地西泮对曲马多在小鼠体内药效学与药动学的影响

发布时间：2020-06-16 12:19

【摘要】：目的:研究地西泮(Diazepam,DI)对曲马多(Tramadol,TR)在小鼠体内药效学与药动学的影响,为临床安全用药提供参考。方法:1.药效学实验(1)采用醋酸扭体法观察曲马多与地西泮单独用药和联合用药对小鼠的镇痛作用。取雌性ICR小鼠,18-22 g,8周龄,实验前12h禁食并自由饮水,随机分为6组,分别为生理盐水组(NS,n=10)、TR高、低剂量组(TR-H,TR-L;25 mg/kg,12.5 mg/kg;n=10,10)、DI组(0.5 mg/kg,n=10)、TR-H+DI组(25 mg/kg+0.5mg/kg,n=10)、TR-L+DI组(12.5 mg/kg+0.5 mg/kg,n=10)。在给药后1 h,小鼠腹腔注射0.6%冰醋酸溶液,给药容量0.1 mL/10g,并且记录注射冰醋酸溶液后15min内的小鼠扭体次数(扭体动作标准是腹部收缩,伸展身体和后肢)。(2)采用热板法观察曲马多与地西泮单独用药和联合用药对小鼠的镇痛作用。雌性ICR小鼠,18-22 g,8-10周龄,给药前筛选合格小鼠。将热板预热至55±0.5℃后,将小鼠放在热板表面,以小鼠放在热板表面到当小鼠舔后足或跳下热板以避免热痛的时间(s)作为小鼠的痛反应潜伏期。通过重复检测,选择潜伏期为10-30s的小鼠进行正式实验。筛选合格小鼠40只,随机分为4组,分别给予生理盐水组(NS,n=10)、TR(25 mg/kg,n=10)、DI组(0.5 mg/kg,n=10)、TR+DI组(25mg/kg+0.5 mg/kg,n=10)。腹腔注射给药容量0.1 mL/10g。给药前检测小鼠正常痛反应潜伏期,然后测定小鼠给药后10、15、30、60 min的潜伏期。如潜伏期超过60 s,则停止实验以60 s记录,防止产生热损伤。2.药动学实验(3)透析样本采集:ICR小鼠12只,20-24 g,8-10周龄,随机分成2组,每组6只,分为单独用药组(25 mg/kg TR,i.p.)和联合用药组(25 mg/kg TR+0.5 mg/kg DI,i.p.)。联合用药组给予DI(i.p.)5 min后给予TR(i.p.),单独用药组给予同体积的生理盐水(i.p.)5 min后给予TR(i.p.)。小鼠麻醉(乌拉坦,1.8 g/kg,i.p.)后,将头部固定在脑立体定位仪上,将微透析探针植入小鼠大脑额叶皮层。以2μL/min流速向探针恒速灌流生理盐水,平衡1 h后,给药,然后以10 min为间隔时间持续收集透析液(约20μL),连续收集5 h。(4)血浆样本的采集:健康ICR小鼠,20-24 g,8-10周龄随机分成2组,每组48只,分为单独用药组(25 mg/kg TR,i.p.)和联合用药组(25 mg/kg TR+0.5 mg/kg DI,i.p.)。联合用药组给予DI(i.p.)5 min后给予TR(i.p.),单独用药组给予同体积的生理盐水(i.p.)5 min后给予TR(i.p.)。小鼠麻醉(乌拉坦,1.8 g/kg,i.p.)1 h后。分别在给药前与给药后0.033、0.08、0.17、0.33、0.5、1、2、4 h摘除小鼠眼球取血500μl。建立HPLC-FLD法测定透析液样本和血浆样本中的曲马多浓度。DAS3.1.5软件用以计算药物浓度-时间曲线和药动学参数,SPSS13.0统计学软件用于对两组小鼠药动学参数进行统计学分析。结果:1.药效学实验(1)醋酸扭体法实验:腹腔注射曲马多(25 mg/kg/12.5 mg/kg)对实验小鼠产生了明显镇痛作用,与对照组(NS)相比,小鼠扭体的次数明显减少。腹腔注射地西泮(0.5 mg/kg)后小鼠扭体次数虽然有所减少,但无显著性差异。与TR-H组(25 mg/kg)相比,TR-H+DI组(25 mg/kg+0.5 mg/kg)可明显减少扭体反应次数(P0.01)。TR-L+DI组(12.5 mg/kg+0.5 mg/kg)与TR-H组(25 mg/kg)的扭体次数无显著性差异(P0.05)。(2)热板法实验:腹腔注射地西泮(0.5 mg/kg)没有产生镇痛作用(P0.05)。