乌司他丁和Salubrinal对急性百草枯中毒大鼠脑组织内质网应激及凋亡的影响
发布时间：2020-07-19 04:25
【摘要】：目的探讨大鼠急性PQ中毒后脑组织内质网应激和凋亡的变化；明确UTI和/或Salubrinal对急性PQ中毒大鼠脑组织的影响及作用机制。 方法选用Wistar大鼠250只，体重(250±10)g，按雌雄各半原则随机分为5组，每组各50只。Con组：空白对照组，一次性给予1ml生理盐水灌胃，1ml生理盐水2次/日腹腔注射；PQ组：PQ染毒组，一次性给予PQ溶液40mg/kg灌胃，1ml生理盐水2次/日腹腔注射；PU组：UTI处理组，大鼠PQ中毒后给予UTI（12万U/kg）2次/日腹腔注射；PS组：Salubrinal处理组，于中毒后第1、3、5天给予Salubrinal（1.0mg/kg）1次/日腹腔注射，一次1ml生理盐水腹腔注射；PUS组：UTI＋Salubrinal处理组，给予UTI（12万U/kg）2次/日腹腔注射，中毒后1、3、5天给予Salubrinal（1.0mg/kg）1次/日腹腔注射。（注：为保证每日2次腹腔注射，Salubrinal给药时与UTI同时腹腔注射，UTI0.5ml、Salubrinal0.5ml，体积共1ml）。观察大鼠一般状态，于中毒后第7天取大脑，行HE染色观察脑组织中海马区形态学变化，免疫组织化学法检测脑组织中CHOP的表达，TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况，Western blot法检测脑组织中GRP78、caspase-3蛋白的表达，行统计学分析。 结果①HE染色结果显示：Con组显示海马神经细胞排列整齐紧密，胞质丰富，核仁清晰。PQ染毒组海马区多数细胞浓缩，核仁消失。PU组海马区个别细胞浓缩，核仁消失。PS组海马神经细胞排列松散，大多数细胞浓缩，核仁消失。PUS组部分海马细胞浓缩，核仁消失。②Western Blot结果显示：与Con组相比，PQ组GRP78蛋白含量表达增高（P0.05)；与PQ组相比，PU组、PS组和PUS组GRP78蛋白含量表达降低（P0.05)；与PU组相比， PS组和PUS组中GRP78蛋白含量表达增高（P0.05)；与PS相比，PUS组GRP78蛋白含量表达降低（P0.05)。③Western Blot结果显示：与Con组比较，PQ组CHOP蛋白表达量明显增高（P0.05）；与PQ组相比，PU组、PS组和PUS组CHOP表达降低（P0.05）；与PU组相比，PS组CHOP表达降低（P0.05)，PUS组CHOP表达无明显变化（P＞0.05)；与PS组相比，PUS组中CHOP表达降低（P0.05)。④免疫组化结果显示：与Con组比较，PQ组CHOP蛋白表达量明显增高（P0.05）；与PQ组相比，PU组、PS组和PUS组CHOP表达降低（P0.05）；与PU组相比，PS组CHOP表达增高（P0.05)；PUS组CHOP表达无明显变化（P＞0.05)。与PS组相比，PUS组中CHOP表达降低（P0.05)。⑤TUNEL检测结果显示：对照组可见极少量TUNEL染色阳性细胞。与Con组相比，PQ组细胞凋亡数明显增高（P0.05）；与PQ组相比，PU组、PS组与PUS组细胞凋亡数减少（P0.05）；与PU组相比，PS组和PUS组细胞凋亡数增加（P0.05)；与PS相比，PUS组细胞凋亡数减少（P0.05)。 结论①急性PQ中毒诱发大鼠脑组织ERS和细胞凋亡的发生。②UTI抑制急性PQ中毒大鼠脑组织ERS和细胞凋亡，对脑组织有保护作用。③Salubrinal抑制急性PQ中毒大鼠脑组织ERS和细胞凋亡，对大鼠脑有损伤作用，其机制尚待进一步探讨。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R965;R595.4
【图文】：
图 4.1 实验大鼠脑织海马区 HE 染色结果（40×）4.3 大鼠脑海马区 Western blot 结果4.3.1 Western blot 法检测大鼠脑组织中 GRP78 的表达Western Blot 结果：测定 GRP78 蛋白的电泳条带灰度值，以各组 GRP78 蛋白的灰度值和与之相对应的内参 β-actin 的灰度值的比值作为 GRP78 蛋白表达的相对值，行统计学分析，做直方图。与 Con 组相比，PQ 组 GRP78 蛋白含量表达增高，差异有统计学意义（P<0.05)；与 PQ 组相比，PU 组 GRP78 蛋白含量表达降低，差异有统计学意义（P<0.05)， PS 组、PUS 组 GRP78 蛋白含量表达降低，差异有统计学意义（P<0.05)；与 PU 组相比，PUS 组中 GRP78 蛋白含量表达增高，差异有统计学意义（P<0.05)。与 PS 相比，PUS 组 GRP78 蛋白含量表达降低，差异有统计学意义（P<0.05)。（图 4.2，图 4.3）。
图 4.1 实验大鼠脑织海马区 HE 染色结果（40×）4.3 大鼠脑海马区 Western blot 结果4.3.1 Western blot 法检测大鼠脑组织中 GRP78 的表达Western Blot 结果：测定 GRP78 蛋白的电泳条带灰度值，以各组 GR白的灰度值和与之相对应的内参 β-actin 的灰度值的比值作为 GRP78 蛋白相对值，行统计学分析，做直方图。与 Con 组相比，PQ 组 GRP78 蛋白达增高，差异有统计学意义（P<0.05)；与 PQ 组相比，PU 组 GRP78 蛋表达降低，差异有统计学意义（P<0.05)， PS 组、PUS 组 GRP78 蛋白含降低，差异有统计学意义（P<0.05)；与 PU 组相比，PUS 组中 GRP78 蛋表达增高，差异有统计学意义（P<0.05)。与 PS 相比，PUS 组 GRP78 蛋白达降低，差异有统计学意义（P<0.05)。（图 4.2，图 4.3）。
