顺铂对小鼠胃组织ICC的损伤以及姜黄素的保护作用

发布时间：2020-08-22 11:17

【摘要】：目的:姜黄素是从姜黄中提取的一种天然多酚,具有广泛的生物活性,大量研究也表明姜黄素具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理作用,但还未确定其对胃肠道蠕动的影响及相关作用机制。顺铂作为一种临床常用药物,属于细胞周期的非特异性药物,它具有细胞毒性,可抑制癌细胞DNA复制过程,在广泛应用以达到抗肿瘤效果的同时,不可避免地会对人体产生副作用,其中消化道反应常见。我们以前的研究发现姜黄素可以显著改善顺铂导致的小鼠胃排空延迟,但作用机制还不完全清楚。胃肠道中有一种特殊类型胃肠间充质细胞,这种细胞位于消化道自主神经和平滑肌之间,被称为Cajal间质细胞(Cajal interstitial cells,ICCs),其与平滑肌细胞(SMC)、肠神经细胞等构成了复杂网络,大量研究显示,这些细胞间相互作用对胃肠正常蠕动功能起至关重要的作用。本研究探索顺铂对胃蠕动功能的影响是否与胃组织Cajal间质细胞(Cajal interstitial cells,ICCs)结构和功能变化有关,并研究姜黄素对胃肠道的保护作用是否也通过抑制ICC相关信号的变化而发挥作用。方法:选用健康成年雄性昆明种小鼠30只,体重22~25 g,适应性喂养一周后随机分为对照组、顺铂组和顺铂+姜黄素组,每组各10只。姜黄素(200 mg/kg/d)混悬液每天灌胃一次,连续灌胃15天。顺铂于实验结束前5天开始每天腹腔注射(2mg/kg/d)一次,共5天。对没有给予姜黄素或顺铂的组分别给予等量、等方式的溶媒溶液和生理盐水作为对照。观察小鼠的一般状况,计算每只小鼠最后5天的体重增减值。停药24h后测量小鼠的胃排空率。脱臼处死小鼠后去胃组织电镜检测ICC超微结构,同时分别检测下列指标:特异性反应ICC功能变化的Ano1蛋白、缝隙连接通道蛋白连接蛋白43(Cx43)进行westernblot和免疫荧光染色,并用实时荧光定量PCR发测定两者mRNA的表达情况。结果:对照组小鼠的体重在实验后5天逐渐增加(+4.43±1.06),顺铂组小鼠注射顺铂的5天内体重不增反降(-4.64±0.98,P0.01);姜黄素+顺铂组与顺铂组相比,后5天体重下降值明显减少(-2.98±0.93,P0.05)。注射顺铂组小鼠胃排空率(22.56±5.44)与对照组(44.49±6.96)比明显降低(P0.01),顺铂加姜黄素组(30.72±6.60)与顺铂组比胃排空率有所回升(P0.05)。注射顺铂后,电镜观察顺铂组胃窦肌层ICCs细胞皱缩形状不规则,细胞与神经和平滑肌之间的连接缝隙增大,部分连接断裂;胞核形状不规则,异染色质增多,核边缘不清晰;细胞质减少,线粒体减少,溶酶体增多,而姜黄素+顺铂组上述损伤明显减轻。进一步研究显示,注射顺铂组小鼠胃窦和胃体组织中的Ano1 mRNA表达量均明显降低(P0.01);而顺铂+姜黄素组小鼠胃窦和胃体组织Ano1mRNA表达量与顺铂组比较有一定改善(P0.05)。Westernblot检测的胃体组织Ano1蛋白量变化和上述mRNA表达量变化基本一致。免疫组织化学染色结果显示,Ano1的阳性表达主要位于胃壁的环形和纵行平滑肌之间,阳性表达的量和强度和上述Westernblot检测的结果相似。同时,顺铂组小鼠胃窦和胃体组织中Cx43 mRNA表达量也明显降低(P0.01),而顺铂+姜黄素组小鼠窦和胃体组织中Cx43mRNA表达量有所提高(P0.05)。Westernblot检测的胃体组织Cx43蛋白变化和mRNA变化基本一致;免疫组织化学染色结果显示,Cx43阳性表达主要位于环形和纵行平滑肌肌细胞周围,阳性表达变化和Westernblot检测结果相似。结论:(1)顺铂可引起胃组织ICC结构损伤,导致胃排空延缓,而姜黄素可以抑制这种变化,改善胃排空,由此小鼠消化功能有所恢复,体重消耗减轻,生存状态好转;(2)顺铂引起胃组织Ano1 mRNA和蛋白表达均减少,由此会影响胃组织ICC起搏电位形成,导致慢波节律起搏障碍,胃蠕动减弱,而姜黄素可以抑制这种变化;(3)顺铂还可以降低ICC与平滑肌细胞之间连接蛋白Cx43mRNA和蛋白表达量,由此会引起信息向平滑肌传递障碍,导致胃运动功能降低,而姜黄素可以改善这种影响。本研究说明顺铂引起的胃排空障碍与ICC的结构和功能损害有关,而姜黄素减轻顺铂引起的胃排空障碍机制之一是通过改善ICC的结构和功能。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R965
【图文】：

