小鼠高眼压模型的建立和JNK3在其视网膜的表达

发布时间：2019-09-17 19:53

【摘要】： 目的：用非侵袭性的方法确定正常小鼠的眼内压值；建立小鼠的慢性高眼压模型；观察c-Jun氨基末端激酶3 (c-Jun N-terminal kinases3, JNK3)在正常小鼠和慢性高眼压模型小鼠视网膜中的表达情况；分析JNK3和视网膜神经节细胞凋亡的关系。方法： 1、用TONO-PEN AVIA眼压笔测量正常C57BL/6小鼠眼内压,连续五天。 2、44只C57BL/6小鼠一侧眼用来诱导慢性高眼压。散大瞳孔后麻醉小鼠,前房穿刺使前房变浅,使用532激光行角膜缘激光光凝(能量100 mW、时间0.05秒、光斑大小200um)。另一只眼作为对照眼。TONO-PEN AVIA眼压笔分别在激光光凝后1周、2周、4周、8周测量小鼠眼内压。裂隙灯显微镜观察小鼠眼球结构变化情况。 3、分别于1周、2周、4周和8周摘除小鼠双侧眼球,进行冰冻切片,采用HE染色,光镜下观察视网膜情况。TUNEL计数视网膜切片的细胞凋亡。RT-PCR检测正常小鼠和慢性高眼压模型小鼠视网膜中JNK3 mRNA的表达量。结果： 1、正常小鼠眼内压是13.46±2.05mmHg。最高19mmHg,最低9mmHg。 2、在1到8周,实验眼的眼内压明显高于对照眼(p0.05),最高眼内压是31mmHg,只有一眼。眼压平均在20mmHg左右。激光光凝后所有实验眼出现角膜水肿,但在3天后角膜完全透明,2只眼发生角膜混浊,2只眼发生白内障,1只眼发生眼球萎缩,1只眼发生眼球穿孔。4只眼压无明显升高。而在整个实验中,对照眼没有发现任何并发症。 3、在实验眼HE染色可见房角狭窄。在第2周,内核层和视网膜神经节细胞层细胞数较对照眼轻度减少,在第4周和第8周,细胞数明显减少。第1周、第2周、第4周和第8周,视网膜神经节细胞层TUNEL阳性细胞数分别是0.38±0.49、0.52±0.64、0.46±0.66和0.50±0.59。而在对照眼,未发现TUNEL阳性细胞(p0.05),无统计学意义。RT-PCR结果显示JNK3 mRNA表达量随眼压升高而升高,但各个时期实验眼JNK3 mRNA的表达量未见明显差异。结论： 1、TONO-PEN AVIA眼压笔能较快的测量小鼠眼内压并且重复性高。它也能用于小鼠高眼压模型的眼内压测量。 2、角膜缘激光光凝能造成小鼠眼内压升高,通过这个方法可以建立研究青光眼视神经损害的模型。 3、视网膜中JNK3 mRNA表达量的增高与眼内压的升高密切相关。它可能在视网膜神经节细胞凋亡的机制中发挥一定作用。
【图文】：

同时右眼倍诺喜滴眼液点眼3次。仔细观察每只小鼠的如果捏小鼠的后背皮肤无反应则进行手术。(3)前房穿刺:在裂隙灯显微镜下，用0.3xl3大小的针头从鼻下方刺入前房，，释放房水，使前房变浅，房角关闭。(图2)(4)激光光凝:前房变浅后立即用532一二极管激光直接行右眼角膜。激光的能量大小、时间和光斑大小分别为:100mw、0.055和Zoo士8个。整个过程在10分钟内完成。(图3)(5)术后处理:术后点润舒滴眼液和红霉素眼膏。并观察小鼠全身情。

激光光凝,角膜缘,前房穿刺

(4)激光光凝:前房变浅后立即用532一二极管激光直接行右眼角膜缘3600光凝。激光的能量大小、时间和光斑大小分别为:100mw、0.055和Zooum。光斑93士8个。整个过程在10分钟内完成。(图3)(5)术后处理:术后点润舒滴眼液和红霉素眼膏。并观察小鼠全身情况至其苏醒。Schie住irn、管图1散大瞳孔前房穿刺图2前房穿刺
【学位授予单位】：昆明医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R77

【引证文献】