双黄连注射液与阿奇霉素注射液配伍后的药代动力学研究

发布时间：2019-07-16 12:43

【摘要】：感染性疾病具有发病急、传变快等特点,临床常使用注射剂治疗此类疾病,以达到快速起效的目的。化学药品中的阿奇霉素注射液与中药双黄连注射液是治疗感染性疾病的一线药物,临床常配伍使用。二者合用进入机体,各自所含成分的体内代谢是否互相影响,迄今尚未看到文献报道。论文探讨了在血浆样品处理过程中对连翘酯苷含量测定造成影响的主要因素,建立了连翘酯苷的血浆样品处理方法,并在此研究基础上,采用药动学的研究方法,对二者配伍后的体内代谢过程进行初步研究,观察了中药连翘提取物或双黄连注射液与阿奇霉素注射液配伍使用后,主要抗菌有效成分连翘酯苷、阿奇霉素在大鼠体内的药动学过程,考察配伍用药对各自药代动力学参数的影响规律,为二者的临床合理配伍应用奠定基础,为中西药临床配伍的基础研究提供参考。全文共分以下四个部分。第一部分不同处理方法对血浆样品中连翘酯苷测定的影响实验建立了连翘酯苷测定的液相色谱法,以连翘酯苷含量为指标,对血浆样品处理过程中存放、离心、吹干、复溶及进样各步骤中温度和时间对血浆样品中连翘酯苷测定的影响进行了研究,实验数据采用SPSS17.0进行数理学统计分析,寻找出在样品处理过程中对连翘酯苷的测定影响明显的因素,并建立一种新的血浆样品处理方法,使之满足药动学实验要求。血浆样品中连翘酯苷测定的条件考察分为以下六个部分。(1)血浆样品置于25℃室温条件下与0℃冰水浴中分别放置0,0.5,1,2,4小时；(2)加入内标和乙酸乙酯涡旋后的血浆样品置于25℃室温与-20℃冷冻条件下分别放置0,1,2,4小时；(3)涡旋后的血浆样品分别于25℃室温与4℃低温条件下离心；(4)涡旋、离心后的血浆样品上清液分别于25℃与37℃水浴并于氮气流下吹干；(5)吹干后的血浆样品残渣分别于0,1,24小时后以流动相复溶；(6)复溶、离心后的血浆样品上清液置于高效液相色谱仪4℃样品池中分别放置0,24,60小时后进样。此实验分别在高、中、低三个浓度的质控样品条件下同时进行,每一浓度至少制备并测定6个样品,每个样品分析测定1次。使用SPSS17.0软件对数据进行比较分析,若P0.05,则表示此处理方法对血浆样品中连翘酯苷的测定具有显著影响。结果看到,温度和储存时间为影响连翘酯苷测定的两个关键因素。含药血浆样品一旦取出,应立即放入冰水浴中,并于4小时内尽快处理。含药血浆样品与内标溶液和乙酸乙酯萃取液混合涡旋后应放置于25℃室温条件下不超过2小时,或放置于-20℃冷冻条件下不超过4小时,并于4℃低温条件下或于25℃室温条件下离心。另外,离,心后的血浆样品上清液应于25℃室温条件下水浴并于氮气流下吹干,吹干后的血浆样品残渣应于24小时内复溶,并置于高效液相色谱仪4℃样品池中不超过60小时进样分析检测,保证连翘酯苷在血浆样品处理及药动学实验过程中的测定。第二部分连翘提取物单用与配伍阿奇霉素注射液后连翘酯苷药代动力学研究以sD大鼠为实验对象,腹腔注射、尾静脉注射给药给予连翘提取物、连翘提取物配伍乳糖酸阿奇霉素注射液。分别于给药后不同时间点自眼底静脉取血,采用第一部分研究中建立的方法处理离心后所得血浆样品,建立连翘提取物中连翘酯苷测定的液相色谱法,测定各时间点血浆样品中连翘酯苷的浓度,Kinetica4.4分析软件计算药动学参数,并用SPSS17.0软件比较数据间差异。结果显示,腹腔注射后,与连翘提取物单独给药组相比,配伍组连翘酯苷的最大血药浓度(Cmax)明显增加(P0.05),达峰时间(Tmax)延后(P0.05),药-时曲线下面积(AUC)显著增加(P0.05),平均滞留时间(MRT)缩短(P0.05),半衰期(T1/2)无显著性差异(P0.05)。尾静脉注射后,与连翘提取物单独给药组相比,配伍组连翘酯苷的T1/2明显延长(P0.05),AUC显著增加(P0.05),血浆清除率(CL)明显降低(P0.05), Cmax、MRT以及表观分布容积(Vd)无显著性差异(P0.05)。