变应性鼻炎的血清蛋白质组学中细胞骨架重塑分析

发布时间：2017-08-30 22:05

  本文关键词：变应性鼻炎的血清蛋白质组学中细胞骨架重塑分析

  更多相关文章： 变应性鼻炎 组织重塑 三磷酸酶 蛋白质组学 细胞骨架重塑

【摘要】：目的变应性鼻炎是耳鼻咽喉科常见的疾病之一,目前AR的发病机制未完全阐明,其类固醇激素治疗效果并不理想。AR的特异性免疫治疗前景可观,但检测特异性个体全部致敏原比较困难,且疗程较长,并且由于AR组织重塑的存在,使病程迁延不愈,治疗更加困难。本研究的目的筛选了与常年性变应性鼻炎发病及特异性免疫治疗密切相关的调控因子及其调节网络,为进一步深入研究AR组织重塑奠定基础。 方法研究选取了45名确诊为常年性变应性鼻炎患者,22名经特异性免疫治疗有效患者,20名经特异性免疫治疗无效患者及20名健康志愿者作为研究对象。我们对这四组研究对象进行了同位素标记的相对和绝对定量的蛋白组学研究,接着利用二维凝胶电泳及质谱分析确定我们所需的差异蛋白。然后利用利用EXPANDER v5.2软件对这些差异蛋白进行聚类分析。最后将聚类后的差异蛋白汇入Metacore软件,进一步确认可能起重要作用的调节网络及与特异性免疫治疗密切相关的蛋白作用。 结果在确定的210个差异蛋白中,通过Metacore通路软件构建了p值最小的10组调节通路,我们发现除了凝血通路和免疫调节通路在AR中发挥作用外,细胞骨架重塑-RhoGTP酶调节的肌动蛋白通路也与该疾病有关。 结论经相关生物信息学分析,推测RhoGTP酶调节的细胞骨架通路参与AR的组织重塑。根据RhoGTP酶调节细胞骨架的通路图分析,推测RhoA/Rock信号通路参与AR的组织重塑,并且可能是在AR黏膜上皮细胞受损、AR黏膜固有层微血管重塑、细胞外基质沉积这三方面参与AR的组织重塑。
【关键词】：变应性鼻炎 组织重塑 三磷酸酶 蛋白质组学 细胞骨架重塑
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R765.21
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 符号说明10-11
• 前言11-15
• 1 实验材料15-18
• 1.1 研究对象15
• 1.2 试剂15-16
• 1.3 试剂器材16-17
• 1.4 生物信息软件17-18
• 2 实验方法18-20
• 2.1 变应原皮试方法18
• 2.2 AR患者视觉模拟量表评分18
• 2.3 AR患者SIT方案18-19
• 2.4 SIT患者疗效评判19-20
• 3 实验步骤20-24
• 3.1 收集血清样本20
• 3.2 检测血清中螨特异性slgE及IgG420-21
• 3.3 去除高丰度蛋白21
• 3.4 测定总蛋白浓度21
• 3.5 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳21-22
• 3.6 沉淀TCA-丙酮22
• 3.7 变性还原蛋白、封闭半胱氨酸、消化胰酶22
• 3.8 标记iIRAQ22
• 3.9 脱盐22-23
• 3.10 离线2D LC-MS/MS23
• 3.11 搜库23
• 3.12 生物信息学分析23
• 3.13 统计学分析23-24
• 4 结果24-30
• 4.1 各组sIgE的表达水平24
• 4.2 各组IgG4的表达水平24-25
• 4.3 各组症状+药物总评分25
• 4.4 AR血清差异蛋白鉴定结果25-26
• 4.5 Expander聚类分析结果26-27
• 4.6 Gene-Go软件分析结果27-30
• 5 讨论30-35
• 6 结论35-36
• 参考文献36-41
• 综述41-50
• 参考文献45-50
• 致谢50-51
• 攻读学位期间发表的学术论文及科研情况51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 刘建国;刘月辉;;变应性鼻炎鼻黏膜结构变化及微血管重塑实验研究[J];中国耳鼻咽喉头颈外科;2010年01期

2 李源,许庚,刘贤;常年性变应性鼻炎鼻粘膜的透射电镜观察[J];临床耳鼻咽喉科杂志;1993年01期

3 巴罗;杜进涛;刘亚峰;尚婷婷;杨风林;边片;;鼻息肉及变应性鼻炎中IL-17表达与嗜酸粒细胞浸润的意义[J];临床耳鼻咽喉头颈外科杂志;2010年02期

4 杨影;李春林;罗t，

本文编号：761724