章鱼内脏中有效成分的综合利用及活性研究

发布时间：2017-04-04 15:28

  本文关键词：章鱼内脏中有效成分的综合利用及活性研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：本文以章鱼内脏为主要的研究对象,研究了牛磺酸及脂肪酸的综合提取工艺。并在得到高纯度天然牛磺酸的基础上,探讨了天然牛磺酸与合成牛磺酸对小鼠肠道菌群的作用,以期为牛磺酸的推广应用提供理论基础和实验依据。主要研究结果包括:1)采用分光光度法测定章鱼内脏中牛磺酸含量,对影响检测结果的显色剂用量、显色时间和显色温度三个因素进行优化,得出最佳检测条件为:显色剂用量1.5 mL,显色温度100℃,显色时间15 min。以牛磺酸提取率为指标,研究了水提法提取牛磺酸中料液比、提取时间、提取温度和提取pH四个因素对提取效率的影响。在单因素试验基础上,通过响应面试验确定了最佳的提取工艺条件:料液比1:8,提取温度72℃,提取时间2.8h,提取pH5.3,在最优工艺条件下得到牛磺酸的提取率为2.37mg/g。2)以脂肪酸提取率为指标,研究了五种常用提取试剂对脂肪酸提取效果的影响,确定了乙酸乙酯为最佳提取剂,并探讨了料液比、提取温度、提取时间对章鱼内脏中脂肪酸提取效果的影响。先通过单因素试验,再通过响应面分析法进行优化,得出最佳提取工艺条件为:料液比1:7、提取温度54℃、提取时间2 h,该条件下所得脂肪酸的提取率为45.33%。然后通过气相色谱法分析了脂肪酸的组分,结果得出不饱和脂肪酸的含量占脂肪酸总含量的63.54%,其中含量最大的两种不饱和脂肪酸是EPA和DHA,含量之和为40.48%。3)以高纯度天然牛磺酸和合成牛磺酸为材料,以口服方式给药BALB/C小鼠,以生理盐水为对照,收集牛磺酸组和对照组小鼠粪便,采用宏基因组技术分析粪便样品中优势菌群的结构变化,探讨牛磺酸对肠道微生态的影响。结果表明,两种牛磺酸的摄入均可改变BALB/C小鼠肠道菌群结构,具体表现在两种牛磺酸可引起小鼠粪便中螺旋杆菌数量减少,且天然牛磺酸降低螺旋杆菌丰度的幅度大于合成牛磺酸。并通过对各种生化指标的测定,发现天然牛磺酸对于短链脂肪酸的生成具有促进作用,且可以降低机体的内毒素,而合成牛磺酸在这方面的作用不明显;此外天然牛磺酸和合成牛磺酸均具有提高小鼠体内SOD活力的作用。
【关键词】：牛磺酸 脂肪酸 提取 肠道菌群 宏基因组
【学位授予单位】：浙江工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R914
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-12
• 第一章 绪论12-24
• 1.1 章鱼简介12
• 1.2 章鱼内脏利用现状12-13
• 1.3 牛磺酸的研究概况13-17
• 1.3.1 牛磺酸的简介13
• 1.3.2 牛磺酸的生理功能13-14
• 1.3.3 牛磺酸在国内外的应用14-15
• 1.3.4 牛磺酸提取技术的研究进展15-16
• 1.3.4.1 水提法15
• 1.3.4.2 乙醇提取法15-16
• 1.3.4.3 酶解法16
• 1.3.5 牛磺酸的检测技术的研究进展16-17
• 1.4 脂肪酸的研究概况17-19
• 1.4.1 脂肪酸的功能与作用17-18
• 1.4.2 脂肪酸提取技术的研究进展18-19
• 1.5 肠道微生态与健康研究概况19-22
• 1.5.1 肠道菌群及肠道微生态平衡20
• 1.5.2 肠道菌群与疾病20-22
• 1.5.2.1 肠道菌群与营养不良20-21
• 1.5.2.2 肠道菌群与心脑血管疾病21
• 1.5.2.3 肠道菌群与糖尿病21
• 1.5.2.4 肠道菌群与肥胖21-22
• 1.5.2.5 肠道菌群与炎症性肠病22
• 1.6 立题目的与意义及研究内容22-24
• 1.6.1 立题目的与意义22-23
• 1.6.2 研究内容23-24
• 第二章 章鱼内脏中牛磺酸的提取分离与工艺优化24-41
• 2.1 引言24
• 2.2 实验材料与仪器24-25
• 2.2.1 实验材料24
• 2.2.2 实验仪器24-25
• 2.3 实验方法25-29
• 2.3.1 牛磺酸提取分离的工艺流程及操作方法25-26
• 2.3.1.1 工艺流程25
• 2.3.1.2 牛磺酸提取分离的操作步骤25-26
• 2.3.2 牛磺酸的检测方法26-27
• 2.3.2.1 牛磺酸的定性检验26
• 2.3.2.2 牛磺酸的定量测定26-27
• 2.3.3 牛磺酸最佳检测方法的优化27
• 2.3.3.1 测定波长的选择27
• 2.3.3.2 显色剂用量的选择27
• 2.3.3.3 显色温度的选择27
• 2.3.3.4 显色时间的选择27
• 2.3.4 加标回收实验27
• 2.3.5 牛磺酸提取的单因素试验设计27-28
• 2.3.5.1 料液比对牛磺酸提取率的影响27-28
• 2.3.5.2 提取时间对牛磺酸提取率的影响28
• 2.3.5.3 pH对牛磺酸提取率的影响28
