Tempol抗氧化剂在间歇低氧大鼠胰腺组织氧化应激损伤干预机制中的研究
发布时间：2020-06-06 15:53
【摘要】：[目的]通过建立间歇性低氧(Intermittent Hypoxia,IH)模型,模拟人类阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS),观察Tempol抗氧化干预后大鼠血清葡萄糖(glucose)、胰岛素(insulin)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平的变化,外周血中肿瘤标记物(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)炎症因子及大鼠胰腺组织匀浆中c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK、胞浆及胞核中核转录因子 kB p65(Nuclear factor-KB,NF-kB p65)转录因子表达水平的变化,探讨抗氧化剂对胰腺组织局部炎症和氧化应激反应损害的干预及抑制作用。[方法]1.采用SPF级成年雄性Wistar大鼠24只,体重:200-220g。将所有实验大鼠随机分为为4组。即间歇低氧组(IH组)、抗氧化剂干预组(IH+Tempol组)、正常抗氧化剂对照组(NC+Tempol组)、正常对照组(NC组),每一处理组实验大鼠为6只,分别置于2个氧舱,每个氧舱中3只。每日间歇低氧暴露时间为9Am-5Pm,总时长为12周。第13周第1天对各处理组大鼠进行麻醉,采用放血处死法后取一部分外周血及胰腺组织待用。2.大鼠间歇性低氧暴露12周后:(l)测量血清中glucose、insulin及HOMA-IR水平的变化;(2)采用ELISA法检测各处理组外周血中TNF-α、IL-6和IL-1β水平的变化;(3)各组胰腺组织做病理切片,观察抗氧化后IH大鼠胰腺组织的病理改变;(4)Western blot检测各组胰腺组织中转录因子JNK、p-JNK、胞浆及胞核中NF-kB p65的表达水平变化;[结果]1.各组动物血清中空腹glucose,insulin及HOMA-IR的水平的测定:(1)与NC组比较,IH组、IH+tempol组大鼠血清中葡萄糖含量明显升高,NC+tempol组无明显改变,IH+tempol组较IH组有所降低,各组间比较有显著差异性(F=8.235,P=0.000),IH 组与 IH+tempol 组、NC+tempol 组以及 NC 组比较差异有统计学意义(P值0.01),其余组间两两比较无差异;(2)与NC组比较,IH组、IH+tempol组大鼠血清中胰岛素含量明显升高,NC+tempol组无明显改变,IH+tempol组较IH组有所降低,各组间比较有显著差异性(F=66.672,P=0.000),除NC+tempol组与NC组比较无差异,其余各组间差异均有统计学意义(P值0.01);(3)与NC组比较,IH组、IH+tempol组胰岛素抵抗指数明显升高,NC+tempol组无明显差距,IH+tempol组较IH组有所降低,各组间比较有显著差异性(F=76.172,P=0.000),除NC+tempol组与NC组比较无差异,其余各组间差异均有统计学意义(P值0.01);2.各组动物血清中TNF-α、IL-6、IL-lβ相关炎性指标的水平(1)与NC组比较,IH组、IH+tempol组TNF-α水平明显升高,NC+tempol组无明显改变,IH+tempol组较IH组有所降低,各组间比较有显著差异性(F=115.006,P=0.000),IH 组与 IH+tempol 组、NC+tempol 组以及 NC 组比较差异有统计学意义(P值0.01),其余组间两两比较无差异;(2)与NC组比较,IH组、IH+tempol组IL-6水平明显升高,NC+tempol组无明显改变,IH+tempol组较IH组有所降低,各组间比较有显著差异性(F=39.988,P=0.000),除NC+tempol组与NC组比较无差异,其余各组间差异均有统计学意义(P 值0.05);(3)与NC组比较,IH组、IH+tempol组IL-1β水平明显升高,NC+tempol组无明显改变,IH+tempol组较IH组有所降低,各组间比较有显著差异性(F=27.919,P=0.000),除NC+tempol组与NC组、IH+tempol组比较无差异,其余各组间差异均有统计学意义(P值0.05);3.各处理组胰腺组织病理改变结果:IH组较NC组大鼠胰腺组织小叶结构缺损甚至消失,腺泡组织呈不同程度萎缩,腺泡细胞排列紊乱,间隔增宽,外周炎性细胞明显增多;IH+tempol组相对于IH组大鼠胰腺组织小叶结构较完整,腺泡组织萎缩程度减少,周边炎症细胞数量减少,存在恢复正常的变化趋势。4.胰腺组织内转录因子JNK、p-JNK、NF-kBp65及抗氧化剂干预后的表达水平:(1)与NC组比较,IH组、IH+tempol组p-JNK表达水平明显升高,NC+tempol组无明显区别,IH+tempol组较IH组有所降低,各组间比较有显著差异性(F=43.878,P=0.000),不同处理组JNK蛋白相对表达量无明显变化,组间比较无显著差异性(F=2.129,P=0.129)。p-JNK蛋白相对表达量进一步进行组间比较IH组与IH+tempol组、NC+tempol组以及NC组比较差异有统计学意义(P值0.05),其余组间两两比较无差异;(2)与NC组比较,IH组、IH+tempol组胞浆内NF-kBp65相对表达量水平明显降低,NC+tempol组无明显区别,IH+tempol组较IH组有所升高,各组间比较有显著差异性(F=50.176,P=0.000),除NC+tempol组与NC组比较无差异,其余各组间差异均有统计学意义(P值0.01);(3)与NC组比较,IH组、IH+tempol组胞核内NF-kB p65相对表达量水平明显升高,NC+tempol组无明显区别,IH+tempol组较IH组有所降低,各组间比较有显著差异性(F=67.551,P=0.000),除NC+tempol组与NC组比较无差异,其余各组间差异均有统计学意义(P值0.01);[结论]1.Tempol抗氧化剂通过干预和抑制IH降低血清葡萄糖、胰岛素、胰岛素抵抗水平;2.Tempol抗氧化剂可以降低由IH引发的氧化应激诱导的炎症反应水平,但尚不能完全逆转;3.Tempol抗氧化剂通过干预和抑制IH减少受损胰腺组织周围炎症细胞浸润,且胰腺组织小叶结构存在恢复倾向;4.Tempol抗氧化剂通过干预和抑制IH引起的氧化应激反应使得胰腺组织的氧化应激敏感的信号转导通路p-JNK及胞核内NF-kB p65炎症信号转导表达的下降,胞浆内NF-kB p65表达的升高;
【图文】：
注：＊组与ＮＣ组比较（ＰＣ０．０１），邋▲组与ＮＣ＋Ｔｅｍｐｏｌ组比较（ＰＣ０．０１），S米橛搿剑龋裕澹恚穑熳殄义媳冉希ǎ校迹埃澹埃保溆嘧榧淞搅奖冉喜钜煳尥臣蒲б庖澹ǎ校荆埃澹埃担╁义媳恚场⑼迹部煽闯霾煌碜榇笫笱迤咸烟撬降谋浠耄危米楸冉希义希桑茸椤ⅲ桑龋簦澹恚穑铮熳榇笫笱逯衅咸烟呛棵飨陨撸危茫簦澹恚穑铮熳槲廾飨愿腻义媳洌桑龋簦澹恚穑铮熳榻希桑茸橛兴档停髯榧浔冉嫌邢灾钜煨裕ǎ疲剑福玻常担义希校剑埃澹埃埃埃
本文编号：2699914
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