积雪草苷纳米乳及其凝胶透皮给药的体内外研究

发布时间：2020-11-22 00:27

　　 第一部分积雪草苷纳米乳的处方前研究目的:建立高效液相(HPLC)测定积雪草苷(Asiaticoside,ASI)含量的方法;筛选对积雪草苷溶解度高的油、表面活性剂和助表面活性剂;建立积雪草苷纳米乳(Asiaticoside nanoemulsions,ASI-NEs)包封率及溶解度的测定方法。方法:1.建立HPLC法测定ASI的含量,并进行精密度、重复性、稳定性等方法学考察。2.采用摇瓶-HPLC法测定ASI的各油水中分配比,并测定其在油、表面活性剂和助表面活性剂中的平衡溶解度。3.采用透析法测定了ASI-NEs的包封率(Entrapment efficiency,EE)。4.采用高速离心法测定ASI-NEs的溶解度。结果:1.建立了HPLC测定ASI含量的方法,方法学考察符合实验要求,可用于包封率的计算。2.初步筛选出对积雪草苷溶解性较高的油、表面活性剂和助表面活性剂,分别为:单亚油酸甘油酯、蓖麻油、OA;RH-40、Labrasol;Transcutol CG、Transcutol P、PEG-400。3.采用透析法可有效分离游离ASI和ASI-NEs,确定透析平衡时间为3 h,考察了ASI-NEs的包封率。4.采用高速离心法可准确测定ASI-NEs的溶解度。小结:采用HPLC测定ASI含量、透析法考察ASI-NEs包封率以及高速离心法测定ASI-NEs溶解度的方法均符合实验要求,为后期处方筛选和工艺研究奠定了基础。第二部分积雪草苷纳米乳及其凝胶的制备和纳米乳理化性质考察目的:确定ASI-NEs的最优制备工艺与处方,确定积雪草苷纳米乳凝胶(Asiaticoside nanoemulsions-based gels,ASI-NBGs)的制备方法,考察ASI-NEs的理化性质。方法:1.采用相容性实验,初步筛选油、表面活性剂和助表面活性剂。并通过绘制伪三元相图,以成乳区域面积大小为标准,对各相作进一步筛选,以确定各相种类。2.采用单因素实验,以包封率为评价指标,确定ASI-NEs的最佳制备工艺。3.通过单纯性网格设计(Simplex lattice design,SLD)优化处方,以溶解度和包封率为评价指标,分别做多元模型拟合,得出拟合方程,并根据拟合方程绘制等高线图和效应面图,得到理论ASI-NEs的最优处方,对其进行验证,确定最优处方。4.对ASI-NEs的最优处方进行理化性质考察。选择卡波姆940(P940)作凝胶基质,将P940置于ASI-NEs中溶胀24 h,三乙醇胺调节pH(7.0),制得ASI-NBGs。结果:1.通过相容性实验和伪三元相图的绘制确定了ASI-NEs处方的油、表面活性剂和助表面活性剂成分,分别为单亚油酸甘油酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油40(Cremophor RH 40,RH 40)、二乙二醇单乙醚。2.通过对ASI-NEs制备工艺的单因素考察,确定最佳制备工艺为:转速700 rpm·min~(-1),温度37°C,平衡时间50 min。3.采用SLD法优化处方,得到最佳处方:单亚油酸甘油酯、RH40、二乙二醇单乙醚、水分别为5%、15%、26.3%、53.7%。溶解度和包封率实测值与预测值偏差分别为4.55%、3.69%。最优处方的溶解度为13.97 mg·g~(-1),包封率为90.29%。4.ASI-NEs是O/W型纳米乳,外观澄清透明,pH值为6.8,平均粒径为132±5.84 nm,多分散指数(PDI)为0.2211,具有较好的稳定性,高速离心不分层。制得ASI-NBGs,其外观透明,无结块。小结:成功制备了ASI-NEs和ASI-NBGs,该制剂均具有良好的外观及理化性质。第三部分积雪草苷纳米乳及其凝胶的体外透皮特性研究目的:考察ASI-NEs和ASI-NBGs的体外透皮特性。方法:制备ASI-NEs和ASI-NBGs,采用改良的Franz扩散池,对ASI-NEs、ASI-NBGs进行透皮特性考察。