棉籽油中主要游离棉酚降解产物毒性及污染现状研究

发布时间：2020-07-05 17:46

【摘要】：目的:前期研究表明降解产物四甲氧基棉酚对小鼠精母细胞存在一定毒性,且在实验剂量下能够导致小鼠的精子发生畸变,且具有遗传毒性。本实验通过自制未脱毒棉籽油并进行分离纯化得纯度较高的降解产物四甲氧基棉酚,通过体内实验更加全面的考察降解产物四甲氧基棉酚的毒性,同时检测新疆地区市售棉籽油中降解产物的污染现状。方法:1.自制未脱毒棉籽油样品,通过ODS层析柱法制备主要游离棉酚降解产物,用于后期动物实验;2.采用昆明小鼠考察四甲氧基棉酚的急性毒性情况以及为后期长期毒性实验提供给药量;3.SD大鼠灌胃30d考察四甲氧基棉酚的长期毒性情况以及对大鼠的影响;4.采用组织切片HE染色法、体液生化指标以及NMR代谢组学法全面评价四甲氧基棉酚的毒性;5.采用高效液相色谱法,测定95批市售棉籽油中四甲氧基棉酚的含量,用于评价市售棉籽油的污染情况。结果:1.经ODS分离纯化未脱毒棉籽油中的游离棉酚降解产物,采用HPLC检测,根据面积归一化法,得纯度为85.30%的四甲氧基棉酚,比课题组前期纯度提高7.10%;2.急性毒性实验结果:以四甲氧基棉酚最大剂量25m g/Kg和最大给药体积0.40mL/10g给药后动物并未出现死亡情况,故无法计算LD50值,采用spss17.0统计软件对小鼠体重及脏器进行统计学分析,给药组与对照组小鼠心脏系数有显著性差异(P0.01),其它脏器及体重系数无显著性差异(P0.05);3.四甲氧基棉酚的长期毒性结果:实验采用spss17.0统计软件对大鼠体重及脏器进行统计学分析,给药组与对照组小鼠肝脏及脾脏系数有显著性差异(P0.01),其它脏器与体重系数无显著性差异(P0.05);4.组织切片结果:对照组与给药组大鼠的心脏、脾脏、肺、肾脏组织切片中无明显病理变化,但给药组大鼠的肝脏有明显病变,说明长期灌服四甲氧基棉酚,会影响大鼠肝脏组织的形态结构;5.生化指标结果:生化指标中AST、BUN、GLU、Bb有显著性差异(P0.05),其他生化指标无显著性差异(P0.05)。其中给药组的AST和BUN含量较对照组含量低,GLU及Bb含量较对照组高;6.通过对大鼠组织、尿液及粪便的核磁代谢组学检测结果表明:四甲氧基棉酚能够影响糖的有氧氧化、糖酵解及无氧糖酵解过程、氨基酸合成与代谢、脂质代谢、能量代谢,且对肝组织具有损伤作用,引起肾功能改变、肠道环境改变、引起一定炎症及精神-内分泌系统紊乱等;7.对95批市售棉籽油样品进行检测,其中有54批棉籽油样品中检测到四甲氧基棉酚,含量为0.026-1.513μg/mL。结论:仅通过游离棉酚评价棉籽油脱毒情况还不够全面,还需通过游离棉酚降解产物追溯棉籽油生产企业的脱毒工艺,从而有效的进行监管,还可以为棉籽油中游离棉酚降解产物检测标准奠定检测基础。
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：TS221;R99
【图文】：

层析柱及半制备液相分离纯化主要降解产物，并进行初步结构鉴定，经质谱仪检测逡逑可知游离棉酚降解产物分子量为５７３．２５０３３，分子式为Ｃ３４Ｈ３７０８，表明其化学结构的逡逑母核与游离棉酚一致［４２４３］，为四甲氧基棉酚，结构式见图３。游离棉酚具有多种毒性，逡逑但最为显著的毒性是生殖毒性，能够导致男性永久性不育，而四甲氧基棉酚是由游逡逑离棉酚转变而来，所以课题组针对体外精母细胞及小鼠进行毒性实验［４１］，结果表明，逡逑四甲氧基棉酚对精母细胞存在一定毒性，且在实验剂量下能够导致小鼠精子发生畸逡逑变，具有遗传毒性。故游离棉酚降解产物的存在，有可能是棉籽油潜在的安全隐患，逡逑同样可能对消费者的健康造成危害，课题组将更加全面的评价游离棉酚降解产物毒逡逑性。逡逑６逡逑

采用ＳｐＳＳ１７．０统计软件进行统计学分析，给药组第２１ｄ及２８ｄ收集的尿液与对照组逡逑第0ｄ天收集的尿液有显著性差异（Ｐ＜０．０５），其他无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结果见逡逑图５－２及表５－５。逡逑２４逡逑

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本文编号：2742938