多奈哌齐鼻用温敏凝胶研制及其体内药动学和脑靶向研究

发布时间：2020-08-10 23:08

【摘要】：盐酸多奈哌齐(Donepezil hydrochloride,DPZ),是第二代高选择性乙酰胆碱酯酶抑制剂,主要用于治疗轻度和中度阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD),具有药理活性强、选择性高、不良反应少、耐受性好等特点。DPZ已上市剂型有片剂与胶囊,DPZ口服制剂有许多胃肠道副作用,而且,由于其亲水性强,不易透过血脑屏障,因此进入脑组织药量少,疗效受到影响。鼻腔给药的优点是吸收起效快,生物利用度高,具有脑靶向性,因此,本文拟以DPZ为模型药物,研制了该药物的鼻用温敏原位凝胶剂,以期达到吸收起效快、生物利用度高、使用方便、脑靶向给药等目的。本文从制剂处方前研究、体外透皮实验研究、鼻用温敏原位凝胶剂的处方筛选以及制备工艺的研究、体外质量评价、体内药动学及生物利用度研究、脑靶向性研究以及鼻黏膜纤毛毒性等方面对DPZ鼻用温敏原位凝胶剂进行系统而深入的研究。第一章DPZ温敏原位凝胶剂的处方前研究中,首先建立了专属性强、准确度好、精密度与灵敏度高的HPLC药物含量测定方法,完成油水分配系数、溶液的化学稳定性和β-CD水溶性衍生物对其溶解度的影响三个方面的研究。测定结果发现当缓冲液pH≤4.0时,DPZ的P值远远小于1,当缓冲液pH4.0时,随着缓冲液pH的增大,P值逐渐增大。DPZ专属性实验表明,DPZ在中性条件下稳定,在酸性、强氧化条件下稳定性较差,在强碱性条件下稳定性最差;DPZ溶液化学稳定性研究结果表明,当pH值为7时,DPZ溶液化学稳定性最好,当pH值7时,DPZ溶液的化学稳定性降低,当pH值7时,DPZ溶液的化学稳定性显著降低。此外,HP-β-CD对DPZ的增溶作用最大,DM-β-CD对其溶解度影响不大,而SBE-β-CD使其溶解度有一定程度降低。最后,溶液离子强度对DPZ溶液的化学稳定性无影响。第二章中DPZ的体外透皮实验研究中,通过离体羊鼻黏膜考察并比较了DM-β-CD、SBE-β-CD、HP-β-CD三种吸收促渗剂对DPZ的促渗作用,以及促渗剂浓度对促渗作用效果的影响。结果显示三种β-CD衍生物对DPZ透皮均有促渗作用,其中HP-β-CD的促渗效果最好,当浓度为3.5%时,其促渗效果最佳。故选择3.5%HP-β-CD作为DPZ鼻用温敏原位凝胶剂处方的吸收促渗剂。第三章对DPZ鼻用温敏原位凝胶剂进行处方筛选及制备工艺的研究。采用星点设计-响应面法设计二因素五水平实验,以泊洛沙姆407(F127)和泊洛沙姆188(F68)为考察因素,以胶凝温度和胶凝时间为筛选指标,筛选出空白处方最佳处方条件为19.64%F127,8.2%F68。然后,根据第一章对DPZ油水分配系数及溶液化学稳定性的考察结果,初步将DPZ温敏原位凝胶剂的pH值定为7.0,根据第二章DPZ体外透皮实验研究的实验结果可知,选择3.5%HP-β-CD作为DPZ温敏原位凝胶剂的吸收促渗剂,其次,确定了该制剂的最优处方及制备工艺,DPZ鼻用温敏原位凝胶剂的处方组成为:5%DPZ,3.5%HP-β-CD为吸收促渗剂,0.05%尼泊金乙酯为防腐剂,19.64%F127,8.2%F68,溶剂为水。第四章对DPZ温敏原位凝胶剂进行体外质量评价。制备了3批次DPZ温敏原位凝胶剂样品,考察了DPZ温敏原位凝胶剂的外观、pH、胶凝温度、胶凝时间、溶蚀率及体外释药速度。DPZ温敏原位凝胶剂在45min的体外溶蚀率为88.40%,药物释放率为89.28%,温敏原位凝胶溶蚀量较多,药物释放较完全,且二者间的线性关系明显(r=0.991)。在DPZ体外释放度实验中,DPZ溶液释药速度很快,在2 h内累积释药高达85.0%,而该药物鼻用温敏凝胶释药速度稍缓,在相同时间累积释药不到50.0%,8 h累积释药仅70.0%,表明该DPZ鼻用温敏凝胶具有良好的缓释效果。DPZ鼻用温敏原位凝胶剂质量研究结果可见,3批次样品其外观透明澄清,pH值均在7.0左右,DPZ以及尼泊金乙酯的含量均在标示量的95%~105%范围内。第五章对DPZ温敏原位凝胶剂的药动学进行考察。首先建立了大鼠血浆中DPZ浓度的HPLC-荧光检测方法;然后,以灌胃给药为参比,测定大鼠DPZ鼻用温敏原位凝胶剂鼻腔给药的血浆药物浓度,采用3P97药动学程序计算药物的主要药动学参数T_(max)、C_(max)、AUC以及相对生物利用度(F_r)等。结果发现,DPZ鼻用温敏原位凝胶剂的T_(max)、C_(max)及AUC_(0-∞)分别为0.17 h、4113.41ng·mL~(-1)、3010.10ng·h·mL~(-1),而灌胃给药的T_(max)、C_(max)及AUC_(0-∞)分别为0.92 h、269.35ng·mL~(-1)、780.66ng·h·mL~(-1),二者之间有显著性差异(P0.05)。DPZ鼻用温敏原位凝胶剂的F_r高达385.58%。表明,DPZ经鼻腔给药后,其吸收明显加快,生物利用度显著提高。第六章对DPZ温敏原位凝胶剂的脑靶向性进行了研究。首先建立了测定大鼠脑组织中DPZ浓度的HPLC-荧光检测方法;然后,以灌胃给药为参比,测定大鼠DPZ鼻用温敏原位凝胶剂鼻腔给药的脑组织中嗅球(OB)、嗅束(OT)大脑(CL)、小脑(CR)的药物浓度。结果发现DPZ鼻用温敏凝胶剂的T_(max)为0.23h,C_(max)为11218.34ng·g~(-1),AUC_(0-∞)为8832.22ng·h·g~(-1),而灌胃给药的T_(max)、C_(max)和AUC_(0-∞)分别为1.5 h、757.85ng·g~(-1)和1581.32ng·h·g~(-1)。二者之间有显著性差异(P0.05)。求得DPZ鼻用温敏原位凝胶剂脑靶向指数为1.51,表明其具有明显脑靶向性。第七章对DPZ温敏原位凝胶剂鼻黏膜纤毛毒性的研究中,采用蟾蜍上颚黏膜模型离体法和在体法评价其纤毛毒性。分别考察了DPZ溶液、空白处方以及完整处方对鼻黏膜的纤毛毒性。结果表明,DPZ溶液、完整处方以及空白处方对鼻黏膜纤毛均有一定的毒性,但这种毒性是可逆的。其中,DPZ溶液对黏膜纤毛的影响较大,完整处方次之,空白处方对纤毛毒性最小。
【学位授予单位】：内蒙古医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R943;R96
【图文】：

