人单核细胞THP-1源性泡沫细胞内雷帕霉素含量测定的HPLC法的建立及应用

发布时间：2018-01-17 13:18

  本文关键词：人单核细胞THP-1源性泡沫细胞内雷帕霉素含量测定的HPLC法的建立及应用　出处：《中国药房》2017年01期 　论文类型：期刊论文

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【摘要】：目的:建立人单核细胞THP-1源性泡沫细胞内雷帕霉素(RAPA)含量的测定方法,研究RAPA靶向制剂(RAPA-NP-Apt)对泡沫细胞的靶向作用。方法:以氧化型低密度脂蛋白诱导THP-1细胞建立泡沫细胞模型,取200 ng/m L的RAPA和200、400、800ng/m L的RAPA-NP-Apt与泡沫细胞共同孵育60 min。采用高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内RAPA含量,色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-水(90∶10,V/V),流速为1.0 m L/min,柱温为40℃,检测波长为278 nm,进样量为20μL。结果:RAPA检测质量浓度线性范围为50~6 400 ng/m L(r=0.999 96),平均回收率为98.72%(RSD=0.62%,n=3),日内、日间RSD均不大于6.15%(n=6),稳定性试验的RSD2%(n=6),重复性试验的RSD=1.64%(n=6)。RAPA和低、中、高质量浓度的RAPA-NP-Apt与泡沫细胞共孵育后RAPA的含量分别为12、43、98、140 ng/10~6个细胞。结论:本方法操作简单,稳定性和重复性好,可用于泡沫细胞内RAPA的含量测定。RAPA-NP-Apt可提高RAPA对泡沫细胞的靶向作用。
[Abstract]:Objective: to establish a method for the determination of rapamycin A in human monocyte THP-1 derived foam cells. Objective: to study the targeting effect of RAPA targeting preparation RAPA-NP-Apt on foam cells. Methods: THP-1 cells were induced by oxidized low density lipoprotein (OLDL) to establish foam cell model. The RAPA and 200,400 of 200 ng/m L were selected. #number0# ng / mL RAPA-NP-Apt was incubated with foam cells for 60 min. The content of RAPA was measured by high performance liquid chromatography (HPLC). The chromatographic column was Diamonsil C18, the mobile phase was acetonitrile-water (90: 10V / V), the flow rate was 1.0 mL / min, and the column temperature was 40 鈩，

本文编号：1436401