几种手性药物的高效液相色谱法拆分及大鼠体内药动学研究

发布时间：2018-05-18 22:18

  本文选题：高效液相色谱 + Chiralpak　； 参考：《郑州大学》2014年硕士论文

【摘要】：手性药物对映体的药理活性和毒副作用可能不同，目前新药研究的一个发展趋势是研制和生产具有光学纯度的药物。因此建立快速、准确、高效的手性药物拆分方法，对于研究对映体的体内药动学过程、药理和毒理作用机制以及质量控制都具有十分重要的意义。 本文应用正相高效液相色谱法分离了手性药物吡格列酮及二硫代氨基甲酸酯、丁烯内酯、新型吲哚等三大类手性化合物对映体，探讨了拆分机理；测定了二硫代氨基甲酸酯类化合物的体外抗肿瘤和抑菌活性，并考察了其对映体的活性差异；建立了吡格列酮对映体的含量测定方法，首次对吡格列酮两对映体在雌雄两组大鼠体内的立体选择性药物动力学过程进行了研究和比较，本课题主要研究内容包括以下几方面。 一、手性药物吡格列酮的拆分及其对映体的含量测定 采用正相高效液相色谱法，纤维素类键合型ChiralPak IC柱，对吡格列酮对映体进行了拆分研究，系统考察了流动相组成、碱性添加剂、柱温及流速对其拆分的影响。在优化的色谱条件下，吡格列酮对映体获得了较好的分离，对吡格列酮对映体的手性分离进行了方法学考察，两对映体的浓度在0.50~100μg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系（r2=0.9999），最低检测限和定量限分别为0.15和0.50μg/mL，方法的日内、日间精密度（RSD）均小于6.70%，平均加样回收率在97.3~110.8%之间，该方法可用于吡格列酮对映体的含量测定；此外，对拆分机理进行了初步探讨。 二、大鼠血浆中吡格列酮对映体的药动学研究 建立了测定大鼠血浆中吡格列酮对映体的手性色谱方法。研究了大鼠单剂量灌胃给药后两对映体在体内的药代动力学过程。结果表明，，在雌雄两组大鼠血浆中后出峰的构型2的浓度始终高于先出峰的构型1的，且构型2的Cmax、AUC0-24、AUC0-∞值均分别约是构型1的两倍。两对映体的CL/F、Cmax、AUC0-24和AUC0-∞均具有显著性差异（P0.05），表明吡格列酮在大鼠体内的药代动力学具有立体选择性；两对映体在雌鼠体内的Cmax分别是雄鼠的1.7倍和2.2倍，AUC0-24值分别是雄鼠的1.8和2.3倍，表明吡格列酮两对映体在大鼠体内的药代动力学具有性别差异。 三、二硫代氨基甲酸酯类化合物的拆分及活性研究 采用正相高效液相色谱法，纤维素类键合型Chiralpak IC柱，对二硫代氨基甲酸酯类化合物进行了拆分研究，系统考察了流动相组成、流速和温度对分离的影响。三种化合物均获得了较好的分离。采用MTT法测定了三种化合物及化合物A两对映的体外抗肿瘤和抑菌活性。左旋体对肿瘤细胞MCF-7和MGC-803的细胞毒作用约是右旋体的2倍，右旋体对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、嗜麦假单胞菌的抑制作用约为左旋体的2倍，表明两对映体的细胞毒和抑菌作用存在立体选择性。 四、丁烯内酯和新型吲哚类手性化合物的拆分 采用正相高效液相色谱法，纤维素类键合型Chiralpak IC柱，对丁烯内酯和新型吲哚两类化合物进行了拆分研究。系统考察了流动相组成、流速和温度对分离的影响，并探讨了拆分机理。六种丁烯内酯类化合物均得到较好分离，六种新型吲哚类化合物中三种达基线分离，说明此固定相对新型吲哚类化合物的手性选择性较低。
[Abstract]:The pharmacological activity and toxic side effects of chiral drug enantiomers may be different . The development trend of new drug research is to develop and produce drugs with optical purity . Therefore , it is very important to establish a rapid , accurate and efficient method of chiral drug separation , which is of great significance to study the pharmacokinetics , pharmacological and toxicological mechanism and quality control of enantiomers .

In this paper , chiral drug pioglitazone and thiocarbamate , butenolide , new indole and other three chiral compound enantiomers were isolated by means of high performance liquid chromatography ( HPLC ) , and the mechanism of separation was discussed .
In vitro anti - tumor and antibacterial activity of dithiocarbamates were determined , and the activity of enantiomers was investigated .
In this paper , the content determination method of pioglitazone enantiomers was established . The stereoselective pharmacokinetics of pioglitazone enantiomers in male and female rats were studied and compared . The main contents of this study were as follows .

1 . Resolution of chiral drug pioglitazone and determination of its enantiomers

The chiral separation of pioglitazone enantiomers was studied by means of positive - phase high performance liquid chromatography and cellulose - bonded ChiralPak IC column .
In addition , the splitting mechanism is discussed .

Pharmacokinetics of pioglitazone enantiomers in rat plasma

A chiral chromatographic method for the determination of pioglitazone enantiomers in plasma of rats was established . The pharmacokinetic parameters of the two enantiomers in rat plasma were studied . The results showed that the concentration of the two enantiomers in the plasma of male and female rats was always higher than that of the first - out peak , and the Cmax , AUC0 - 24 and AUC0 - 鈭

本文编号：1907444