并与市售软膏、普通凝胶、添加促透剂凝胶进行透皮比较,绘制累积释放曲线,计算12 h皮下滞留量,采用滞留时间法评价各积雪草苷透皮制剂的体外透皮特性。结果:ASI-NEs、ASI-NBGs与添加促透剂凝胶相比,前两者透皮速率更快,明显强于促透剂组,其差异具有统计学意义(P0.01);经皮给药12 h后,ASI-NEs和ASI-NBGs单位面积累积渗透量分别是3504.30±180.93μg·cm~(-2)和1187.40±128.88μg·cm~(-2),是市售软膏对照组的6.57和2.23倍,皮肤滞留量分别是159.48±7.47μg·cm~(-2)和120.53±5.71μg·cm~(-2),是市售软膏对照组的5.93和4.48倍,差异具有统计学意义(P0.01)。小结:制备的ASI-NEs和ASI-NBGs具有良好的体外透皮特性。第四部分积雪草苷纳米乳及其凝胶的皮肤药动学研究目的:考察ASI-NEs和ASI-NBGs的皮肤药动学特性。方法:本研究采用在体给药分时取样法,以小鼠为研究对象,比较ASI-NEs、ASI-NBGs和市售软膏的皮肤药动学行为。结果:使用ASI-NEs、ASI-NBGs后药物达峰时间均为6 h,使用市售软膏的达峰时间为8 h;ASI-NEs、ASI-NBGs、市售软膏的药时曲线下面积(AUC _(0-∞))分别为6227.85、4994.90、2321.36μg·h·g~(-1),即ASI-NEs和ASI-NBGs组分别是市售软膏组的2.68倍和2.15倍。研究表明纳米乳及纳米乳凝胶作为积雪草苷透皮给药载体,药物在皮肤中能较快达到峰值,在较长时间内保持稳定释放,使皮下药物滞留增多且保持在一个相对恒定的水平,且具有较高的生物利用度。小结:ASI-NEs和ASI-NBGs具有较高的生物利用度,适合开发成局部外用制剂。第五部分积雪草苷纳米乳及其凝胶的皮肤刺激性和透皮机制研究目的:考察ASI-NEs、ASI-NBGs的皮肤刺激性和透皮机制。方法:1.采用新西兰白兔为动物模型,通过考察ASI-NEs、ASI-NBGs单次和多次给药对其正常和破损皮肤的影响,研究ASI-NEs、ASI-NBGs的皮肤刺激性。2.通过HE染色法考察家兔局部给药对皮肤微观结构的影响,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)可视化研究药物的分布及渗透行为,进而研究ASI-NEs、ASI-NBGs的透皮机制。结果:1.ASI-NEs、ASI-NBGs皮肤刺激性试验表明:单次给药后,ASI-NEs、ASI-NBGs对正常皮肤和破损皮肤均无刺激性;多次给药后,ASI-NBGs对正常皮肤无刺激性,ASI-NEs对正常皮肤有轻度刺激性,ASI-NEs、ASI-NBGs对破损皮肤均有轻度刺激性,个别表现出具有勉强可见的红斑,且一天后可完全自行消退。2.HE染色和CLSM研究表明ASI-NEs和ASI-NBGs的透皮机制主要是通过作用于皮肤角质层微观结构并借助皮肤附属器途径,使药物透过皮肤发挥治疗作用。小结:ASI-NEs和ASI-NBGs的透皮机制主要是通过作用于皮肤角质层微观结构并借助皮肤附属器途径,使药物透过皮肤发挥治疗作用。ASI-NBGs是一种安全的皮肤局部用制剂,但应避免用于破损皮肤。结论:本研究成功制备了ASI-NEs和ASI-NBGs,制备工艺简单,重现性好。ASI-NEs和ASI-NBGs具有良好的透皮特性和较高的生物利用度。ASI-NBGs是一种安全的皮肤局部用制剂,但应避免用于破损皮肤。
【学位单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R94
【部分图文】：

side）是从伞形科植物积萜类化合物[1,2]，研究表、抗肿瘤、抗纤维化、神等作用[2,3]。目前临床上主瘩和硬皮病等，且大量的痕疗效确切[4]。于成纤维细胞、胶原蛋白F）和细胞信号传导（Sm胞）等多方面的作用机制降低 TGF-β1mRNA 表达达明显减少，达到促进Ⅰ型 Smad 通路，抑制瘢痕的磷酸化 Smad2 的含量，增。

