替莫唑胺通过血脑屏障能力的影响因素研究

发布时间：2020-06-10 14:26

【摘要】：目的:探究替莫唑胺(TMZ,temozolomide)通过血脑屏障的能力的影响因素,并改良大鼠脑脊液的传统采集方法。方法:制备SD大鼠失血模型,将SD大鼠麻醉后固定并暴露左下肢腹股沟区域,随后分层解剖分离暴露左股动脉,充分暴露后插入导管,模型制备准备完成。待大鼠清醒,抓取固定并在股动脉导管处抽吸放血(速度约0.5 ml/min),并且每分钟观察一次大鼠的呼吸频率及心率,达到预先设定的失血量要求后即SD大鼠失血模型制备完成。对大鼠失血模型采用灌胃法给药(TMZ 100mg/kg),并按预先设定的时间分组(10min组、30min组、1h组、1.5h组、2h组、4h组)提前准备脑脊液穿刺抽取操作。在空白组的脑脊液采集步骤中,分别使用改良法与传统法,并收集记录两法在采集CSF时的相关数据(操作时间、穿刺情况、脑脊液获取情况等)进行比对;余设定分组的CSF采集方法均采用改良法。将采集到的CSF样本以HPLC进行TMZ浓度检测,比较不同失血量组在不同时间点采集到的样本中的药物浓度及空白组中采用改良法与传统法所采集得到的样本中的药物浓度差异。采用c~2检验进行计数资料的统计学分析;采用t检验进行计量资料的统计学分析。结果:(1)使用改良法与传统法采集大鼠CSF的实验中,两法的穿刺成功率均为93.3%、穿刺失败率均为6.7%;在成功抽取到的CSF进行血液污染的验证中,传统法所抽取的脑脊液样本中有4例被血液污染,血液污染率为26.7%;而改良法所抽取的样本均未见血液污染。两法的成功获取率差异有统计学意义(P0.01)。(2)改良法的平均总共用时12min明显少于传统法的平均总共用时21.5min,其差异有统计学意义(P0.01);两法所获取的CSF最大量均为90μl,改良法所获取的CSF最小量为20μl,传统法所获取的最小量为30μl;两法CSF平均获取量均为40μl;两法在CSF采集量上的差异无统计学意义(P0.05);两法所获取到的样本中TMZ药物浓度差异无统计学意义(P0.05);(3)失血组中的1ml组(n=30)、2ml组(n=30)与空白对照组(n=30)的大鼠CSF中的TMZ浓度差异无统计学意义(P0.05);3ml组(n=30)、5ml组(n=30)的TMZ浓度低于空白对照组(n=30),且浓度差异有统计学意义(P0.01);10ml组中10min时间组(n=5)的TMZ浓度明显低于空白对照组(n=30),且浓度差异有统计学意义(P0.01);(4)不同性别组的SD大鼠CSF中的TMZ浓度无明显统计学差异(P0.05)。结论:(1)TMZ有着良好的BBB通过能力,其在CSF中的药物浓度具有时间依赖性;(2)失血能降低BBB对TMZ的通过能力,从而影响TMZ进入CSF中的药物浓度;(3)血管活性物质具有开放BBB的作用,其作用的主要机制之一是影响脑血流;(4)改良法是一种不受血液污染影响的、简便高效的大鼠CSF获取方法,且该法对药物通过BBB进入CSF的药物浓度没有影响;(5)不同性别对TMZ进入大鼠CSF中的药物浓度没有影响。
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R965

【参考文献】