凋亡抑制蛋白Survivin的降解机制研究

发布时间：2021-01-04 02:29

　　Survivin是凋亡抑制蛋白家族（IAP）中蛋白分子量最小的成员,结构独特,具有抑制细胞凋亡和调节细胞有丝分裂的双重功能。Survivin基因在正常的组织细胞中几乎不表达,但是广泛表达于各种恶性肿瘤中。临床研究表明抑制Survivin蛋白的功能可以在一定程度上抑制肿瘤细胞的生长,同时增强肿瘤细胞对抗肿瘤化疗药物的敏感性,并且与病人的预后息息相关。因此,对Survivin蛋白的降解机制的研究可以为开发新型抗肿瘤药物提供新思路。基于此,首先我们利用CRL E3泛素连接酶的小分子抑制剂MLN4924对多种乳腺癌和肺癌细胞系进行药物处理,发现Survivin蛋白不仅随MLN4924剂量和时间依赖性增加,还会引起半衰期延长;并且通过免疫共沉淀实验,我们发现CRL组成成分中的RING蛋白RBX1和RBX2均与Survivin蛋白具有相互作用,证实Survivin蛋白在细胞内是通过泛素-蛋白酶体途径降解的,并且是CRLE3泛素连接酶的底物。其次,通过免疫共沉淀实验,我们发现CRL组成成分中CUL1蛋白与Survivin蛋白具有相互作用;随后我们进一步检测了CUL1与Survivin蛋白的关系,结果... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１泛素－蛋白酶体途径［３］??－

在哺乳动物中已发现并报道的丨ＡＰ家族成员有８个，分别是ＮＡＩＰ／ＢＩＲＣ１，??ｃＡＩＰｌ／ＢＩＲＣ２，?ｃＡＩＰ２／ＢＩＲＣ３，?ＸＡＩＰ／ＢＩＲＣ４，?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ／ＢＩＲＣ５，?ＢＲＵＣＥ／ＢＩＲＣ６，??ｌｉｖｉｎ／ＢＩＲＣ７和ＩＬＰ２／ＢＩＲＣ８［１（Ｕ１］（图１．２）。ＩＡＰｓ的结构域主要有三个，分别是ＢＩＲ，??ＲＩＮＧ和ＣＡＲＤ结构域。所有的丨ＡＰ家族成员中ＢＩＲ结构域的数目至少有１个，这是??ＩＡＰ抑制细胞调亡所必须的结构域。ＢＩＲ?（ｂａｃｕｌｏｖｉｒａｌｌＡＰｒｅｐｅａｔ）结构域约含７０个??氨基酸，其中有一个保守的半胱氨酸和组氨酸区域（Ｃｘ２Ｃｘ６Ｗｘ３Ｄｘ５Ｈｘ６Ｃ）ｎ２］。ＲＩＮＧ??结构域含有一个锌指样的结构单元，可以与两个锌原子形成配位键ｎ（）］。ＣＡＲＤ??Ｃｃａｓｐａｓｅ?ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ?ｄｏｍａｉｎ）结构域位于ＢＩＲ和ＲＩＮＧ结构域之间，目前只在ｃＡＩＰｌ??和ｃＡＩＰ２中发现此结构域。相关研究表明，ＢＩＲＣ１，?２，?３，?４，?７，?８可以与ｃａｓｐａｓｅ－３，??７，?９结合，从而抑制ｃａｓｐａｓｅｓ的活化；而ＢＩＲＣ５和ＢＩＲＣ６可以直接与ｃａｓｐａｓｅ－３，７发??生相互作用，具有调节细胞分裂素和抑制细胞凋亡的功能［１３］。??Ｓｕｒｖｉｖｉｎ是１ＡＰ家族中蛋白分子量最小的成员

ＩＬＰ２?ＢＩＲＣ８?ＲＪ＼Ｇ?■■??图１．２哺乳动物中１ＡＰ家族成员的结构［１８１??１．３?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ的结构特点与分布??Ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因位于染色体１７ｑ２５上，由３个内含子和４个夕卜显子组成，从结构上??看，氨基末端只含有一个保守的ＢＩＲ结构域，该结构域直接与细胞凋亡效应分子??ｃａｓｐａｓｅｓ相互作用，从而抑制细胞）周亡｜１９１。竣基末端含有一个ａ螺旋结构，没有ＲＩＮＧ??结构域和ＣＡＲＤ结构域｜１９＿２１１。目前已发现并报道了?５个人类Ｓｕｒｖｉｖｉｎ剪接异构体：??Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－２Ｂ，?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－ＡＥｘ?３，?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－３Ｂ，?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－２ａ，?Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－３ａ丨２２］（图?１．３）?〇??其中，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－２Ｂ多了部分外显子，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－ＡＥｘ?３缺失外显子３，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－３Ｂ有５??个外显子，Ｓｕｒｖｉｖｉｎ－２ａ只含两个外显子。所有的Ｓｕｒｖｉｖｉｎ异构体在氨基端都保持同??一性，包括一些ＢＩＲ结构域，但是在羧基端具有一定的差异［２３］。??Ｓｕｒｖｉｖｉｎ主要定位于肿瘤细胞的细胞质和细胞核中［２４１

【参考文献】：
期刊论文
[1]凋亡相关基因survivin在子宫颈癌组织中的表达及其与bcl-2、p53基因表达相关性的初步研究[J]. 王梅,王冰,王晓丽,莫立平,任娟,李明众.  中华妇产科杂志. 2001(09)



本文编号：2955965