山核桃仁中脂肪酸分析和多肽的制备及活性研究

发布时间：2020-08-26 06:39

【摘要】：山核桃是浙江省驰名的优质坚果类食品,也是浙江临安地区所特有的经济作物。自古以来山核桃就以其独特的味道与健体强身及益智作用而受到了浙江省乃至全国人民的喜爱。对山核桃仁的研究表明,山核桃仁中含有大量的不饱和脂肪酸与丰富的蛋白质,但是进一步对其中多肽的研究却寥寥无几。因此本文着眼于山核桃仁中脂肪酸和氨基酸的组成进行深入的研究,并将机械化学技术应用于山核桃多肽制备中,对其抗氧化和免疫活性展开研究,为山核桃资源的利用与开发提供切实可靠的研究基础。本文的具体内容如下:首先,对山核桃仁中的油脂、蛋白质的含量测定与脂肪酸、氨基酸组成进行分析,并将山核桃与核桃、碧根果进行比较,分析山核桃与其他两种坚果的区别之处。采用氯仿-甲醇提取法最大程度上获取坚果仁中油脂,获得山核桃种仁油脂的较优提取条件为:提取温度为65℃,提取时间为60 min,料液比为1:12,甲醇与氯仿体积比为1:2。在较优条件下获取山核桃、核桃与碧根果的油脂,通过气相色谱法对其中的脂肪酸组成和含量进行研究。结果表明,三种坚果油中都包含11种脂肪酸并且其组成有较明显的区别,山核桃和碧根果仁中含量最高的脂肪酸都是油酸,其含量分别为68.92%和57.30%。而核桃仁中含量最高的是亚油酸,含量为62.31%。并且山核桃仁不饱和脂肪酸的含量明显高于其他两种坚果,可达到92.92%。通过对三种坚果仁中的蛋白质含量和氨基酸的组成和含量进行测定。结果表明,山核桃蛋白含量为8.11%,但是其中必需氨基酸的含量占总量的29.89%,大于核桃及碧根果。另外,三种坚果仁中氨基酸含量最高的都为谷氨酸,其次是精氨酸和天冬氨酸。其次,主要研究机械化学辅助法制备山核桃多肽。多肽是人体摄入蛋白质的主要吸收形式,一定分子量的多肽可以更快速的通过肠道吸收,进入人体后发挥作用,因此研究山核桃来源的多肽及其制备方法有助于提高山核桃经济价值。其中,对酶解法的单因素考察,确定了酶解法制备山核桃多肽的较优工艺为:碱性蛋白酶的加酶量为2.5%,底物浓度为2%,温度为55℃,pH为9.0,酶解时间为3 h。接着通过机械化学辅助技术并结合响应面分析建立了机械化学辅助制备山核桃多肽的方法,得到较优工艺条件为:氢氧化钠用量为14%,填充率为10.7%,球磨时间为43 min,球磨频率为22 Hz。通过对上述两种制备山核桃多肽的方法进行比较分析,根据扫描电镜图观察山核桃脱脂粉的微观结构,可以看出机械化学处理后的山核桃脱脂粉,其颗粒度明显的下降,颗粒均匀度提高,有利于酶解反应,且机械化学辅助法制备山核桃多肽的得率相比酶解法提高了42.91%。另外,机械化学辅助法球磨有助于得到重均相对分子量较小的多肽,且多肽重均相对分子质量分布均一度较好。最后,对机械化学辅助法制备的山核桃多肽进行了抗氧化和免疫活性的研究,研究结果表明山核桃多肽在DPPH和ABTS自由基清除实验中其清除能力和Vc相当,具有较强的自由基清除能力。通过脾淋巴细胞增殖实验研究,发现山核桃多肽具有促进脾淋巴细胞增殖的作用,为山核桃具有强身健体功效提供一定的科学依据。
【学位授予单位】：浙江工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R914;R96
【图文】：

山核桃,主要化学成分

与山核桃为同属的植物总共有 18 个种，其中包桃生产地广泛，在我国有大量种植[1]。在中国，山核桃主要江和安徽两个省之间的天目山区分布，地处北纬29°～31°，东有杭州的临安区、安吉县与建德市和安徽的宁国市、歙县与桃性平，味甘。在公元 3 世纪时，晋朝张华编写的《博物志核桃的性状，由李时珍编写的《本草纲目》所述，山核桃可以闷气短、身体乏力和尿频等一系列症状，并且具有滋阴养肺心病的作用。山核桃中的营养成分主要是蛋白质和油脂[3]，中富含了多种不饱和脂肪酸。常食山核桃仁能促进身体功能力和免疫力；此外，山核桃全身都有药用价值，把山核桃的外水能治疗皮肤癣等疾病[4]；用其新鲜的根皮煎汤浸洗，可以发现，山核桃还具备抑制癌细胞增殖、抑制细菌生长和抗氧桃中的化学成分研究

机械研磨,稻壳,机械化学,穿心莲内酯

概念首次由德国学者 W.Ostwald 提出，但是当时人们对于机械化学的基本原理的认识较少。直到 20 世纪 50 年代，科学家 Peters 等对于机械力对化学反应的诱发采取了较多的科研探索，后来又刊登了题目为《机械力化学反应》的研究文章，该论文确定了机械化学反应的本质过程，对提高机械化学的不断向前发展起到了重要的作用。60 多年来，机械化学在有机合成、有毒有害废物处理和动植物有效成分辅助提取等领域的广泛应用并不断推动该学科的发展[70]。机械化学辅助提取是指将机械化学应用于植物有效成分提取的预处理，通过细胞壁的破裂或者发生固相反应提高有效成分的提取效率或者减少有机溶剂的使用等。近年来，机械化学辅助提取技术已被许多科研工作者使用在多种植物的成分提取中。王洋等[71]实验中应用械化学辅助的办法来得到穿心莲内酯，通过使用高性能振动研磨机进行机械化学处理，选择穿心莲内酯的提取率为优化目标，采用正交试验得出用机械化学法辅助提取穿心莲内酯最优的条件为：Na2CO3助剂使用量是 3%(w/w)、研磨时间为 45 min、溶剂为纯净水、料液的比例是 1: 60(g/mL)，穿心莲内酯提取率为 1.6%。

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山核桃仁中脂肪酸分析和多肽的制备及活性研究械力可以使稻壳细胞壁中的纤维素无定形化以及增加其比表面积，从而提高低分子量多糖的产率。稻壳经机械研磨处理的扫描电镜图如图 1-4，其中（a）和（b）分别为放大 500 倍和 1000 倍。稻壳未经机械研磨处理的扫描电镜图如图 1-5，其中（c）和（d）分别为放大 500 倍和 1000 倍。

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