P<0.01图1 小鼠体重和胃排空率的变化（x S，n=10）Figure 1-1 Changes of body weight. Figure 1-2 Changes of gastric emptying rate of miceNote: Compared with Control group, **P<0.01; Compared with DDP group, P<0.01

图 2. 小鼠胃体组织 HE 染色结果Figure 2. Results of HE staining in gastric tissue of mice2.3 胃组织 ICC 超微结构的变化各组小鼠胃窦部肌层组织进行了电镜观察 ICC 超微结构：那些周围连接有神经束和平滑肌细胞的间质细胞被确认为时 ICC 细胞。顺铂组胃窦肌层 ICC 细胞皱缩形状不规则，细胞与神经和平滑肌之间的连接缝隙增大，部分连接甚至断裂；ICC 细胞核形状变得明显不规则，异染色质增多，核边缘不清晰；细胞内细胞质减少，线粒体减少，溶酶体增多。姜黄素治疗组上述改变明显减轻（图 3）。

图 2. 小鼠胃体组织 HE 染色结果Figure 2. Results of HE staining in gastric tissue of mice2.3 胃组织 ICC 超微结构的变化各组小鼠胃窦部肌层组织进行了电镜观察 ICC 超微结构：那些周围连接有神经束和平滑肌细胞的间质细胞被确认为时 ICC 细胞。顺铂组胃窦肌层 ICC 细胞皱缩形状不规则，细胞与神经和平滑肌之间的连接缝隙增大，部分连接甚至断裂；ICC 细胞核形状变得明显不规则，异染色质增多，核边缘不清晰；细胞内细胞质减少，线粒体减少，溶酶体增多。姜黄素治疗组上述改变明显减轻（图 3）。

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 王强军;;国际刑事法院管辖权确立机制和获取被告人手段之研究——以ICC拟逮捕苏丹现任总统巴希尔为视角[J];刑法论丛;2009年01期

2 蔡圣燕;色适应及ICC色彩管理中的色适应转换[J];北京印刷学院学报;2004年04期

3 付华良;;整周波控制(ICC)电流的间谐波分析[J];科技风;2010年09期

4 李湘利,张子德,陈志周,王雪静,张会坡;ICC对黄金梨采后生理及品质的影响[J];河北农业大学学报;2005年04期

5 张永革;贾卓敏;方强;宋波;;逼尿肌反射亢进大鼠膀胱ICC细胞数量的变化及意义[J];临床泌尿外科杂志;2009年09期

6 张二虎,卞正中,胡涛;基于ICC标准的彩色扫描仪色彩检测及标定[J];仪器仪表学报;2004年05期

7 丁莹;;ICC在我国所作裁决的国籍定性[J];法制博览;2017年16期

8 陈凤琴;余跃;薛丹;王巧民;;沉香化气胶囊对糖尿病大鼠小肠ICC和肌间神经丛的影响[J];世界华人消化杂志;2012年20期

9 高原;张水波;仉乐;;论ICC“见索即付保函统一规则”下的国际工程保函[J];哈尔滨商业大学学报(社会科学版);2006年03期

10 毕叶;;PICC“一切险”条款分析研究——与ICC(A)条款比较[J];中南财经政法大学研究生学报;2008年01期

相关会议论文 前10条

1 林雪莲;郭慧淑;;钠尿肽信号通路上调对抑郁大鼠胃ICC丢失的影响[A];中国生理学会张锡钧基金第十三届全国青年优秀生理学学术论文综合摘要、中国生理学会第十一届全国青年生理学工作者学术会议论文摘要[C];2015年

2 李霁;;论ICC示范仲裁条款在我国的效力及其相关问题——兼评《仲裁法》司法解释中的有关规定[A];2008全国博士生学术论坛（国际法）论文集——国际公法、国际私法分册[C];2008年

