pPolyHb及Hb对免疫抑制小鼠的影响作用研究

发布时间：2020-08-07 18:20

【摘要】：目的:研究戊二醛聚合猪血红蛋白(Glutaraldehyde-Polymerized Porcine Hemoglobin,pPolyHb)和血红蛋白(Hemoglobin,Hb)对环磷酰胺(Cyclophosphate,CTX)所致的免疫抑制小鼠免疫功能的影响及量效相关性。用化疗药物CTX建立免疫抑制小鼠模型,可以模拟临床上CTX治疗癌症时所引发的免疫功能低下的副作用。本实验探究了pPolyHb及Hb在非特异性免疫、体液免疫、细胞免疫以及脾脏组织病理几个方面对CTX所致的免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:1.建立免疫抑制小鼠模型:分别连续2日、5日、6日经腹腔给小鼠注射CTX(100 mg/kg),根据小鼠的状态及免疫基本指标,选出5日为最优建模时间;2.将pPolyHb和Hb按7 mg/kg、1.4 mg/kg、0.7 mg/kg三个剂量组经小鼠尾静脉给药,采用抗体生成细胞实验法测定pPolyHb以及Hb对于免疫抑制小鼠体液免疫功能的影响;3.将pPolyHb和Hb按7 mg/kg、1.4 mg/kg、0.7 mg/kg三个剂量组经小鼠尾静脉给药,检测小鼠血清中免疫相关因子IL-1β、IL-2和TNF-α含量的变化,同时采用小鼠迟发型超敏反应法测定pPolyHb以及Hb对于免疫抑制小鼠细胞免疫功能的影响;4.通过观察免疫抑制小鼠脾脏组织的HE染色切片,探究Hb及pPolyHb对免疫抑制小鼠脾脏的病理学影响。结果:本实验结果初步证明Hb对于CTX所致的免疫抑制小鼠具有一定的免疫提升作用,但还需要进行后续的深入研究;而pPolyHb对于小鼠免疫力的提升效果则不显著:1.Hb(0.7 mg/kg及1.4 mg/kg)可使免疫抑制小鼠体内白细胞数量上升、体重增加、脾脏指数增大,间接反映出小鼠免疫力水平的提升;Hb(1.4 mg/kg)可使免疫抑制小鼠碳廓清能力提高,小鼠的单核-巨噬细胞的吞噬功能增强,表明小鼠非特异性免疫功能的增强;而pPolyHb对小鼠非特异性免疫功能的影响则不明显;2.Hb(0.7 mg/kg及1.4 mg/kg)可使免疫抑制小鼠体内抗体生成细胞数量增加,这表明了小鼠B淋巴细胞产生抗体的能力增强,小鼠体液免疫功能增强;而pPolyHb对小鼠体液免疫功能的影响不明显;3.Hb(1.4 mg/kg)可以明显提升免疫抑制小鼠血清中IL-1β因子的含量;pPolyHb和Hb(1.4 mg/kg)可以提高免疫抑制小鼠血清中TNF-α因子的含量;pPolyHb(1.4 mg/kg)和Hb(0.7 mg/kg及1.4 mg/kg)可以使免疫抑制小鼠右耳肿胀率有明显提升,表明小鼠细胞免疫水平有明显提升。实验还发现pPolyHb和Hb对免疫抑制小鼠血清中IL-2因子的分泌并无明显影响。4.对免疫抑制小鼠的脾脏组织切片进行观察发现:CTX+NaCl组小鼠脾脏组织的病理变化明显,该组小鼠的免疫抑制比较严重;而CTX+Hb组小鼠脾脏内淋巴细胞处于相对激活状态,淋巴细胞数量增多,对免疫抑制小鼠的免疫功能具有一定促进作用;而CTX+pPolyHb组小鼠脾脏中淋巴细胞数量增加不明显,其对于免疫抑制小鼠的免疫促进作用不明显。
【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R965
【图文】：

免疫系统

西北大学硕士学位论文免疫分子则可分为膜结合型和分泌型两类，膜结合型包括 B 细胞识别抗原受体，T细胞识别抗原受体，主要组织相容性复合体等；分泌型包括免疫球蛋白、补体及细胞因子等。免疫器官是免疫细胞等分化成熟的场所，产生的免疫细胞可以进一步分泌免疫分子发挥免疫应答，如淋巴细胞、巨噬细胞等能通过产生干扰素、白细胞介素、细胞因子等参与免疫调节。总而言之，免疫器官、免疫细胞和免疫分子共同构成非特异性及特异性的免疫系统[1]。

pPolyHb及Hb对免疫抑制小鼠的影响作用研究

Hb的结构

小鼠,取样时间,建模

第二章免疫抑制小鼠模型的建立及检测第 2 组小鼠于建模两天完成并自愈 3 天后处死解剖；第 3-4 组小鼠则采用同上方法研究CTX 建模五天后小鼠各项基础免疫学指标的变化；第 5-6 组小鼠同上研究 CTX 建模六天后小鼠各项基础免疫学指标的变化；第 7 组小鼠则分别在腹腔注射等体积生理盐水 2天、5 天和 6 天后处死解剖作为 Normal 组。

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