适配体特异性修饰DNA纳米治疗系统抗肿瘤作用研究
发布时间：2020-12-05 16:09
研究目的:用从噬菌体M13mp18中提取出来的长链单链DNA和相应的短链DNA制备出含有多个可修饰位点的DNA纳米管,通过修饰适配体C2NP,使得构建的DNA纳米管可以靶向淋巴瘤细胞,提高所载化学药阿霉素的抗肿瘤作用,降低毒副作用。通过调整C2NP的数量和间距,使其更好地发挥生物治疗作用,载药后可同时发挥C2NP的生物治疗作用和阿霉素的化学治疗作用,提高抗肿瘤效果。研究方法:用PCR仪将从噬菌体中提取出的两种M13mp18单链DNA与相应的短链DNA制备成螺旋的DNA纳米管和直形的DNA纳米管,通过延长链的方式将核酸适配体C2NP修饰到DNA纳米管结构上,制备出由不同数量和间距的C2NP修饰的可靶向淋巴瘤的DNA纳米管。通过琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜和原子力显微镜等对DNA纳米管结构进行表征;DNA纳米管的载药量和体外释放用酶标仪测阿霉素的荧光强度来考察;琼脂糖凝胶电泳表征DNA纳米管在含10%胎牛血清培养基中的稳定性;载体材料和缓冲盐对人间变性大细胞淋巴瘤细胞K299的毒性、DNA纳米管载药系统对K299细胞的生物作用以及生物作用和化疗联合作用等采用CCK8法进行考察;用流式细胞...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
阿霉素的结构式Fig.1MolecularstructureofDoxorubicin
治疗性寡核苷酸已显示出治疗许多重大疾病的巨大潜力何将治疗性寡核苷酸有效递送至体内靶部位仍然是需要解决的主要问个新兴领域，DNA 纳米技术应用于许多方面，包括生物传感和药物靶向治疗[42, 43]、肿瘤诊断[44]、纳米芯片[45, 46]、生物分子自组装[47-49]纸术（DNA Origami）概念最早是由 Nadrian Seeman[36]在 20 世纪 8。自此，DNA 纳米技术成为了该研究领域的一大热点，并在接下来内得到迅猛发展。迄今为止，科学家们已经设计和制造了具有不同结构的多种 DNA 纳米结构和纳米器件[50]。2006 年，Rothemund[37]等13mp18 噬菌体的单链 DNA 作为 scaffold 链，用一组设计好的短链链，通过碱基互补配对自组装成预先设计好的 2D 结构，这一研究实 的一维结构研究向二维结构研究的转变，为 3D DNA 折纸[51-53]的构础。Zhao YX 等[54]设计并制备了 DNA 纳米管结构（图 2 h），将化学入其中，使得阿霉素的释放变得缓慢。Church 等[55]设计了 DNA 六边并装载抗体，通过适配体调控使抗体药物在体内特定部位释放。这明 DNA 可作为药物递送载体将药物智能化地递送至靶部位。
前言过研究不同数量和间距的 C2NP 修饰的 DNA 纳米管的体外抗肿瘤探讨适配体的数量和间距对其发挥生物作用的影响。由于 CD30 的的线性距离为 5.7 nm，本课题设计了修饰有 15 个 C2NP，间距为NT-15Apt-3）和 6 nm（T-DNT-15Apt-6）的 DNA 纳米管载体和 30 个 C 3 nm（T-DNT-30Apt-3）和 6 nm（T-DNT-30Apt-6）的 DNA 纳米管4 所示。由于 C2NP 是通过诱导 CD30 三聚体化而引起细胞凋亡，所 C2NP 的分布具有合适的距离时才会更好地发挥作用，本研究对所行体外考察来验证推测是否合理。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2017年中国最新癌症数据[J]. 本刊编辑部. 中国肿瘤临床与康复. 2017(05)
[2]抗肿瘤药物纳米给药系统研究进展[J]. 罗小林,易丹丹. 医药导报. 2015(02)