TR+DI组(25 mg/kg+0.5 mg/kg)在给药后10、15、30和60 min的痛反应潜伏期比TR组(25 mg/kg)长。与对照组(NS)相比,TR组(25 mg/kg)在给药后60min时的痛反应潜伏期无显著性差异(P0.05),而TR+DI组(25 mg/kg+0.5mg/kg)有显著性差异(P0.05)。2.药动学实验(3)联合用药组(TR+DI)和单独用药组(TR)在小鼠大脑细胞外液额叶皮层主要药动学参数:C_(max)分别为(940.22±92.63)μg/L、(726.72±185.50)μg/L,T_(max)分别为(0.25±0.00)h、(0.42±0.00)h,t_(1/2)分别为(1.07±0.60)h、(1.39±0.56)h,AUC_((0-∞))分别为(1199.04±266.99)μg/L*h、(1026.76±135.22)μg/L*h。结果表明:与单独用药组相比,联合用药组曲马多在小鼠大脑额叶皮层细胞外液中的C_(max)高于单独用药组(P0.05),而T_(max)短于单独用药组(P0.05),其他药动学参数无显著性差异(P0.05)。(4)联合用药组(TR+DI)和单独用药组(TR)在小鼠血浆中主要药动学参数:C_(max)分别为(6415.94±942.56)μg/L、(6328.78±824.12)μg/L,T_(max)分别为(0.17±0.00)h、(0.17±0.00)h,t_(1/2)分别为(0.73±0.14)h、(0.88±0.10)h,AUC_((0-)∞)分别为(5987.84±593.41)μg/L*h、(6820.00±1558.26)μg/L*h。结果表明:联合用药组和单独用药组曲马多在小鼠血浆中的药动学参数均无显著性差异(P0.05)。结论:(1)曲马多和地西泮合用时具有镇痛协同作用,不仅可以增强镇痛效果,还可以延长镇痛作用时间;(2)曲马多和地西泮联合用药后,地西泮可改变曲马多在小鼠脑内的药动学过程;(3)曲马多和地西泮在小鼠体内合用时的镇痛协同性可能与曲马多在靶器官中的游离药物浓度的升高有关;
【学位授予单位】：皖南医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R965
【图文】：

曲马多,地西泮,联合应用,镇痛作用

马多和地西泮单独或联合应用对醋酸致小鼠扭体实验的镇ciceptive effects of tramadol and diazepam alone or in cd writhing test in mice. Data were presented as mean ±SD (indicates significant difference compared with NS;##P <ed with TR-H.验实验观察曲马多单独给药和与地西泮联合给药对的影响。结果如图 7 所示，曲马多单独用药组（215min，30min，60min 的痛反应潜伏期分别为 28.6，21.74 ±3.01；曲马多联合地西泮组(25 mg/kg TR应潜伏期分别为 30.45 ±7.29，43.17 ±9.49，32.2马多单用组，曲马多联合地西泮组在给药后第 10mi

热板法

图 7 比较单独和联合给药对热板法痛反应潜伏期的影响omparison of the antinociceptive effects of the single and thon on the hot plate. The mice were given i.p. the single drugs and teptive effects was evaluated at 0, 10, 15, 30 and 60 min after adminis as mean ± SD (n = 10).*P<0.05 means a significant difference be the NS group.#P<0.05 indicates a significant difference between the c group.

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