重组9型腺相关病毒转染小鼠骨髓间充质干细胞

发布时间：2017-09-26 14:48

  本文关键词：重组9型腺相关病毒转染小鼠骨髓间充质干细胞

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【摘要】：背景:重组9型腺相关病毒对心肌细胞具有良好的亲和力,是目前研究基因治疗心肌梗死的理想载体。目的:观察携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒(r AAV9-e GFP)对小鼠骨髓间充质干细胞的转染效率。方法:将携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒以不同感染复数(1×105,1×106,1×107)转染体外培养的第4代小鼠骨髓间充质干细胞,并在转染后1-7 d连续用荧光倒置显微镜观察骨髓间充质干细胞中增强型绿色荧光蛋白阳性表达情况,寻找最佳感染条件;采用流式细胞仪检测最佳感染复数下携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒对小鼠骨髓间充质干细胞的转染效率。结果与结论:转染后第1天,感染复数为1×107组可见增强型绿色荧光蛋白开始表达,转染后第2天,感染复数为1×105、1×106组开始表达;各组增强型绿色荧光蛋白表达强度随感染复数值的增高而增强,同时增强型绿色荧光蛋白的表达强度随着时间延长而逐渐增强;转染后第5天达到高峰,此时感染复数为1×107组转染效率约8%,结果表明携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒对小鼠骨髓间充质干细胞转染效率较低。
【作者单位】： 新疆医科大学第一附属医院心脏中心;
【关键词】： 小鼠 骨髓 间质干细胞 转染 干细胞 骨髓干细胞 重组型腺相关病毒 国家自然科学基金
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81260022)~~
【分类号】：R542.22
【正文快照】： 0引言Introduction干细胞移植治疗急性心肌梗死后心力衰竭是目前的研究热点,骨髓间充质干细胞获得容易,不存在伦理问题,易于培养,且在体外多次传代后仍能保持干细胞的一些基本的生物学特性[1],因此,它在干细胞治疗中成为首选,但也存在移植后存活率低和向心肌分化效率低的问题[

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1 张W，

本文编号：924130