小牛脾提取物注射液抗疲劳和提升造血功能活性的研究

发布时间：2020-05-10 17:00

【摘要】：癌症即恶性肿瘤,涉及到100多种疾病,全世界每分钟有5人会死于癌症,并且癌症患者通常会有疲劳的发生。目前治疗癌症的主要方式仍是放疗和化疗,但是放化疗会产生明显的副作用,尤其是对血细胞和造血组织的破坏性对其有效性和广泛应用具有严重的限制。因此寻找对造血功能具有保护作用的治疗剂、有益于患者放化疗后的愈后的药物意义重大。小牛脾提取物注射液(Calf spleen extractive injection,CSEI)是从出生24 h之内的健康小牛脾脏中提取制备而成的小分子多肽富集物,CSEI的药理作用基础为激活机体非特异性免疫,刺激骨髓干细胞的增殖和提升造血功能。研究表明,CSEI在临床上大约有40%被用于改善癌症的治疗,它能够减轻放化疗引起的患者骨髓抑制现象,增强患者体力,提升患者的生活质量。本论文采用多种生物学方法对CSEI的抗疲劳活性及其促进造血功能进行研究,并系统的阐述CSEI保护造血功能的作用机制。研究内容如下:1.CSEI抗疲劳活性及其初步机制研究采用健康Balb/c小鼠,进行小鼠运动耐力试验,检测运动后小鼠血浆中疲劳和氧化应激相关生化指标以及激素水平。结果发现:腹腔给药21天后,CSEI能够显著提高小鼠的跑步和负重游泳时间,提高小鼠的疲劳转棒时间;CSEI能够同时降低血浆、肝脏和肌肉中的LD含量,降低肝脏和肌肉中的LDH含量,提高肝糖原和肌糖原含量;另外,CSEI能够提高小鼠血浆、肝脏、肌肉中的SOD和GSH-Px的水平,降低肝脏和肌肉中的ROS水平,调节血浆中激素睾酮、雌二醇和皮质醇的水平。因此得出结论CSEI具有抗疲劳活性,可能是通过抗氧化和调节体内激素水平实现的。2.CSEI体外促进造血功能研究为了初步研究CSEI的提升造血功能,选取K562和CHRF两种造血模型细胞,分别对细胞活力、细胞凋亡、细胞分化以及与造血功能相关蛋白的表达进行研究,结果表明CSEI能够促进K562和CHRF细胞的增殖,但是不会诱导这两种细胞的凋亡;CSEI能够诱导K562向红细胞的分化;CSEI能够促进两种造血模型细胞中与造血细胞增殖及功能相关蛋白P-RSK1p90、ELK1、c-Myc蛋白的表达水平;同时,CSEI促进了两种细胞中分化和成熟相关转录因子GATA-1和GATA-2蛋白的表达水平,说明CSEI促进造血细胞功能的作用可能是通过转录因子调控基因的表达实现的。3.CSEI对造血功能低下小鼠的保护作用及机制研究为了进一步探究CSEI对造血功能的提升作用,采用环磷酰胺(CTX)建立造血功能低下小鼠模型,在体内研究CSEI对造血功能的提升作用及其可能的作用机制,再在原代培养的骨髓单核细胞(BMNCs)中对其可能的机制进行进一步的验证,结果表明:在造血功能低下小鼠中,CSEI作用3周后,能够提升小鼠体重和胸腺指数,抑制小鼠脾脏的肿大;CSEI能够显著提高小鼠骨髓中造血干/祖细胞(HSC/HPCs)数量,提高B淋巴细胞和中性粒细胞比例,提升小鼠骨髓细胞密度,调节外周血细胞表达;抗体芯片结合ELISA实验结果显示CSEI能够调节脾脏和血浆中细胞因子的表达,尤其是G-CSF及其相关因子;另外,CSEI能够激活小鼠脾脏中及原代培养的BMNCs中G-CSF及其下游STAT3的磷酸化。得出结论:CSEI通过G-CSF介导的JAK2/STAT3信号通路改善小鼠的造血功能。综上所述,CSEI具有抗疲劳作用,并且是一种安全有效的提升造血功能药物,它能够通过G-CSF介导的JAK2/STAT3信号通路实现对造血功能的促进作用。本研究为CSEI抗疲劳及在临床上作为癌症放化疗的辅助用药以及其他造血功能不足等症状提供药理学基础。
【图文】：

小鼠,抗疲劳

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小鼠,抗疲劳,提高作用,空白

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【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R965

【参考文献】