基于3D细胞模型的杨梅花色苷纳米脂质体抗氧化机制的研究
发布时间：2021-01-08 12:47
花色苷在自然界广泛分布,具有良好的抗氧化活性,属于高效的天然抗氧化剂,但因其稳定性较差、体内代谢快等原因导致其抗氧化性能不能高效的发挥,制约了花色苷资源的深度研发。纳米脂质体因其特殊的结构以及特有的小尺寸、量子效应等特点,使花色苷被包埋后进入机体后具有更好的稳定性和更高的生物活性等优点。体外自由基氧化损伤模型是基于细胞的细胞内氧化水平研究,能更好地预测物质在体内的抗氧化活性。本实验研究将花色苷制备成花色苷纳米脂质体的最优工艺方案,评价其表征、稳定性和体外抗氧化活性,探究其对Caco-2细胞存活率、活性、凋亡比例、内部结构等的影响。同时在3D和2D细胞培养模型中,通过SOD、GSH、MDA和T-AOC四个指标对花色苷纳米脂质体的抗氧化活性进行了比较,对抗氧化机制进行了初步探究,具体结果如下:（1）花色苷纳米脂质体的最优处方工艺为脂胆比2.87:1mg/mg、旋蒸温度41.41℃、花色苷浓度0.17mg/m L。花色苷纳米脂质体的包封率为70.43%±1.95%,粒径为165.78nm;多分散性指数PDI为0.143;透射电子电镜下花色苷纳米脂质体呈囊泡状结构,粒径在200nm左右;（2）...
【文章来源】：中国计量大学浙江省
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
矢车菊素-3-葡萄糖苷结构
[65]，纳米脂质体的结构图如图1.2所示[66]，其可以天然存在也可以人工的合成。目前，制备纳米脂质体的壁材主要有胆固醇和磷脂，而其中的磷脂则包括天然磷脂、改性磷脂和合成类脂分子。脂质体按其结构可分为：1、单室脂质体；2、多室脂质体。脂质体中的磷脂为双亲性，兼脂溶性和水溶性，能够分别包封不同极性的物质。由天然成分组成的脂质体，拥有排列有序的生物膜磷脂双分子层的结构，又可称为人工制造的生物膜。脂质体在水中分散时，亲水部分会向水相靠近，疏水部分则偏向空气，经过搅动后含有磷脂双分子层的球形脂质体进而形成。磷脂主要是指卵磷脂、肌醇磷脂和脑磷脂等物质，是细胞膜结构的主要成分之一，广泛存在于动物细胞中的生物膜和原生质内。动物体内的磷脂酰胆碱中含有饱和脂肪链，可以增强脂质体膜的稳定性和非渗透性。PC-大豆卵磷脂的功能：1、可以调节生物体细胞膜内成分的比例：磷脂和胆固醇；2、可以增加生物体细胞膜磷脂中不饱和脂肪链比例
图 1. 3 2D 细胞模型与 3D 细胞模型的形态差异[113]Fig 1.3 The morphological difference between 2D and 3D cell culture models.4.3 3D 细胞培养的应用应用 3D 细胞培养模型对细胞进行培养，在天然细胞微环境物质结构基础的同时, 又更好的模拟机体细胞生长的环境，为细胞水平的研究提供了一种确、更真实、更可靠的方法。鉴于 3D 细胞培养模型的优良性能，其已经被于细胞研究以及多种细胞培养研究的各个方面。在肿瘤研究方面，三维培养被认做是理想的肿瘤学体外药物测试模型，其能够再现体内实体瘤中的细信号传导、细胞异质性、细胞外微环境、生长动力学、内部结构特征和基因及耐药性[114;115]。因此，该技术在肿瘤生物学及药物活性筛选领域已成为研点[116]。由于 3D 细胞培养技术可以再现组织细胞的体内生长情况，现在已经在肿学、再生医学、药物筛选、病毒检测等各个领域逐渐应用并正在快速发展中[120]
【参考文献】：
期刊论文
[1]培养板悬滴法三维细胞培养模型建立及细胞活力检测方法比较[J]. 林鹤,王婉秋,焦佳媛,杨昊珅,任利翔,邢立国. 药物评价研究. 2017(08)
