卡介菌纯蛋白衍生物玻璃体腔注射诱导Eales病动物模型的研究

发布时间：2018-02-20 23:22

  本文关键词： Eales病 人视网膜可溶性抗原第35段抗原决定簇(HS-AgP35) 卡介菌纯蛋白衍生物(BCG-PPD) 双链DNA抗体 动物模型　出处：《遵义医学院》2010年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】： 目的：探讨卡介菌纯蛋白衍生物玻璃体腔注射建立Eales病动物模型。方法：将成年雄性SD大鼠(N=96)随机分成四组分别为：致敏Ⅰ(N'=24)、Ⅱ(N'=24)、Ⅲ(N'=24)及非致敏组(N'=24),其中每组再分四个亚组(n=6)。致敏Ⅰ组：用BCG-PPD 5U+FICA致敏；致敏Ⅱ组：用浓度为1mg/ml的HS-AgP35+FICA佐剂等体积混合置乳钵中研匀乳化后,取0.2ml抗原注入大鼠双后足垫皮内致敏；致敏Ⅲ组：用浓度为1mg/ml的HS-AgP35+FICA等体积置乳钵中研匀乳化后,取0.1ml抗原于大鼠单侧后足垫皮内注射,另一侧足垫用BCG-PPD 5U+FICA行皮内注射致敏；非致敏组未行任何处理。14d后玻璃体腔注射BCG-PPD 5U、10U、20U及生理盐水。通过对SD大鼠行荧光素眼底血管造影(fluorescein fundus angiography,FFA)、视网膜铺片、视网膜病理切片、血清抗HS-AgP35抗体、血清抗dsDNA抗体、MTT等指标的检查及测定并作出相关性分析。结果：1、血清中抗HS-AgP35抗体测定：1.1、同一组别不同剂量血清中抗HS-AgP35抗体进行比较：致敏Ⅰ组：5U组血清中抗HS-AgP35抗体浓度高于NS组、10U组,差异有统计学意义(P=0.005,95%CI0.0158-0.0732；P=0.002,95%CI0.0211-0.0739)。致敏Ⅱ组：10U组和20U组血清中抗HS-AgP35抗体浓度高于5U组,差异有统计学意义(P=0.022,95%CI0.0661-0.0705；P=0.003,95%CI0.0200-0.0844)。非致敏组与致敏Ⅲ组组内比较均无统计学意义(P0.05)。1.2、相同剂量不同组别血清中抗HS-AgP35抗体进行比较：5U组：致敏Ⅰ组和Ⅲ组血清中抗HS-AgP35抗体浓度高于致敏Ⅱ组,差异有统计学意义(P=0.000,95%CI0.0444-0.0783；P=0.045,95%CI0.0017-0.1243)。10U组：致敏Ⅱ组和Ⅲ组血清中抗HS-AgP35抗体浓度高于非致敏、致敏Ⅰ组,差异有统计学意义(P=0.007,95%CI0.0088-0.0482；P=0.017,95%CI0.0048-0.0442；P=0.002,95%CI0.0133-0.0527；P=0.006,95%CI0.0093-0.0487)。2、血清中双链DNA抗体测定：2.1、同一组别不同剂量血清中双链DAN抗体测定：致敏Ⅱ组：10U组血清中抗ds DNA抗体浓度高于NS组、5U组、20U组,差异有统计学意义(P=0.003,95%CI0.0164-0.0680；P=0.009,95%CI0.0097-0.0613；P=0.004,95%CI0.0145-0.0661)。非致敏组、致敏Ⅰ组、Ⅲ组组内不同剂量比较均无统计学意义(P0.05)。2.2、同剂量不同组别血清中双链DAN抗体测定：5U组：致敏Ⅰ组血清中抗双链DNA抗体浓度高于非致敏组、致敏Ⅲ组,差异有统计学意义(P=0.021,95%CI0.0057-0.0626；P=0.008,95%CI0.0115-0.0685)。10U组：致敏Ⅲ组血清中抗双链DNA抗体浓度高于非致敏组、致敏Ⅰ组,差异有统计学意义(P=0.016、95%CI0.0152-0.1295；P=0.010,95%CI0.0210-0.1353)。20U组：致敏Ⅲ组血清中抗双链DNA抗体浓度高于非致敏组,差异有统计学意义(P=0.022,95%CI0.0041-0.0475)。NS组：致敏与非致敏组无统计学意义(P0.05)。3、淋巴细胞转化实验：致敏Ⅲ组血清中淋巴细胞刺激指数高于非致敏组和致敏Ⅰ组,差异有统计学意义(X2=9,X2=9,P=0.016,P=0.028),致敏Ⅱ组血清中淋巴细胞刺激指数高于非致敏组,差异有统计学意义(X2=7,P=0.015)；致敏Ⅰ组与非致敏组、致敏Ⅱ组比较,差异无统计学意义(P0.05)；致敏Ⅱ组与Ⅲ组比较差异无统计学意义(P0.05)。4、眼底荧光血管造影检查：非致敏组与致敏Ⅰ组玻璃体腔注射不同剂量BCG-PPD后出现眼前段炎症表现,FFA见视网膜静脉血管扩张、迂曲,静脉血管管壁着染,未见视网膜出血点及渗出,未见荧光遮蔽。致敏Ⅱ组见视网膜静脉管壁荧光渗漏,致敏Ⅲ组见视网膜静脉管壁荧光渗漏及视网膜新生血管影像,四组均未见无灌注区,未见渗出性视网膜脱离。5、视网膜病理切片及FITC-dextran心内灌注铺片：视网膜病理切片见非致敏组及致敏Ⅰ组视网膜增厚,皱褶、结构紊乱,视网膜血管扩张、充血,血管旁未见淋巴细胞浸润,未见新生血管。致敏Ⅱ组及Ⅲ组除有以上表现外,还在视网膜血管旁发现少量淋巴细胞浸润。视网膜铺片见非致敏组血管走行紊乱,管壁着染,血管见结节样突起,未见荧光渗漏,致敏Ⅰ组见视网膜血管荧光渗漏；致敏Ⅱ组出现血管狭窄,致敏Ⅲ组见血管闭塞及无灌注区。结论：1、用HS-AgP35抗原、HS-AgP35抗原联合BCG-PPD大鼠足垫皮内致敏后玻璃体腔注射BCG-PPD可产生产生视网膜血管炎症；2、玻璃体腔注射BCG-PPD,联合致敏组较单一致敏及非致敏组易产生视网膜血管炎症,玻璃体腔注射BCG-PPD浓度不同,所引发的机体免疫应答和视网膜血管炎症反应的程度有差异；3、推测通过向致敏大鼠玻璃体腔注射BCG-PPD,机体可能通过致敏T/B淋巴细胞引发视网膜血管炎。
[Abstract]:Objective : To investigate the establishment of an animal model of Eales disease by intracoelom injection of pure protein derivatives of BCG . Methods : The levels of anti - HS - AgP35 antibody in sera of adult male SD rats ( N ' = 24 ) , 鈪，

本文编号：1520322