Th17细胞与IL-17在TON中的作用及机制的实验研究

发布时间：2017-12-09 15:24

  本文关键词：Th17细胞与IL-17在TON中的作用及机制的实验研究

  更多相关文章： 外伤性视神经病变 Th17细胞 IL-17 流式细胞仪 免疫组化学 蛋白免疫印迹

【摘要】：目的： 1.建立SD大鼠外伤性视神经病变动物模型,观察SD大鼠外伤性视神经病变后Th17细胞(Th17lymphocytes)及IL-17(interleukin-17)的变化趋势。 2.探讨Thl7细胞和IL-17在外伤性视神经病变中的作用,为治疗外伤性视神经病变提供理论依据。 方法： 1.采用液压冲击颅脑损伤仪建立外伤性视神经病变动物模型,将70只4周龄健康雄性SD大鼠随机分为3组：正常组10只,假伤对照组10只和实验组50只,实验组分为5个亚组(1d、3d、7d、14d、28d,每组10只)。实验组大鼠用液压颅脑损伤仪(FPI)建立外伤性视神经病变模型；假伤对照组大鼠除不进行打击外,余处理同实验组；正常组大鼠不进行任何处理。 2.分别在造模后1、3、7、14、28天对正常组、假伤对照组和相应实验组大鼠进行闪光视觉诱发电位(F-VEP)检查,取大鼠脾脏制备脾单细胞悬液进行Th17细胞的流式细胞学计数,制作大鼠眼球标本进行IL-17免疫组化染色,提取视神经蛋白应用蛋白免疫印迹(Western blot)检测视神经中IL-17蛋白的表达。 结果： 1.闪光视觉诱发电位结果显示：各组大鼠均可引出典型的NPN波形。与正常组相比较假伤对照组大鼠的隐含值稍升高,振幅稍降低,但与正常组比较没有统计学意义(t=-0.219,P=0.829；t=-0.218,=0.830)；与假伤对照组相比较各实验组大鼠的隐含值从损伤后开始上升,到14d左右开始稳定,而振幅正相反,从损伤后开始下降,到14d左右开始稳定,与假伤对照组相比均有统计学意义(t=2.769,3.171,7.503,10.278,12.264,P0.05；t=3.413,5.979,7.291,9.352,10.070,P0.05)。 2.流式细胞学检查结果显示：与正常组相比较假伤对照组大鼠的脾脏单细胞悬液中,Thl7细胞占CD4+T细胞的比例稍增高,但与正常组比较没有统计学意义(t=-0.241,P=0.813)；与假伤对照组相比较各实验组Th17细胞占CD4+T细胞的比例从损伤后开始上升,损伤后7d达到高峰,然后开始下降,但28d时仍高于假伤对照组。与假伤对照组相比较差异均具有统计学意义(t=12.244,13.659,18.302,19.813,13.938；P0.05)。 3.IL-17免疫组化结果显示：与正常组相比较假伤对照大鼠组视网膜中IL-17阳性表达稍增多,但与正常组比较没有统计学意义(t=-0.537,P=0.496)；与假伤对照组相比较各实验组大鼠视网膜中IL-17阳性表达从损伤后开始上升,损伤后7d达到高峰,然后开始下降,但28d时仍高于假伤对照组。与假伤对照组相比较差异均具有统计学意义(t=4.253,5.219,7.974,9.528,7.441；P0.05)。 4. Western Blot检测结果显示：与正常组相比较假伤对照组大鼠视神经中IL-17蛋白表达稍增高,但与正常组比较没有统计学意义(t=-0.405,P=0.690)；与假伤对照组相比较各实验组大鼠视神经中IL-17蛋白表达从损伤后开始上升,损伤后7d达到高峰,然后开始下降,但28d时仍高于假伤对照组。与假伤对照组相比较差异均具有统计学意义(t=5.342,7.469,9.737,10.484,8.946；P0.05)。 结论： 1.实验组大鼠的隐含值从损伤后开始上升,而振幅从损伤后开始下降,并均在14d左右开始稳定,这些改变符合临床上视神经外伤后的电生理检查变化特征,表明用FPI可以成功造成外伤性视神经病变。 2.假伤对照组大鼠脾脏单细胞悬液中Th17细胞占CD4+T细胞的比例、IL-17免疫组化及IL-17蛋白的表达与正常组相比较差异没有统计学意义,说明除打击外的操作对Th17细胞及IL-17的表达没有影响。 3.实验组大鼠脾脏单细胞悬液中Th17细胞占CD4+T细胞的比例、IL-17免疫组化及IL-17蛋白的表达与假伤对照组相比较均有统计学意义,说明Th17细胞及IL-17可能在外伤性视神经病变的发生和进展过程中起到了一定的促进作用。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R779.1

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 张琳琳;吕瀛娟;于荣国;王兴;申战省;张蔚;颜华;;标准化大鼠外伤性视神经损伤动物模型建立[J];眼外伤职业眼病杂志(附眼科手术);2008年12期

2 李佳;陈小平;;Th效应细胞家族的新成员——Th17[J];中国免疫学杂志;2007年11期

，

本文编号：1270900