图 4.3 实验大鼠脑海马区 GRP78 的相对表达量4.3.2 Western blot 法检测大鼠脑组织中 caspase-3 的表达Western Blot 结果：测定 Cleaved-caspase3 的电泳条带灰度值，以各Cleaved-caspase3 的灰度值和与之相对应的内参 β-actin 的灰度值的比值作Cleaved-caspase3 表达的相对值，做直方图。与 Con 组相比，PQ 组 Cleaved-casp蛋白表达增高，差异有统计学意义（P<0.05)。与 PQ 组相比，PU 组、PS 组PUS 组中 Cleaved-caspase3 蛋白含量表达降低，差异有统计学意义（P<0.05)；PU 组相比，PS 组 Cleaved-caspase3 蛋白含量表达增高，差异有统计学意（P<0.05)，PUS 组 Cleaved-caspase3 蛋白含量表达无明显变化（P＞0.05）；PS 组相比，PUS 组 Cleaved-caspase3 蛋白含量表达降低，差异有统计学意（P<0.05) 。（图 4.4，图 4.5）。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R965;R595.4
【图文】：
图 4.1 实验大鼠脑织海马区 HE 染色结果（40×）4.3 大鼠脑海马区 Western blot 结果4.3.1 Western blot 法检测大鼠脑组织中 GRP78 的表达Western Blot 结果：测定 GRP78 蛋白的电泳条带灰度值，以各组 GRP78 蛋白的灰度值和与之相对应的内参 β-actin 的灰度值的比值作为 GRP78 蛋白表达的相对值，行统计学分析，做直方图。与 Con 组相比，PQ 组 GRP78 蛋白含量表达增高，差异有统计学意义（P<0.05)；与 PQ 组相比，PU 组 GRP78 蛋白含量表达降低，差异有统计学意义（P<0.05)， PS 组、PUS 组 GRP78 蛋白含量表达降低，差异有统计学意义（P<0.05)；与 PU 组相比，PUS 组中 GRP78 蛋白含量表达增高，差异有统计学意义（P<0.05)。与 PS 相比，PUS 组 GRP78 蛋白含量表达降低，差异有统计学意义（P<0.05)。（图 4.2，图 4.3）。
图 4.1 实验大鼠脑织海马区 HE 染色结果（40×）4.3 大鼠脑海马区 Western blot 结果4.3.1 Western blot 法检测大鼠脑组织中 GRP78 的表达Western Blot 结果：测定 GRP78 蛋白的电泳条带灰度值，以各组 GR白的灰度值和与之相对应的内参 β-actin 的灰度值的比值作为 GRP78 蛋白相对值，行统计学分析，做直方图。与 Con 组相比，PQ 组 GRP78 蛋白达增高，差异有统计学意义（P<0.05)；与 PQ 组相比，PU 组 GRP78 蛋表达降低，差异有统计学意义（P<0.05)， PS 组、PUS 组 GRP78 蛋白含降低，差异有统计学意义（P<0.05)；与 PU 组相比，PUS 组中 GRP78 蛋表达增高，差异有统计学意义（P<0.05)。与 PS 相比，PUS 组 GRP78 蛋白达降低，差异有统计学意义（P<0.05)。（图 4.2，图 4.3）。
图 4.3 实验大鼠脑海马区 GRP78 的相对表达量4.3.2 Western blot 法检测大鼠脑组织中 caspase-3 的表达Western Blot 结果：测定 Cleaved-caspase3 的电泳条带灰度值，以各Cleaved-caspase3 的灰度值和与之相对应的内参 β-actin 的灰度值的比值作Cleaved-caspase3 表达的相对值，做直方图。与 Con 组相比，PQ 组 Cleaved-casp蛋白表达增高，差异有统计学意义（P<0.05)。与 PQ 组相比，PU 组、PS 组PUS 组中 Cleaved-caspase3 蛋白含量表达降低，差异有统计学意义（P<0.05)；PU 组相比，PS 组 Cleaved-caspase3 蛋白含量表达增高，差异有统计学意（P<0.05)，PUS 组 Cleaved-caspase3 蛋白含量表达无明显变化（P＞0.05）；PS 组相比，PUS 组 Cleaved-caspase3 蛋白含量表达降低，差异有统计学意（P<0.05) 。（图 4.4，图 4.5）。
【参考文献】
相关期刊论文 前10条
1 高捷,武英;乌司他丁对脑缺血再灌注后大鼠海马区神经细胞凋亡及学习记忆功能的影响[J];第四军医大学学报;2005年13期
2 陈伟峰;刘德红;何卫平;周丹;;乌司他丁对大鼠全脑缺血再灌注后NF-κB的影响[J];广西中医学院学报;2006年02期
3 江莲,戎小平,孟繁Y
本文编号：2761906
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