阿霉素致大鼠慢性心力衰竭后c-kit与nanog基因表达变化

发布时间：2017-08-12 09:19

  本文关键词：阿霉素致大鼠慢性心力衰竭后c-kit与nanog基因表达变化

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【摘要】：背景c-kit和nanog在干细胞的生长、增殖和分化中具有重要作用,探明c-kit与nanog阳性细胞和疾病之间的关系近年来引起关注。心脏中的c-kit+和nanog+细胞为心肌干细胞,它们能够分化成心肌细胞。我们以往的研究表明,在心肌梗死的边缘区nanog的表达增加,有利于修复受损心肌。然而心脏干细胞在心衰心脏中是增加还是减少,心衰是加强还是减弱心肌再能力仍不明确。目的探讨阿霉素致大鼠心力衰竭后心肌组织中c-kit与nanog的基因表达变化,为进一步研究充血性心衰过程中心肌再生提供形态学基础。方法1140只SD成年雄性大鼠,随机分为正常对照组15只与心衰模型组125只。心衰模型的制造：阿霉素按4mg/kg腹腔注射,每周一次,共6周。正常对照组给予等量生理盐水。在8周时,利用小动物彩超机对正常对照组和心衰模型组大鼠进行心功能检测,证明心衰形成；2摘取大鼠心脏,取右心壁近房室环处组织制作冰冻切片；利用免疫组化、免疫荧光显色等技术检测心肌组织中nanog和c-kit的基因表达部位；3提取右心壁近房室环处组织蛋白和mRNA;利用Western Blotting和：RT-PCR等技术检测和定量心肌组织中nanog和c-kit的基因表达量的变化。结果1 免疫组化显示正常和心衰的心肌组织中均有少量nanog与c-kitl阳性细胞表达。正常心肌组织中nanog细胞较少,小而圆,可散在,也可成群存在,位于心肌细胞之间、血管周围。大多数血管的内皮细胞均表达nanog,少量心肌细胞也呈阳性表达。心力衰竭大鼠的心肌组织内,nanog阳性的三类细胞均减少,而且只有在心内膜和心外膜下的心肌组织呈阳性分布。在正常和心力衰竭大鼠心肌组织中c-kit阳性细胞呈小圆形或椭圆形,三五成群存在,但未见到心肌细胞和内皮细胞c-kit阳性表达。与正常心肌相比,心力衰竭心肌内c-kit阳性细胞明显减少。2免疫荧光显示在正常对照组中nanog蛋白表达于更多的心肌中,主要在部分心肌细胞表达、血管内皮和小圆形细胞也呈强阳性表达,分布不均匀。心力衰竭心肌中nanog表达阳性的细胞主要分布于心外膜下心肌和心内膜下心肌,表达量较正常心肌明显减少,且心内膜侧心肌表达量较心外膜侧减少。c-kit蛋白主要表达于心肌中的小型细胞,这些细胞在心肌中往往成群分布,主要聚集于心外膜下的心肌内。与正常心肌相比,心衰后c-kit阳性细胞明显减少。未见到心肌细胞和内皮细胞表达c-kit荧光。另外,还可以观察到少数细胞共表达nanog和c-kit现象。3 Western blotting结果显示：正常对照组中c-kit与nanog的表达量分别为451846.3+7029.35和301859.0±3549.73；心衰模型组中c-kit和nanog表达量分别为146428.7±8029.24和196803.3±3066.76；正常对照组c-kit蛋白和nanog蛋白表达明显多于心衰模型组(P0.05)。4 RT-PCR结果显示：在正常对照组中c-kit与nanog的表达水平分别为115696.33±8225.82和108401.7±12090.2；心衰模型组中c-kit和nanog表达水平分别为69273.7±16375和92935.67±14648.7；正常对照组c-kit mRNA和nanog mRNA表达明显多于心衰模型组(P0.05)。结论心力衰竭可导致心肌内c-kit和nanog阳性干细胞减少,心肌再生潜能下降。
【关键词】：c-kit nanog 免疫组织化学 免疫印迹 RT-PCR 心肌干细胞 慢性心力衰竭 大鼠心脏
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R541.6
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-11
• 材料与方法11-26
• 结果26-28
• 讨论28-30
• 小结30-31
• 附图31-34
• 参考文献34-38
• 综述：干细胞治疗心衰的研究进展38-61
• 参考文献52-61
• 附录：常见英文缩写61-62
• 攻读学位期间发表文章情况62-63
• 致谢63-64
• 个人简历64-65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 武俊芳;韩金珠;郭志坤;蔡新华;;Nanog蛋白在小鼠心肌组织发育中的表达[J];解剖学杂志;2008年04期

2 常连生;郭志坤;严泉剑;;“永生基因”Nanog的研究进展[J];医学综述;2007年17期

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本文编号：660846