[3]淋巴瘤实验动物模型构建的研究与应用[J]. 熊豫麟,张远旭,黄云超,杨世华. 广东医学. 2014(09)
[4]肿瘤靶向纳米制剂研究进展[J]. 魏丽莎,季艳霞,康振桥,郑爱萍. 国际药学研究杂志. 2014(01)
[5]淋巴瘤动物模型研究进展[J]. 刘芳,赵彤. 中国实验血液学杂志. 2009(05)
博士论文
[1]胰腺癌易感基因LINC00673的发现及其功能研究[D]. 郑健.北京协和医学院 2015
硕士论文
[1]miR-126-3p调控猪卵巢颗粒细胞功能的研究[D]. 邓熙.华南农业大学 2016
本文编号：2899724
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
阿霉素的结构式Fig.1MolecularstructureofDoxorubicin
治疗性寡核苷酸已显示出治疗许多重大疾病的巨大潜力何将治疗性寡核苷酸有效递送至体内靶部位仍然是需要解决的主要问个新兴领域，DNA 纳米技术应用于许多方面，包括生物传感和药物靶向治疗[42, 43]、肿瘤诊断[44]、纳米芯片[45, 46]、生物分子自组装[47-49]纸术（DNA Origami）概念最早是由 Nadrian Seeman[36]在 20 世纪 8。自此，DNA 纳米技术成为了该研究领域的一大热点，并在接下来内得到迅猛发展。迄今为止，科学家们已经设计和制造了具有不同结构的多种 DNA 纳米结构和纳米器件[50]。2006 年，Rothemund[37]等13mp18 噬菌体的单链 DNA 作为 scaffold 链，用一组设计好的短链链，通过碱基互补配对自组装成预先设计好的 2D 结构，这一研究实 的一维结构研究向二维结构研究的转变，为 3D DNA 折纸[51-53]的构础。Zhao YX 等[54]设计并制备了 DNA 纳米管结构（图 2 h），将化学入其中，使得阿霉素的释放变得缓慢。Church 等[55]设计了 DNA 六边并装载抗体，通过适配体调控使抗体药物在体内特定部位释放。这明 DNA 可作为药物递送载体将药物智能化地递送至靶部位。
前言过研究不同数量和间距的 C2NP 修饰的 DNA 纳米管的体外抗肿瘤探讨适配体的数量和间距对其发挥生物作用的影响。由于 CD30 的的线性距离为 5.7 nm，本课题设计了修饰有 15 个 C2NP，间距为NT-15Apt-3）和 6 nm（T-DNT-15Apt-6）的 DNA 纳米管载体和 30 个 C 3 nm（T-DNT-30Apt-3）和 6 nm（T-DNT-30Apt-6）的 DNA 纳米管4 所示。由于 C2NP 是通过诱导 CD30 三聚体化而引起细胞凋亡，所 C2NP 的分布具有合适的距离时才会更好地发挥作用，本研究对所行体外考察来验证推测是否合理。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2017年中国最新癌症数据[J]. 本刊编辑部. 中国肿瘤临床与康复. 2017(05)
[2]抗肿瘤药物纳米给药系统研究进展[J]. 罗小林,易丹丹. 医药导报. 2015(02)
[3]淋巴瘤实验动物模型构建的研究与应用[J]. 熊豫麟,张远旭,黄云超,杨世华. 广东医学. 2014(09)
[4]肿瘤靶向纳米制剂研究进展[J]. 魏丽莎,季艳霞,康振桥,郑爱萍. 国际药学研究杂志. 2014(01)
[5]淋巴瘤动物模型研究进展[J]. 刘芳,赵彤. 中国实验血液学杂志. 2009(05)
博士论文
[1]胰腺癌易感基因LINC00673的发现及其功能研究[D]. 郑健.北京协和医学院 2015
硕士论文
[1]miR-126-3p调控猪卵巢颗粒细胞功能的研究[D]. 邓熙.华南农业大学 2016
本文编号：2899724
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/2899724.html
最近更新
教材专著
