汴梁紫禹醇提物缓解对乙酰氨基酚诱导的肝毒性机制研究

发布时间：2020-06-24 15:31

【摘要】：目的:探究“汴梁紫禹”醇提物(BZE)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的药物性肝损伤的抗氧化和抗凋亡作用,并探讨其可能的分子机制。方法:在体内,连续10天灌胃给予SD大鼠不同浓度的BZE,然后灌胃给予APAP诱导药物性肝损伤模型。试剂盒检测大鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性,谷胱甘肽(GSH),丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的表达量,肝组织中活性氧(ROS)活性,计算大鼠的脏器指数,HE染色观察大鼠的肝脏组织病理学变化。在体外,BZE预处理HL-7702细胞24h,然后用30mmol/L对APAP损伤12h。MTT法测定细胞存活率,试剂盒测定细胞中ALT,AST,ROS,SOD,GSH。接着,我们研究了BZE对APAP诱导的HL-7702细胞氧化应激和凋亡的关系。首先利用流式细胞仪检测了BZE对线粒体膜电位的影响,然后采用Western blotting测定线粒体凋亡相关蛋白,如Bax,Bcl-2及Caspase-3的表达和氧化应激信号通路Nrf2,HO-1蛋白的表达。最后采用siRNA技术下调Nrf2,分析HO-1,Bax,Bcl-2及Caspase-3蛋白的表达。结果:BZE在体外和体内均有抑制肝脏氧化应激预防APAP诱导的肝毒性的作用。在体内,HE染色明显观察到BZE对组织细胞形态有改善作用。BZE抑制了肝损伤标志物ALT、AST的释放,降低APAP诱导的氧化应激产生的ROS同时升高抗氧化酶SOD的活力和GSH的含量。在体外,BZE可显著提高细胞存活率,改善APAP损伤的细胞形态,抑制ALT、AST,ROS的释放,升高SOD的活力和GSH的含量。流式细胞仪检测结果显示,BZE显著抑制了APAP损伤所致的膜电位的降低。蛋白表达量结果显示,BZE促进了Bcl-2表达,降低了Bax和Caspase-3的表达。BZE可促进Nrf2入核,升高HO-1的表达。此外,我们的研究结果表明,siNrf2抑制了BZE对APAP诱导的HL-7702细胞存活率和凋亡相关蛋白表达的影响。结论:BZE在体外和体内均有抑制肝脏氧化应激,预防APAP诱导的肝毒性的作用。其作用机制可能是通过激活Nrf2信号通路抑制氧化应激和细胞凋亡,在预防药物性肝损伤方面发挥重要作用。
【学位授予单位】：河南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R965
【图文】：

大鼠肝组织

图 1-1 BZE 对 SD 大鼠肝脏指数的影响（ x±s ，n=4）Fig.1-1 Effect of BZE on liver index in SD rats ( x±s，n=4）Note:#:P<0.05vs.Control group；*:P<0.05vs.APAP group. 对 SD 大鼠肝组织病理学的影响

大鼠肝组织,标志物

图 1-2 BZE 对 SD 大鼠肝组织病理学的影响 (200×) (x ±s，n=4)Fig 1-2 Effect of BZE on liver morphology in SD rats (200×) ( x ±s，n=4)3.3 BZE 对 SD 大鼠肝损伤标志物 ALT、AST 的影响

【参考文献】