多重聚合酶链反应诊断真菌性鼻窦炎的实验研究

发布时间：2019-10-23 14:34

【摘要】：目的：通过标准真菌菌株DNA构建一多重PCR反应体系,并初步探讨其对真菌性鼻窦炎临床标本快速诊断及同时鉴定常见致病菌的临床应用。通过与传统的诊断方法比较,评价多重PCR反应体系快速诊断及菌种鉴定的诊断价值。 方法：选择三对引物(真菌通用引物、曲霉特异性引物、毛霉特异性引物)建立多重PCR反应体系,采用曲霉菌、毛霉菌、链格孢菌、白色念珠菌等6种标准菌株DNA验证体系的适用性和摸索反应条件。同时将多重PCR、真菌培养两种方法用于真菌性鼻窦炎的鼻窦内容物的真菌检测,比较二者敏感性。 结果：三对引物具有较好的通用性和特异性,在适宜的反应条件下能扩增出特异性目的片段(真菌通用引物、曲霉特异性引物、毛霉特异性引物的目的片段长度分别为：300-400bp、240bp、170bp),无明显非特异性条带干扰,目的条带清晰。该反应体系的检测灵敏度为10pg/ul。 25例真菌性鼻窦炎标本,真菌培养检测阳性10例,阳性率40%；多重PCR体系检测阳性18例,阳性率72%,采用配对资料χ2检验,两者差异有统计学意义(P0.05)。 结论：利用6种标准真菌菌株成功建立了多重PCR反应体系,其最低可检测到10pg/ul的真菌DNA,可对真菌性鼻窦炎做出快速诊断并鉴定常见的致病菌属。多重PCR体系对真菌性鼻窦炎的标本的检测阳性率高于传统真菌培养法。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R765.21

【参考文献】

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本文编号：2552143