曲美他嗪对抗大鼠急性低压性缺氧损伤的机制研究

发布时间：2018-02-06 02:14

本文关键词： 曲美他嗪急性低压性缺氧组织水肿 AQP-1 AQP-4　出处：《河北医科大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:急性高原病(AMS)是高原地区的特发病与常见病,是由于高原低氧环境所诱发的多组织器官的病理学改变及功能紊乱。研究表明,药物防治手段可有效减少AMS的发病率和致死率。因此,本课题通过建立大鼠急性低压性缺氧模型,模拟人体急进高原性低氧损伤,观察曲美他嗪(Trimetazidin,TMZ)对急性高原缺氧诱发的心肌组织及脑组织损伤的保护作用,并探讨其作用机制,以期为新型抗高原缺氧药物的研发提供实验依据。方法:1实验动物分组:采用随机数字表法,将72只雌性的SD大鼠随机分作6个实验组(每组12只),分别设立正常对照组(C)、急性低氧模型组(M)及高、中、低剂量TMZ给药组(缺氧前灌胃给药,TMZ浓度分别给予20mg/kg、10mg/kg、5mg/kg)、阳性药物对照组(阳性药设为尼莫地平,缺氧前灌胃给药20mg/kg)。2急性低氧模型的建立:通过调控数字化低压氧舱,模拟海拔7000米高原的大气氧分压,将各组大鼠置于低压氧舱内进行缺氧(正常对照组除外),持续低氧处理12h,建立大鼠急进高原性低氧损伤模型。3组织形态学观察:低压缺氧结束后,制备各组大鼠心肌组织及脑组织的石蜡包埋切片,通过苏木素-伊红(H.E)染色法,观察各实验组大鼠多组织、器官的形态学改变。4脑含水量的测定:低压缺氧结束后,快速取出各组大鼠脑组织,采用干湿重质量差法,测定各实验组大鼠脑含水量的变化,观察TMZ对急性低压缺氧大鼠脑水肿的影响。5血生化指标的检测:低压缺氧结束后,快速抽取各组大鼠全血,低温离心后分离血浆,利用放射免疫法测定大鼠血浆中心钠素(ANP)和内皮素-1(ET-1)的含量,并通过化学比色法测定大鼠血浆中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,观察TMZ对大鼠急性低压缺氧损伤的保护作用。6 RT-PCR技术检测:低压缺氧结束后,快速取出各组大鼠心肌组织与脑组织,置于液氮中保存,利用RT-PCR技术检测各实验组大鼠心肌组织与脑组织中水通道蛋白-1(AQP-1)、水通道蛋白-4(AQP-4)在m RNA水平的表达情况。7 Western blot方法检测:低压缺氧结束后,快速取出各组大鼠心肌组织与脑组织,置于液氮中保存,利用Western Blot方法检测各实验组大鼠心肌组织与脑组织中水通道蛋白-1(AQP-1)、水通道蛋白-4(AQP-4)在蛋白水平的表达情况。结果:1 H.E染色结果:与正常对照组相比,急性低氧模型组大鼠的心肌组织及脑组织均发生明显的缺氧损伤;与模型组中低氧损伤的大鼠相比,各剂量TMZ及阳性药物尼莫地平均可显著减轻急性低压缺氧诱导的大鼠心肌组织及脑组织损伤的形态学改变。2脑含水量检测结果:与正常对照组相比,急性低氧模型组大鼠的脑部含水量明显增加(P0.01);与模型组中低氧损伤的大鼠相比,各剂量TMZ及阳性药物尼莫地平均可显著降低急性低压缺氧诱导的大鼠脑含水量的增加(尼莫地平组P0.05,高剂量TMZ组P0.01,中、低剂量TMZ组P0.05)。3血生化指标检测结果:与正常对照组相比,急性低氧模型组大鼠血浆中ANP及ET-1含量显著增加(P0.01),LDH活性显著升高(P0.01);与模型组中低氧损伤的大鼠相比,各剂量TMZ及阳性药物尼莫地平均可显著减少急性低压缺氧后大鼠血浆中ANP及ET-1的含量(尼莫地平组、各剂量TMZ组P0.01),降低大鼠血浆中LDH活性(尼莫地平组、高剂量TMZ组P0.01,中、低剂量TMZ组P0.05)。4 RT-PCR检测结果:与正常对照组相比,急性低氧模型组大鼠的心肌及脑组织中AQP-1、AQP-4在m RNA水平的表达均显著升高(P0.01);与模型组中低氧损伤的大鼠相比,各剂量TMZ及阳性药物尼莫地平均可显著降低急性低压缺氧后大鼠心肌及脑组织中AQP-1、AQP-4在m RNA水平的表达(其中心肌AQP-1/4 m RNA:尼莫地平组、各剂量TMZ组,P0.01;脑组织AQP-1 m RNA:尼莫地平组、高、中剂量TMZ组,P0.01;脑组织AQP-4 m RNA:尼莫地平组、各剂量TMZ组,P0.01)。5 Western blot检测结果:与正常对照组相比,急性低氧模型组大鼠的心肌及脑组织中AQP-1、AQP-4在蛋白水平的表达均显著升高(P0.01);与模型组中低氧损伤的大鼠相比,各剂量TMZ及阳性药物尼莫地平均可显著降低急性低压缺氧后大鼠心肌及脑组织中AQP-1、AQP-4在蛋白水平的表达(尼莫地平组、各剂量TMZ组,P0.01)。结论:曲美他嗪对急性低压性缺氧(急进高原性低氧)诱发的大鼠心肌组织及脑组织损伤均具有显著的保护作用,其机制可能与提高血管内皮细胞活性,改善心功能,降低水通道蛋白-1(AQP-1)及水通道蛋白-4(AQP-4)的表达,从而减轻组织细胞水肿有关。
[Abstract]:Objective : To study the protective effects of TMZ on brain edema induced by hypoxia in rats with acute hypoxia induced by hypoxia ( except normal control group ) . The expression of AQP - 1 ( AQP - 1 ) and AQP - 4 ( AQP - 4 ) in plasma of rats with acute hypoxia was significantly decreased compared with those in the normal control group ( P0.01 ) . The AQP - 1 and AQP - 4 levels of AQP - 1 and AQP - 4 in brain tissue were significantly higher than those in normal control group ( P0.01 ) . Conclusion : Trimeidine has a significant protective effect on myocardial tissue and brain tissue injury induced by acute low - pressure hypoxia ( acute hypoxia ) . Its mechanism may be related to improving the activity of vascular endothelial cells , improving cardiac function , decreasing the expression of AQP - 1 and AQP - 4 , and alleviating the edema of tissue cells .

【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R965

【参考文献】