microRNA-21对人角膜基质细胞炎症反应的调节及机制研究

发布时间：2021-01-01 21:36

　　目的:通过脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）刺激角膜基质细胞诱导其炎症反应,并测定microRNA-21（miR-21）在炎症反应中的表达,并揭示miR-21对角膜基质细胞炎症反应的调节作用及机制。方法:1.应用LPS诱导角膜基质细胞炎症反应,并通过实时定量PCR（realtime PCR,qPCR）的方法检测人角膜基质细胞在炎症反应中炎性细胞因子以及miR-21的表达变化。2.增强或抑制miR-21的表达,并观察人角膜基质细胞炎症反应的变化。2.1)藉由脂质体将hsa-miR-21agomir转染细胞以过表达miR-21,检测过表达miR-21对角膜基质细胞炎症反应的影响。通过qPCR检测miRNA-21 mRNA的表达,通过qPCR、Elisa检测IL-6、IL-8在mRNA及蛋白分水平的表达,并结合CCK8检测及细胞迁移实验检测过表达miR-21对角膜基质细胞增殖及细胞迁移的影响。2.2)转染hsa-miR-21antagomir以抑制miR-21的表达,检测抑制miR-21表达对角膜基质细胞在炎症反应的影响。通过qPCR检测miRNA-21 mRNA的表达,... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

1CCK8检测不同浓度LPS细胞存活率

图 2.1.2 正常对照组及 LPS 组 IL-6、IL-8 mRNA 相对表达量PS 刺激后 qPCR 检测 miRNA-21 的表达 1ug/mlLPS 刺激细胞 48h 后，qPCR 检测 miRNA-21 表达，如正常对照组作为基线, 采用 2-△△CT法计算 LPS 组相对于正-21 的表达量变化,与正常对照组相比，LPS 刺激细胞后 miRNA具有剂量依赖性（F=74.8 P＜0.001）。

3LPS刺激后miRNA-21的表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]MicroRNA: A matter of life or death[J]. Zhiguo Wang, Research Center, Montreal Heart Institute and Department of Medicine, University of Montreal, Montreal, PQ H1T 1C8, Canada.  World Journal of Biological Chemistry. 2010(04)



本文编号：2952034