巨噬细胞膜包裹载药PLGA纳米粒的制备及靶向CT26细胞的实验研究

发布时间：2021-01-01 08:40

　　第一部分巨噬细胞膜包裹载药PLGA纳米粒的制备及表征研究目的:提取巨噬细胞膜、制备载HCPT-PLGA纳米粒及巨噬细胞膜包裹载HCPT-PLGA纳米粒（HCPT-MCNP）,并评价其表征。方法:采用低渗裂解结合脂质体挤出仪的机械破坏法破坏细胞结构,差速离心分离保留有完整膜蛋白序列的细胞膜,并采用荧光染色验证提取的是不含细胞核的纯化细胞膜。乳化法制备载HCPT-PLGA纳米粒,提纯的巨噬细胞膜与制备的HCPT-PLGA通过脂质体挤出仪共挤得到HCPT-MCNP。体外评价其形态、粒径、分布、电位、稳定性及药物包封率、载药率、药物释放率等。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS-PAGE）检测MCNP纳米粒上巨噬细胞膜蛋白的保留情况。结果:（1）采用低渗缓冲液结合脂质体挤出仪机械破坏法破坏细胞结构后得到细胞裂解产物,同时包含了细胞膜,细胞核及其他一些细胞亚结构。差速离心法离心一次后提取物中同时可见蓝色的细胞核荧光和橙红色细胞膜荧光,重复离心一次后几乎只有红染的细胞膜而没有蓝染的细胞核。（2）乳化法制备载HCPT-PLGA能得到形态规则,粒径较为均一的负载有HCPT药物的PLGA纳米粒... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

荧光染色后提取细胞膜同时用BCA法定量提取出的细胞膜

蛋白定量标准曲线

华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文标准曲线方程为 y=8.126×10-4x+0.181，R2=0.9981，根据该标准曲线计算提取的细胞膜蛋白定量得到约 1×108细胞能得到的蛋白量为约 0.3 mg。2.PLGA、MCNP 粒径、电位及稳定性制备好的 PLGA 与 MCNP 纳米粒外观为淡蓝色乳光状悬液，半透明，室温下静置稳定，未见明显分层或是沉降现象。动态光散射（DLS）粒度分析仪测量载药 PLGA 与 MCNP 的粒径分布分别如图 1-3 所示，粒径、电位及多分散系数（PDI）如表 1 所示：

【参考文献】：
期刊论文
[1]肿瘤内科治疗模式的研究进展[J]. 张百红,岳红云.  癌症进展. 2018(14)



本文编号：2951287