阿霉素对模式生物斑马鱼中abcb4基因表达的影响

发布时间：2020-12-05 10:50

　　目的选择斑马鱼作为实验对象,研究阿霉素(doxorubicin,DOX)对其abcb4基因表达的影响,进一步了解abcb4基因在斑马鱼多药耐药机制中可能的作用。方法分别以2mL/L二甲基亚砜(DMSO),10μmol/L DOX及含2mL/L DMSO的10μmol/L DOX对斑马鱼胚胎进行药物处理,另以Eggwater处理的胚胎作为对照组。将正常发育的4~16个细胞期斑马鱼胚胎,随机分入以上各组中,药物处理至120hpf。收集药物处理下的斑马鱼不同时期胚胎运用实时荧光定量PCR和胚胎原位杂交技术,检测abcb4基因在斑马鱼中的表达变化情况。结果相较于对照组,药物处理的斑马鱼胚胎abcb4基因mRNA表达水平升高(P<0.05),而abcb5基因mRNA表达情况则无明显变化。通过斑马鱼胚胎原位杂交,均在斑马鱼120hpf胚胎小肠部位发现有abcb4基因阳性杂交信号,且药物处理的斑马鱼胚胎在脑及心脏部位发现abcb4基因阳性杂交信号。结论 DOX能诱导斑马鱼胚胎abcb4基因表达水平增高,对阐明abcb4基因在斑马鱼多药耐药产生机制中的作用具有重要意义。 

【文章来源】：四川大学学报(医学版). 2016年01期 第7-13页 北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验动物、菌株及质粒
    1.2 试剂及酶类
    1.3 胚胎收集
    1.4 阿霉素药物处理
    1.5 abcb4和abcb5基因表达测定
    1.6 斑马鱼abcb4基因片段克隆
    1.7 斑马鱼abcb4基因探针重组质粒构建
    1.8 地高辛标记的abcb4基因探针制备
    1.9 斑马鱼原位杂交
    1.10 统计学方法
2 结果
    2.1 DOX对斑马鱼胚胎abcb4、abcb5基因的影响
    2.2 斑马鱼abcb4基因RT-PCR结果
    2.3 斑马鱼abcb4基因探针重组质粒酶切和测序鉴定结果
    2.4 斑马鱼原位杂交结果
3 讨论



本文编号：2899336