第三部分双黄连注射液单用与配伍阿奇霉素注射液后连翘酯苷药代动力学研究以SD大鼠为实验对象,尾静脉注射给药给予双黄连注射液、双黄连注射液配伍乳糖酸阿奇霉素注射液。分别于给药后不同时间点自眼底静脉取血,采用第一部分研究中建立的方法处理离心后所得血浆样品,建立双黄连注射液中连翘酯苷测定的液相色谱法,测定各时间点血浆样品中连翘酯苷的浓度,Kinetica4.4分析软件计算药动学参数,并用SPSS17.0软件比较数据间差异。结果表明,与双黄连注射液单独给药组相比,配伍组连翘酯苷的T1/2明显延长(P0.05),AUC显著增加(P0.05),“明显降低(P0.05), Cmax、MRT、Vd无显著性差异(P0.05)。第四部分阿奇霉素注射液单用与配伍连翘提取物、双黄连注射液后阿奇霉素药代动力学研究以SD大鼠为实验对象,尾静脉注射给药给予乳糖酸阿奇霉素注射液、乳糖酸阿奇霉素注射液配伍连翘提取物、乳糖酸阿奇霉素注射液配伍双黄连注射液。分别于给药后不同时间点自眼底静脉取血,采用乙腈沉淀蛋白法处理离心后所得血浆样品,建立LC-MS/MS法测定各时间点血浆样品中阿奇霉素的浓度,Kinetica4.4分析软件计算药动学参数,并用SPSS17.0软件比较数据间差异。结果发现,与阿奇霉素注射液单独给药组相比,配伍连翘提取物、双黄连注射液尾静脉注射后,阿奇霉素T1/2：明显延长(P0.05),AUC增加极显著(P0.01),Vd增加极显著(P0.01)。配伍连翘提取物后,阿奇霉素CL降低极显著(P0.01)：配伍双黄连注射液后,阿奇霉素Cl显著降低(P0.05)。Cmax、MRT无显著性差异(P0.05)。结论论文首次探讨了血浆样品处理过程中相关因素对连翘酯苷测定的影响,确认了温度、时间是影响其含量变化的主要因素,并建立了连翘酯苷的血浆样品处理方法。依据此方法,对于含有中药连翘或连翘酯苷作为主要有效成分的血浆样品进行处理,可以保证其在大鼠体内药代动力学研究的实验数据、结果、药动学参数具有稳定性和可控性。同时,此方法也为今后进一步研究连翘酯苷在其他生物介质中的处理方法提供参考,为更完善连翘酯苷的药代动力学研究提供理论基础与实验依据。论文又分别建立了连翘提取物、双黄连注射液中连翘酯苷含量测定的高效液相色谱法,建立了乳糖酸阿奇霉素注射液中阿奇霉素含量测定的液质联用方法,可用于连翘提取物、双黄连注射液、阿奇霉素注射液的药代动力学研究中。论文采用这些方法,对连翘提取物、双黄连注射液分别配伍阿奇霉素注射液后连翘酯苷体内药动学过程差异进行研究,结果表明,阿奇霉素对连翘、含有连翘的双黄连注射液中连翘酯苷的体内药动学过程具有显著影响,且影响趋势相一致。据此推测,阿奇霉素可增加连翘、双黄连注射液中连翘酯苷的药效。同时,论文对乳糖酸阿奇霉素注射液分别配伍连翘提取物、双黄连注射液后阿奇霉素在体内药动学过程差异进行研究,结果显示,连翘、含有连翘的双黄连注射液对阿奇霉素的体内药动学过程具有显著影响,且影响趋势相一致,根据结果推测,连翘、双黄连注射液均可增加阿奇霉素注射液的药效,中西药间具有协同增效的作用。可见,临床使用阿奇霉素与连翘、含有连翘的双黄连注射液配伍应用时,应注意药物间的相互作用,适当减少药物用量,为临床减少抗生素类药物阿奇霉素的不良反应提供参考。综上,论文建立了连翘酯苷的血浆样品处理方法、连翘提取物、双黄连注射液中连翘酯苷含量测定的高效液相色谱法等,研究了阿奇霉素注射液与连翘提取物、双黄连注射液配伍应用后阿奇霉素、连翘酯苷药代动力学方面的相互影响,为临床合理配伍用药提供实验依据,也为今后中西药配伍的药代学研究模式提供参考。此外,根据本课题的实验结果对连翘酯苷的药性进行了初步探讨,根据药动学相互影响趋势,初步推测连翘酯苷药性寒凉。
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R969.1

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