前房内免疫微环境的动态变化与角膜移植免疫排斥反应的实验研究

发布时间：2018-10-19 20:13

【摘要】： 目的： 研究前房内免疫微环境的动态变化与角膜移植免疫排斥反应的关系。 方法： 建立小鼠穿透性角膜移植术(PKP)模型。60只BALB/c小鼠随机分为三组：异系PKP组(A组)、异系PKP+FK506前房植入组(B组)和原位PKP组(C组),术后裂隙灯观察各组是否有植片免疫排斥发生及排斥时间,病理学检测3天、7天及植片免疫排斥时各组角膜植片及虹膜睫状体内炎细胞浸润情况；免疫荧光法检测3天、7天及植片免疫排斥时各组植片及虹膜睫状体内CD4+T细胞及MHC-Ⅱ+细胞的表达；Real-time RT-PCR检测A组及B组7天、14天、21天虹膜睫状体内CD4+T细胞的亚群--Th1及Th17细胞的特征性细胞因子(IFN-γ和IL-17)和特征性转录因子(T-bet和RORγt)的mRNA表达水平。 结果： A组植片发生植片免疫排斥的平均时间为16.18±4.81天,B组和C组未见明显的免疫排斥反应发生。组织病理学显示A组3天时角膜缘出现炎症细胞浸润,并可见炎症细胞粘附于角膜内皮面,角膜植片未见明显炎细胞浸润；7天时除角膜缘有炎症细胞浸润外,可见前房角内多量淋巴细胞,部分粘附于角膜内皮,角膜植片未见明显炎细胞浸润；植片免疫排斥时角膜缘无明显炎细胞浸润,植片内可见大量炎细胞浸润,且有大量新生血管长入。B组及C组3天、7天及A组植片免疫排斥同时间点时仅角膜缘有炎症细胞浸润,前房及角膜内皮和角膜植片均未见明显炎细胞。免疫荧光示A组术后3天仅少量CD4+、MHC-Ⅱ+细胞沿虹膜睫状体走形,角膜植片无表达；7天时可见虹膜睫状体、前房角及角膜缘多量CD4+、MHC-Ⅱ+细胞聚集,角膜植片无明显表达；角膜植片排斥时可见虹膜睫状体及角膜植片大量CD4+细胞表达,并可见前房内CD4+细胞团,MHC-Ⅱ+细胞在虹膜睫状体、角膜缘及角膜植片少量表达。B组虹膜睫状体及角膜植片均未见明显CD4+、MHC-Ⅱ+细胞表达。C组仅7天时在虹膜及角膜缘有CD4+、MHC-Ⅱ+表达,余时间点均无明显表达。Real一t ime RT-PCR示A组术后7天IL-17mRNA及其转录因子RORγt明显升高,术后14天及21天IFN-γ及其转录因子T-bet表达逐渐上升,IL-17mRNA及其转录因子RORγt水平逐渐下降;前房FK506-DDS植入组细胞因子及其转录因子的表达水平在各个时间点均处于低水平,未见明显变化。 结论： 前房内免疫微环境的动态失衡是引起角膜移植免疫排斥的主要因素。虹膜睫状体-角膜内皮途径输送免疫活性细胞在微环境的改变中发挥重要作用,阻断这一途径可以有效预防角膜移植免疫排斥反应的发生。Th17细胞在角膜移植免疫排斥反应的早期可能起促进作用,Th1细胞在角膜移植免疫排斥反应的发生中起主要作用。
[Abstract]:Aim: to study the relationship between the dynamic changes of immune microenvironment in anterior chamber and corneal allograft rejection. Methods: the (PKP) model of penetrating keratoplasty in mice was established. Sixty BALB/c mice were randomly divided into three groups: group A (allogeneic PKP), group B (anterior chamber implantation of heterologous PKP FK506) and group C (orthotopic PKP). To observe whether the graft immune rejection occurred and the time of rejection in each group, The infiltration of corneal grafts and iridocyclitis cells in 3 days, 7 days and graft rejection was detected by pathology. The expression of CD4 T cells and MHC- 鈪，

本文编号：2282239