V-FITC/PI 法检测缺氧复氧组 H9c2 细胞凋亡率
        2、 缺氧复氧致 H9c2 细胞 Caspase-3 蛋白表达水平增加
        3、 缺氧复氧致 H9c2 细胞分泌炎症因子增加
    （五） 讨论
    （六） 结论
    （七） 参考文献
第三部分 肾素（前体）受体介导的 H9c2 心肌细胞缺氧复氧损伤的信号转导机制
    （一） 前言
    （二） 材料和方法
        1、 实验材料
        2、 H9c2 细胞培养及传代
        3、 心肌细胞缺氧/复氧模型的建立
        4、 实验分组
        5、 Western blot 检测 p-p38 及 Caspase-3 蛋白表达量
        6、 siRNA 干扰实验
        7、 ELISA 方法检测炎症因子表达水平
    （三） 数据统计方法
    （四） 结果
        1、 缺氧复氧致 p38MAPK 磷酸化水平增加
        2、 siRNA 干扰(P)RR 致 p-p38MAPK 表达下调
        3、 siRNA 干扰(P)RR 单独或合并阻断 p38MAPK 能够减轻缺氧复氧所致细胞凋亡
        4、 siRNA 干扰(P)RR 单独或合并阻断 p38MAPK 对缺氧复氧所致炎症因子IL-6、TNF-a、TGF-β表达的影响
    （五） 讨论
    （六） 结论
    （七） 参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢



本文编号：3973037