食品药品中痕量真菌毒素检测方法的研究与应用

发布时间：2020-09-10 09:49

　　 第一部分高效液相激光诱导荧光法与荧光法测定克拉维酸钾中黄曲霉毒素目的:研究建立高效液相激光诱导荧光法(HPLC-LIF)检测克拉维酸钾中黄曲霉毒素,并与传统的高效液相荧光法(HPLC-FD)作比较,为来自发酵工艺的药品中残留黄曲霉毒素检测提供一种更加灵敏的检测方法,保证药品安全。方法:精密称取5 g样品,加入1 g氯化钠与25 mL甲醇-水(50:50,V/V),剧烈振荡10 min,过滤,收集滤液。精密量取滤液20 mL于50 mL容量瓶中,用水稀释并定容至刻度。精密取25 mL过免疫亲和柱净化后,取20μL进样分析。结果:HPLC-FD法4种黄曲霉毒素(AFB_1、AFB_2、AFG_1、AFG_2)的检测限分别为0.5、0.15、0.5、0.15 ng/mL,HPLC-LIF法4种黄曲霉毒素的检测限分别为0.08、0.024、0.08、0.024 ng/mL。结论:在不改变样品前处理的情况下,HPLC-LIF法相比于HPLC-FD法将黄曲霉毒素的检测灵敏度提高了一个数量级,为保证用药安全提供了更加灵敏可靠的手段。第二部分氧化石墨烯镀层搅拌棒吸附萃取用于豆浆中黄曲霉毒素的检测目的:研究一种氧化石墨烯镀层搅拌棒吸附萃取前处理方法,结合HPLC-LIF用于豆浆中黄曲霉毒素的检测,为食品中黄曲霉毒素的检测提供一种简便,灵敏度高的分析方法。方法:首先将氧化石墨烯镀层的搅拌棒置于豆浆供试品溶液中,搅拌萃取40 min,然后取出氧化石墨烯镀层搅拌棒,在1.5 mL甲醇溶液中解吸附10 min。解吸附液用氮气吹干,100μL流动相复溶。取20μL进HPLC-LIF分析。结果:黄曲霉毒素检测限为2.4-8.0 pg/mL,定量限为7.5-25 pg/mL。回收率为80.5%-102.3%。结论:该前处理过程仅需两步,即将氧化石墨烯镀层的搅拌棒放于供试品溶液中萃取目标分析物,然后取出该搅拌棒于甲醇中解吸附,操作简便,灵敏度高,适合于豆浆中痕量黄曲霉毒素的分析检测。第三部分氧化石墨烯分散固相微萃取用于鸡肝中赭曲霉毒素A的检测目的:研究建立一种基于氧化石墨烯分散固相微萃取的样品前处理技术,纯化富集鸡肝样品中赭曲霉毒素A,为肝脏样品中赭曲霉毒素A的检测提供一种简便、成本低、灵敏度高的前处理方法。方法:鸡肝样品在经过适当的样品前处理后,加入氧化石墨烯溶液涡旋萃取5 min,离心取氧化石墨烯固体,用1 mL甲醇解吸附两次,解吸附液用氮气吹干,100μL流动相复溶。取20μL进HPLC-FD分析。结果:赭曲霉毒素A在0.05-2 ng/mL线性相关性良好,R~2=0.9962。检测限可达0.04μg/kg,回收率在84.1%-103.9%,RSD小于3.0%。利用该方法共分析了5批鸡肝样品,其中两批存在赭曲霉毒素A,含量分别为1μg/kg和4.3μg/kg。结论:该方法能够有效去除鸡肝样品中其它杂质的干扰,操作简便,分析成本低,灵敏度高,为鸡肝样品以及其它生物基质中赭曲霉毒素A的分析提供了一种可借鉴的方法。
【学位单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R927.1;R155.5
【部分图文】：

15LC-LIF 黄曲霉毒素对照品（A）、克拉维酸钾样品（B拉维酸钾样品（C）色谱图1 HPLC-LIF chromatograms of aflatoxins standard (A), pclavulanate sample (B) and sample spiked with aflatoxins

16PLC-FD 黄曲霉毒素对照品（A）、克拉维酸钾样品（B）和拉维酸钾样品（C）的色谱图g. 2 HPLC-FD chromatograms of aflatoxins standard (A), potassclavulanate sample (B) and sample spiked with aflatoxins (C)

真实样品测定图

【参考文献】

相关期刊论文 前8条

1 张琼;冉丛聪;陈丹;李s鷏

本文编号：2815680