图 1 积雪草苷在不同油相中的平衡溶解度Fig. 1 Solubility of asiaticoside in different oils草苷在表面活性剂、助表面活性剂中的平衡溶ility of asiaticoside in different surfactants and co s

202 积雪草苷在表面活性剂、助表面活性剂中的平衡溶解度olubility of asiaticoside in different surfactants and co surfa图 3 积雪草苷紫外扫描图Fig. 3 The UV spectrum of asiaticoside
【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 石开云;余清宝;;酮洛芬药理研究进展[J];中国药业;2015年23期

2 周忠志;熊武;黄新灵;杨双喜;向聪莲;陈丽;;积雪草苷对兔耳增生性瘢痕组织中胶原纤维及TGF-β1表达的影响[J];中国美容医学;2015年21期

3 颜学军;陈光宇;钟鸣;谢名君;康店如;何群;;湿疹纳米乳中丹皮酚包封率的测定[J];湖南中医药大学学报;2015年08期

4 李玲珺;马鹏程;魏峻;钱坤;陶蕾;;不同处方工艺的复方醋酸地塞米松乳膏的裸鼠皮肤药动学行为比较[J];中国药学杂志;2015年14期

5 李亚楠;李志辉;霍丽妮;韦建华;卢汝梅;;积雪草化学成分的研究[J];广西中医药;2015年02期

6 孙林芳;郑广娟;冯兵;朱莹;贺嵩敏;刘映;牟洁;;白术挥发油微乳的制备[J];中成药;2015年04期

7 顾清;尤本明;杨帝顺;潘勇华;舒薇;刘继勇;;基于纳米乳-凝胶技术的雷公藤多苷纳米载体的制备及药效学研究[J];中国中药杂志;2015年01期

8 包玉胜;;透皮给药系统的研究进展[J];山东化工;2014年06期

9 彭琴;陈力;;积雪草苷对增生性瘢痕作用机制研究进展[J];辽宁中医药大学学报;2014年03期

10 高玉红;杨东来;徐美佳;王迪;;纳米乳的研究进展[J];饲料博览;2014年03期

相关博士学位论文 前2条

1 李奥;多功能超声造影剂的制备及显像实验研究[D];重庆医科大学;2012年

2 王晓黎;纳米乳营养素透皮传递系统的研究[D];第二军医大学;2010年

相关硕士学位论文 前10条

1 蔡晓瑶;曲酸脂质体、囊泡的制备及体外透皮特性研究[D];河北医科大学;2017年

2 蒋俏丽;丹参多成分复合微乳凝胶贴膏的制备与透皮特性研究[D];北京中医药大学;2016年

3 赵莉莉;罗哌卡因微乳及其凝胶剂透皮给药的研究[D];山东大学;2016年

4 任翔;积雪草苷修饰脂质体的制备及其大鼠体内药动学研究[D];河北医科大学;2016年

5 张向果;盐酸维拉帕米微乳凝胶经皮给药系统的研究[D];郑州大学;2014年

6 李娅男;D-柠檬烯纳米乳的制备与应用研究[D];北京化工大学;2013年

7 陈孝储;苯妥英钠隐形脂质体的制备及体内外研究[D];河北医科大学;2013年

8 何博赛;双嘧达莫口服微乳制剂的研究[D];沈阳药科大学;2009年

9 潘岳峰;去氧氟尿苷纳米乳制备工艺的研究[D];沈阳药科大学;2009年

10 安红丽;原花青素纳米乳的研制[D];西北农林科技大学;2007年

本文编号：2893831