膜活性肽Marmelittin的原核表达及抗肿瘤活性研究

发布时间：2020-12-26 02:46

　　目的将膜活性肽Marmelittin与泛素蛋白Ub融合表达并测定其抗肿瘤活性。方法构建pCold-TF-Ub-Marmelittin质粒并转化到BL21（DE3）菌中进行诱导表达。筛选Marmelittin肽的最佳表达条件后并对Marmelittin肽进行纯化。圆二色光谱测定Marmelittin肽的二级结构, CCK-8实验和流式细胞术分析Marmelittin肽抗肿瘤活性及机制。结果 Marmelittin肽在表达菌为1.20 mmol·L^-1异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导培养10 h时表达量最高。圆二色光谱测定Marmelittin肽为α-螺旋结构。CCK-8实验测定Marmelittin肽对宫颈癌细胞株HeLa半数抑制浓度(IC₅₀)为（46.61±1.25）μg·mL^-1。流式细胞术检测表明Marmelittin肽通过诱导凋亡方式杀伤Hela细胞。结论用泛素蛋白Ub为促溶标签成功表达了Marmelittin肽并测定了其抗肿瘤活性,为后续抗肿瘤机制及应用研究提供了一定的基础。 

【文章来源】：中国临床药理学杂志. 2020年22期 北大核心

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

pCold-TF-Ub-Marmelittin质粒PCR鉴定结果

SDS-PAGE分析Marmelittin肽表达

对照组和用药组(25,50,100 μg·mL-1)凋亡率分别为3.32%,24.78%,40.16%和89.81%。与对照组相比,各组均对HeLa细胞产生明显诱导凋亡作用,见图3。讨 论

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2938879