• 2.3.5.4 提取温度对牛磺酸提取率的影响28
• 2.3.6 牛磺酸提取的响应面试验设计28-29
• 2.3.7 牛磺酸最佳提取工艺的验证试验29
• 2.4 实验结果与分析29-40
• 2.4.1 牛磺酸薄层色谱分析29
• 2.4.2 牛磺酸含量测定方法的优化29-31
• 2.4.2.1 测定波长的选择29-30
• 2.4.2.2 显色剂用量的选择30
• 2.4.2.3 显色温度的选择30-31
• 2.4.2.4 显色时间的选择31
• 2.4.3 牛磺酸标准曲线的绘制31-32
• 2.4.4 加标回收实验32
• 2.4.5 牛磺酸提取的单因素试验32-34
• 2.4.5.1 料液比对牛磺酸提取率的影响32-33
• 2.4.5.2 提取时间对牛磺酸提取率的影响33
• 2.4.5.3 p H对牛磺酸提取率的影响33-34
• 2.4.5.4 提取温度对牛磺酸提取率的影响34
• 2.4.6 牛磺酸提取的响应面试验34-39
• 2.4.6.1 响应面分析36-39
• 2.4.7 牛磺酸最佳提取条件的验证试验39-40
• 2.5 本章小结40-41
• 第三章 章鱼内脏提牛磺酸残渣中脂肪酸的提取工艺研究41-51
• 3.1 引言41
• 3.2 实验材料仪器41-42
• 3.2.1 实验材料41
• 3.2.2 实验仪器41-42
• 3.3 实验方法42-44
• 3.3.1 脂肪酸的提取方法42
• 3.3.2 脂肪酸提取剂的选择42
• 3.3.3 脂肪酸提取的单因素试验设计42-43
• 3.3.3.1 料液比对脂肪酸提取效果的影响42
• 3.3.3.2 提取温度对脂肪酸提取效果的影响42
• 3.3.3.3 提取时间对脂肪酸提取效果的影响42-43
• 3.3.4 脂肪酸提取的响应面试验设计43
• 3.3.5 脂肪酸最佳提取工艺的验证试验43
• 3.3.6 脂肪酸成分的分析43-44
• 3.4 实验结果与分析44-50
• 3.4.1 不同溶剂对提取效果的影响44
• 3.4.2 脂肪酸提取单因素试验44-45
• 3.4.2.1 料液比对脂肪酸提取效果的影响44
• 3.4.2.2 提取温度对脂肪酸提取效果的影响44-45
• 3.4.2.3 提取时间对脂肪酸提取效果的影响45
• 3.4.3 脂肪酸提取的响应面试验45-48
• 3.4.3.1 响应面分析47-48
• 3.4.4 脂肪酸最佳提取条件的验证试验48-49
• 3.4.5 脂肪酸成分分析49-50
• 3.5 本章小结50-51
• 第四章 牛磺酸对小鼠肠道菌群的影响51-78
• 4.1 引言51-52
• 4.2 实验材料和仪器52
• 4.2.1 实验材料52
• 4.2.2 实验仪器52
• 4.3 实验方法52-57
• 4.3.1 小鼠的处理及样品收集52-53
• 4.3.2 肠道微生物总DNA的提取53-54
• 4.3.3 宏基因组DNA Solexa测序及数据预处理54
• 4.3.4 去除嵌合体及靶区域外序列54
• 4.3.5 肠道菌群结构成分的生物学分析54-55
• 4.3.6 小鼠粪便中短链脂肪酸的测定55
• 4.3.7 小鼠血清中脂多糖的测定55-56
• 4.3.8 小鼠血清及肝脏中SOD含量的测定56-57
• 4.3.8.1 血清中SOD的测定56
• 4.3.8.2 肝脏中SOD的测定56-57
• 4.4 实验结果57-76
• 4.4.1 牛磺酸对小鼠健康的影响57-58
• 4.4.2 测序结果及数据处理58-59
• 4.4.3 牛磺酸组与正常对照组的菌群结构分析59-71
• 4.4.3.1 牛磺酸组与对照组肠道菌群门水平的分布59-61
• 4.4.3.2 牛磺酸组与对照组肠道菌群纲水平的分布61-63
• 4.4.3.3 牛磺酸组与对照组肠道菌群目水平的分布63-66
• 4.4.3.4 牛磺酸组与对照组肠道菌群科水平的分布66-69
• 4.4.3.5 牛磺酸组与对照组肠道菌群属水平的分布69-70
• 4.4.3.6 牛磺酸组与对照组肠道菌群种水平的分布70-71
• 4.4.4 牛磺酸组与正常对照组的菌群多样性分析71-72
• 4.4.5 牛磺酸组与正常对照组的菌群Classifier分类图分析72
• 4.4.6 短链脂肪酸的测定结果72-73
• 4.4.7 脂多糖含量的测定结果73-74
• 4.4.8 SOD含量的测定结果74-76
• 4.4.8.1 血清中SOD含量的测定结果74-75
• 4.4.8.2 肝脏中SOD含量的测定结果75-76
• 4.5 本章小结76-78
• 第五章 结论与展望78-80
• 参考文献80-88
• 附图88-89
• 致谢89-90
• 攻读学位期间参加的科研项目和成果90

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9 王亚霓;牛磺酸的心脏保护作用及机制研究[D];天津医科大学;2014年

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