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β2糖蛋白Ⅰ免疫小鼠对辅助性T细胞亚群分化的影响

发布时间:2018-08-15 16:33
【摘要】:目的探讨β2糖蛋白I(β2GPI)免疫小鼠引起的辅助性T(Th)细胞分化和抗β2GPI抗体产生的机制。方法将健康的BALB/c小鼠随机分为生理盐水组和β2GPI免疫组,每隔2周由尾静脉注射β2GPI或等量生理盐水,共注射2次或4次。采用间接ELISA检测小鼠血清中抗β2GPI抗体的效价;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测小鼠脾脏细胞GATA结合蛋白3(GATA3)、白细胞介素4(IL-4)、表达于T细胞的T盒(T-bet)、γ干扰素(IFN-γ)、Foxp3的mRNA水平;流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞中GATA3阳性细胞和Foxp3阳性细胞的比例。结果 2次免疫后,小鼠血清中出现高效价(1∶100 000)的抗β2GPI抗体,脾脏中Th2特异性指标GATA3、IL-4的mRNA水平和GATA3阳性细胞比例相对生理盐水组升高。4次免疫后,小鼠血清中抗β2GPI抗体效价进一步升高(1∶100 000),脾脏GATA3、Th1细胞特异性标志物(T-bet、IFN-γ)和调节性T细胞特异性标志Foxp3的mRNA水平下调,IL-4的mRNA水平和2次免疫后无明显差异。此外,脾脏细胞中GATA3阳性细胞的比例进一步上调且伴有Foxp3阳性细胞比例的下调。结论β2GPI免疫小鼠引起Th细胞向Th2细胞优势分化,并伴有Th1细胞和调节性T细胞的抑制,有利于抗β2GPI抗体的产生。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of 尾 2 glycoprotein I (尾 2GPI) immunized T (Th) cells differentiation and anti 尾 2GPI antibody production in mice. Methods healthy BALB/c mice were randomly divided into normal saline group and 尾 2GPI immunized group. 尾 2GPI or the same amount of normal saline were injected into caudal vein every 2 weeks for 2 or 4 times. The titer of anti 尾 2GPI antibody in mouse serum was detected by indirect ELISA, and the levels of GATA binding protein 3 (GATA3), interleukin 4 (IL-4), T box (T-bet) and interferon 纬 (IFN- 纬) Foxp3 were detected by real-time quantitative PCR (qRT-PCR). The proportion of GATA3 positive cells and Foxp3 positive cells in spleen lymphocytes of mice was detected by flow cytometry. Results after two doses of immunization, a high titer (1: 100,000) anti-beta 2GPI antibody was found in the serum of mice. The level of mRNA and the proportion of GATA3 positive cells in the spleen of the mice were increased by 4 times compared with the normal saline group, the specific index of Th2 in the spleen was GATA3 + IL-4. The titer of anti 尾 2GPI antibody in serum of mice was further increased (1: 100 000). There was no significant difference between the two immunizations. The specific markers of spleen GATA3 and Th1 cells (T-bett1 IFN- 纬) and the mRNA level of regulatory T cell specific marker Foxp3 down-regulated the mRNA level of IL-4. In addition, the proportion of GATA3 positive cells in spleen cells was further up-regulated and down-regulated with Foxp3 positive cells. Conclusion 尾 2GPI immunized mice induce the dominant differentiation of Th cells into Th2 cells, accompanied by the inhibition of Th1 cells and regulatory T cells, which is beneficial to the production of anti 尾 2GPI antibodies.
【作者单位】: 江苏大学医学院;
【基金】:国家自然科学基金(81370614)
【分类号】:R965

【参考文献】

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本文编号:2184779

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