靶向survivin基因siRNA对喉癌细胞增殖、凋亡的影响

发布时间：2019-08-08 11:08

【摘要】： 目的:观察靶向survivin基因的siRNA对喉癌细胞株Hep-2增殖和凋亡的影响,为喉癌的基因治疗提供有效靶点及技术。方法:使用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将靶向survivin基因的siRNA转染至喉癌细胞株Hep-2;MTT[3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐]法检测survivin-siRNA对喉癌细胞株Hep-2增殖的影响;转染survivin-siRNA后,RT-PCR检测喉癌细胞株Hep-2 survivin基因mRNA表达的变化;Western Blot检测survivin基因蛋白表达;流式细胞技术检测喉癌细胞株Hep-2凋亡情况。结果:各浓度survivin-siRNA转染组细胞增殖抑制率和凋亡率均明显高于对照组(P0.05),survivin mRNA和蛋白表达有不同程度减弱,并且有明显的浓度依赖性,随着浓度的上升表达率下降。结论:利用RNA干扰技术沉默survivin基因表达可以显著抑制喉癌细胞株Hep-2细胞增殖,并在一定程度上诱导其自发凋亡,不同浓度survivin-siRNA转染能下调survivin mRNA和蛋白表达,靶向survivin基因的RNA干扰技术在喉癌的基因治疗中具有一定价值。
【图文】：

2 SiRNA 对 survivin 基因 mRNA 表达的抑制作用 Sp-2 细胞 mRNA 表达有明显抑制作用，，抑制率明显高于空白和非特异性 siRNA 对照组(P < 0. 05)；0.2μmol/L、0.4μmol/Lsurvivin mRNA 表达差异有统计学意义( P < 0. 05)，而空白对非特异性siRNA 对照组内survivin mRNA 水平无明显变化(图rvivin-siRNA 作用于 Hep-2 细胞 24h 后 survivin mRNA 表达明诱导survivin mRNA 特异性降解。

2.3 SiRNA 转染 Hep-2 细胞后 survivin 蛋白表达变化 各浓度染组 survivin 蛋白表达有不同程度下调,并且有明显的浓度依赖性，随率下降，0.8μmol/L 浓度转染组最明显，而在空白对照组、空脂质体对siRNA 对照组内 survivin 蛋白表达无明显改变(图 2.3)。
【学位授予单位】：宁波大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R739.65

【参考文献】

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本文编号：2524328