3 陈力;;ICC在我国作成裁决的承认与执行——兼论《纽约公约》视角下的“非内国裁决”[A];中国仲裁与司法论坛暨2010年年会论文集[C];2010年

4 徐辉;李蓓蓓;吴杰;徐智胜;;胃壁神经元与ICC在大鼠胃炎发病中的作用表达[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年

5 刘真;朱明;于健;;基于ICC机制的多投影仪拼接显示实验研究[A];颜色科学与技术——2012第二届中国印刷与包装学术会议论文摘要集[C];2012年

6 封建立;宋波;方强;丁励蠡;;ICC样细胞与逼尿肌不稳定的关系研究[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

7 谢盟;张阳;张义军;吕伟涛;郑栋;;触发闪电M分量和ICC脉冲的对比分析[A];第31届中国气象学会年会S9 第十二届防雷减灾论坛——雷电物理防雷新技术[C];2014年

8 曹朝辉;史瑞芝;;ICC特性文件的构成及其应用中的关键技术[A];中国感光学会第七次全国会员代表大会暨学术年会和第七届青年学术交流会论文摘要集[C];2006年

9 丁砺蠡;封建立;方强;宋波;;不稳定膀胱中ICC细胞结构和兴奋性变化的实验研究[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

10 封建立;方强;丁励蠡;宋波;;正常膀胱ICC样细胞分布的部位差异及其与局部逼尿肌收缩力改变的关系研究[A];第十五届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2008年

相关重要报纸文章 前1条

1 本报驻埃及特派记者 黄培昭;ICC调查“战争罪”惹恼以色列[N];环球时报;2019年

相关博士学位论文 前10条

1 杨玻;青藤碱和针刺会阳、中膂俞穴对慢性非细菌性前列腺炎大鼠膀胱功能和ICC样细胞影响[D];大连医科大学;2010年

2 贾卓敏;M受体对膀胱ICC细胞兴奋性的影响及在膀胱收缩功能中作用的探讨[D];第三军医大学;2009年

3 胡永辉;针刺对术后大鼠胃肠平滑肌收缩粗肌丝调节和ICC细胞的影响[D];广州中医药大学;2011年

4 王江平;前列腺ICC介导交感神经信号调控平滑肌活动的功能初探[D];华中科技大学;2014年

5 钟晓;钠钙交换体亚型3在大鼠膀胱ICC样细胞兴奋调控中的作用初探[D];第三军医大学;2013年

6 张永革;膀胱ICC细胞在神经源性膀胱兴奋性改变中的作用探讨[D];第三军医大学;2009年

7 王永权;机械牵张对豚鼠膀胱ICC细胞兴奋性的影响及其与逼尿肌不稳定的关系[D];第三军医大学;2009年

8 丁砺蠡;膀胱Cajal间质细胞（ICC）在膀胱起搏中的作用研究[D];第三军医大学;2008年

9 李国峰;养血活血方治疗血虚型便秘临床研究及对便秘模型小鼠结肠ICC的影响[D];中国中医科学院;2008年

10 方强;ICC样细胞上P2X受体介导的嘌呤能信号在膀胱功能调控中的作用研究[D];第三军医大学;2008年

相关硕士学位论文 前10条

1 于晶;姜黄素改善外源性一氧化氮所致小鼠胃排空障碍的ICC相关机制探究[D];青岛大学;2019年

2 姜少萍;顺铂对小鼠胃组织ICC的损伤以及姜黄素的保护作用[D];青岛大学;2019年

3 黄硕;基于ICC的恶意安卓程序检测方法研究与实现[D];江西师范大学;2018年

4 王子雄;SCL基因重组慢病毒对DCP膀胱组织中ICC形态学变化的探究[D];石河子大学;2017年

5 耿梦霏;ICC仲裁裁决国籍在我国的认定[D];湘潭大学;2011年

6 彭磊;补中益气汤对力竭心身应激大、小鼠胃窦ICC的影响研究[D];云南中医学院;2014年

7 张萌;益生菌对结肠癌患者肠道免疫及ICC的影响[D];天津医科大学;2015年

8 刘志慧;基于Internet Call Center(ICC)电子商务的研究和应用[D];中国农业大学;2001年

9 盖丽英;基于ICC标准的扫描仪色彩特性化研究[D];西安理工大学;2008年

10 氋彩霞;滋阴降胃汤对糖尿病胃轻瘫大鼠ICC和肌间神经丛的影响[D];北京中医药大学;2015年

本文编号：2800623