化学结构,患者

损、语言障碍和人格改变等。最新发布的《世年，全世界有 4680 万人饱受 AD 的折磨。国，AD 患者将增至 7562 万，到 2050 年，将患者饱受病痛的折磨。随着老龄化的加剧，沉重的负担[1]。AD 患者海马和新皮质的乙酰胆酶（ChAT）显著减少，Ach 由 ChAT 合成，乙酰 Ach，终止神经递质对突触后膜的兴奋作用，记忆障碍及其他认知功能障碍的原因之一[2]。乙酰胆碱酯酶抑制剂（AchEI），其活性强、轻、中度 AD 患者的首选治疗药物。DPZ，商H30ClNO3，分子量：415.95，化学名 2-（1-苄茚酮盐酸盐。结构式如图 1。日本卫材公司最先在 1999 年 10 月开始销售[3]。

曲线,pH变化,水相,缓冲液

在 30min 时基本达到平衡。故选择 30min 作为油、水相分配到达水分配系数等式：P=（C0-C1）/C1，计算 P 值，其中 C0为水相中配平衡后水相中的药物浓度。由实验结果可知，DPZ 在正辛醇4，DPZ 在正辛醇-不同 pH 缓冲液系统中的 P 值变化见图 1-2，由，DPZ 的 P 值远远小于 1，当 pH＞4.0 时，随着缓冲液 pH 的增大表 1-3 正辛醇-水/磷酸盐缓冲液中 DPZ 平衡时间测定结果水以及不同 pH 值缓冲液中 DPZ 浓度（μg·mL-1）2.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 10.0 8.76 8.24 7.91 5.68 4.01 3.15 1.16 7.51 6.73 4.96 3.65 2.32 2.42 0.43 7.40 6.53 4.65 2.76 1.75 0.65 0.30 6.78 6.21 3.74 2.13 0.95 0.51 0.20 6.79 6.13 3.50 2.39 1.04 0.30 0.16

降解曲线,溶液,溶液化学,玻璃试管

内蒙古医科大学硕士研究生学位，10.0，12.0 的系列磷酸盐缓冲液，备用。稳定性的研究前述 DPZ 溶液 0.2mL，置于 10mL 具塞玻璃试管中，分别加入盐缓冲液 9.8mL，摇匀，密塞，置于 80℃恒温条件下，分别于上述色谱条件进样分析，计算 DPZ 的浓度及降解百分率。结果 pH 值为 7 时，DPZ 溶液化学稳定性最好，但当 pH＜7 时，DPZ定程度降低，当 pH＞7 时，DPZ 溶液的化学稳定性显著降低。

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