肝细胞生长因子和类胰岛素样生长因子对心肌干细胞的诱导作用

发布时间：2024-06-05 04:14

　　目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和类胰岛素样生长因子(IGF1)在外能否诱导心肌干细胞(CSCs)发生增殖并向心肌细胞定向分化。方法组织贴块法分离培养心肌干细胞,免疫荧光技术鉴定c-kit和CD34表达,流式细胞仪分选纯化c-kit+细胞,CFDA SE荧光探针示踪培养检测细胞增殖特征。实验分为单纯心肌干细胞组和与心肌共培养组,分别用HGF和IGF1干预,倒置显微镜观察细胞不同时期数量与形态的变化,活细胞工作站观察CFDA SE示踪剂荧光强弱,采集图像,进行统计学分析。免疫荧光技术检测Nkx2.5、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达。结果单纯心肌干细胞组,生长因子刺激后心肌干细胞数量与形态均无明显变化。与心肌共培养组,细胞均发生增殖与形态变化,Nkx2.5、cTnT阳性表达,有个别心肌干细胞分化为自发搏动的心肌细胞。结论心肌干细胞与心肌细胞共培养条件下,HGF和IGF1能够促进心肌干细胞增殖,联合作用能够诱导心肌干细胞向心肌细胞分化。

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【部分图文】：

图3c-kit的PE-CY7分选结果

CSCs形态及免疫荧光鉴定原代培养24h，成纤维样细胞从组织块边缘爬出，呈长梭形或多角形，48h数量明显增多;5d左右，心肌干细胞在成纤维样细胞层之上，从组织块边缘爬出，细胞体积小，呈圆球形，折光度高;约10d，小圆亮细胞大量爬出，14d长满整个培养瓶(图1)。收集心肌干细胞，免....

图6共培养各组心肌干细胞的Nkx2.5免疫荧光染色标尺示50μm(下同)

Vol．45，No．5朱蓓蓓等．肝细胞生长因子和类胰岛素样生长因子对心肌干细胞的诱导作用·667·图6共培养各组心肌干细胞的Nkx2.5免疫荧光染色标尺示50μm(下同)蓝色为DEPI标记细胞核，绿色为CFDASE标记的CSCs，红色为Nkx2.5图7共培养各组心肌干细胞的cTn....

图8与心肌共培养组心肌干细胞增殖与分化比率

·668·解剖学报45卷，5期图8与心肌共培养组心肌干细胞增殖与分化比率Fig．8Cardiacstemcellproliferationanddifferentiationrateinco-culturedwithcardiomyocytes殖、抑制细胞凋亡、缓解心力衰竭进程中....

本文编号：3989631