抗癌药物NL-101和氨基酸、多肽相互作用的液质识别
发布时间：2020-07-11 11:39
【摘要】：氮芥类药物是在20世纪50年代就应用于临床并取得突出疗效的抗肿瘤药物,这类药物分子一旦进入体内后,就能通过分子内成环反应,得到活泼的乙烯亚胺离子。该乙烯亚胺离子可与多种体内有机物质的亲核基团(如蛋白质,DNA等)结合,发生烷基化作用使其失去生物活性。氮芥成环产物与蛋白质作用后得到的烷基化产物会影响患者正常的代谢从而导致副作用的产生,然而鲜有研究探索其结构特征。因此建立快速、有效的方法对该烷基化产物进行结构分析是很有必要的。质谱以其高灵敏度,样品用量少,可提供分子结构信息等绝对优势,已成为生物药物代谢研究中的重要工具。本论文以高效液相色谱串联质谱为分析手段,发展并建立了识别氮芥类药物NL-101与氨基酸、多肽之间相互作用的分析方法,并总结归纳出其相互作用以及反应产物在质谱条件下的裂解规律。1.NL-101稳定性实验研究。NL-101在溶液状态下,会通过分子内成环反应生成活泼的乙烯亚胺离子。基于此化学性质,本文模拟生理环境,考察了环境酸碱度和孵化时长对其代谢的影响。采用液质联用技术,对NL-101及其代谢产物进行识别研究。实验结果表明NL-101在中性和碱性环境下更容易发生代谢,即更易与环境中的亲核基团反应也更易水解,且在孵化9小时后,水解产物达到原药物量的50%。2.NL-101与氨基酸相互作用及其作用位点分析。选用孵化4小时的实验条件,考察了不同环境酸碱度下NL-101环化产物与氨基酸发生反应产物的作用位点。采用电喷雾诱导解离技术对产物进行研究,通过二级质谱图中特征碎片离子的差异实现了对其作用位点的识别。研究发现,NL-101与氨基酸中氨基作用生成的产物对碰撞能量敏感,裂解得到的信息丰富;NL-101与氨基酸中羧基作用生成的产物则相反;NL-101与氨基酸侧脸集团作用生成的产物,其二级质谱图有特征碎片。3.NL-101与多肽相互作用及其作用位点分析。以NL-101与氨基酸相互作用数据为基础,应用于分析NL-101与肌肽、鹅肌肽、谷胱甘肽及三胜肽之间的相互作用。通过对NL-101与这些多肽作用产物进行碰撞诱导解离产生的二级碎片离子进行分析,实现了对其作用位点的识别。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R96;O657.63
【图文】：
１．２．２电喷雾质谱对生物样品分析研究进展逡逑ＥＳＩ是对液体样品中的极性物质进行检测分析的离子源，通常使用甲醇、乙腈、氯仿、逡逑水等作为溶剂，样品离子化的原理可以被认为是射流和库伦炸裂（见图１．２所示），逡逑其对样品进行离子化时，通过高压电场诱发样品溶液带电，促使溶液形成小液滴，在达到逡逑Ｒａｙｌｅｉｇｈ极限时，小液滴中电荷斥力大于液滴的表面张力时，小液滴就会发生库伦爆炸，逡逑形成更小的液滴，这一过程一直循环发生，直至溶质从溶剂中剥离出来形成带电荷的被分逡逑析物离子。在ＥＳＩ电离过程中，容易形成被分析物与碱性金属离子的加和峰，通常会采用逡逑改变溶液的酸碱度来调整出峰效果，例如添加甲酸溶液或者氨水溶液［２６］。逡逑ＭｅｔａＪ邋Ｉ＊！？ｅ逡逑＿逦．逦－１００邋Ｖ逡逑ＥＳＩ邋Ｄｒｏｐｌｅｔｓ逦n佩义希逡唬
本文编号：2750361
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R96;O657.63
【图文】：
１．２．２电喷雾质谱对生物样品分析研究进展逡逑ＥＳＩ是对液体样品中的极性物质进行检测分析的离子源，通常使用甲醇、乙腈、氯仿、逡逑水等作为溶剂，样品离子化的原理可以被认为是射流和库伦炸裂（见图１．２所示），逡逑其对样品进行离子化时，通过高压电场诱发样品溶液带电，促使溶液形成小液滴，在达到逡逑Ｒａｙｌｅｉｇｈ极限时，小液滴中电荷斥力大于液滴的表面张力时，小液滴就会发生库伦爆炸，逡逑形成更小的液滴，这一过程一直循环发生，直至溶质从溶剂中剥离出来形成带电荷的被分逡逑析物离子。在ＥＳＩ电离过程中，容易形成被分析物与碱性金属离子的加和峰，通常会采用逡逑改变溶液的酸碱度来调整出峰效果，例如添加甲酸溶液或者氨水溶液［２６］。逡逑ＭｅｔａＪ邋Ｉ＊！？ｅ逡逑＿逦．逦－１００邋Ｖ逡逑ＥＳＩ邋Ｄｒｏｐｌｅｔｓ逦n佩义希逡唬
本文编号：2750361
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