[2]分子影像技术在肿瘤细胞凋亡的研究现状及进展[J]. 刘岩,任佳忠,杨国仁. 肿瘤学杂志. 2017(06)
[3]山楂叶多酚的酶法提取及抗氧化活性研究[J]. 陈安徽,巫永华,刘恩岐,陈尚龙,邵颖. 食品科技. 2017(02)
[4]叶黄素纳米脂质体的制备工艺优化及其氧化稳定性[J]. 焦岩,李大婧,刘春泉,肖亚冬. 食品科学. 2017(18)
[5]桑葚的提取及其自由基清除活性研究[J]. 刘茜,唐洁. 食品研究与开发. 2017(03)
[6]配体介导的纳米脂质体作为肿瘤疫苗载体的可行性评价[J]. 李可欣,常莎莎,邸东华,修敬雅. 沈阳药科大学学报. 2017(01)
[7]脂质体在婴儿体外胃肠道消化的膜结构稳定性[J]. 冯炎雯,李娜,徐纪璇,邬琰泽,韩剑众,刘玮琳. 食品科学. 2017(13)
[8]抗肿瘤靶向脂质体的研究进展[J]. 姜雅萌,朱妍妍,赵轶男,甄宇红,张树彪. 生命科学. 2016(09)
[9]丁香精油纳米脂质体的制备及其在不同豆制品中的应用[J]. 林琳,代娅婕,周昌倩,陶贵泽,黎雅婷,崔海英. 中国食品添加剂. 2016(09)
[10]正交设计与响应面优化玄参黄酮提取工艺研究[J]. 索南卓玛,包显云,包锦渊. 分子科学学报. 2016(01)
博士论文
[1]类胡萝卜素脂质体的研究[D]. 谭晨.江南大学 2015
[2]杨梅花色苷对胰岛细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制探讨[D]. 张波.浙江大学 2010
[3]红景天苷纳米脂质体的研制[D]. 范明辉.江南大学 2008
硕士论文
[1]基于2D和3D Caco-2细胞培养研究纳米氧化锌的安全性[D]. 陶淼.中国计量大学 2016
[2]矢车菊素-3-葡萄糖苷对重金属镉、铅致大鼠损伤的的保护机制研究[D]. 蔺怀.沈阳大学 2016
[3]连翘酯苷对鸡胸腺组织中炎症因子及抗氧化的作用[D]. 吴悦.东北农业大学 2013
[4]小分子化合物木脂素VB6通过激活JNK信号通路诱导肿瘤细胞凋亡和自噬的机制研究[D]. 胡会永.浙江大学 2012
本文编号：2964623
【文章来源】：中国计量大学浙江省
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
矢车菊素-3-葡萄糖苷结构
[65]，纳米脂质体的结构图如图1.2所示[66]，其可以天然存在也可以人工的合成。目前，制备纳米脂质体的壁材主要有胆固醇和磷脂，而其中的磷脂则包括天然磷脂、改性磷脂和合成类脂分子。脂质体按其结构可分为：1、单室脂质体；2、多室脂质体。脂质体中的磷脂为双亲性，兼脂溶性和水溶性，能够分别包封不同极性的物质。由天然成分组成的脂质体，拥有排列有序的生物膜磷脂双分子层的结构，又可称为人工制造的生物膜。脂质体在水中分散时，亲水部分会向水相靠近，疏水部分则偏向空气，经过搅动后含有磷脂双分子层的球形脂质体进而形成。磷脂主要是指卵磷脂、肌醇磷脂和脑磷脂等物质，是细胞膜结构的主要成分之一，广泛存在于动物细胞中的生物膜和原生质内。动物体内的磷脂酰胆碱中含有饱和脂肪链，可以增强脂质体膜的稳定性和非渗透性。PC-大豆卵磷脂的功能：1、可以调节生物体细胞膜内成分的比例：磷脂和胆固醇；2、可以增加生物体细胞膜磷脂中不饱和脂肪链比例
图 1. 3 2D 细胞模型与 3D 细胞模型的形态差异[113]Fig 1.3 The morphological difference between 2D and 3D cell culture models.4.3 3D 细胞培养的应用应用 3D 细胞培养模型对细胞进行培养，在天然细胞微环境物质结构基础的同时, 又更好的模拟机体细胞生长的环境，为细胞水平的研究提供了一种确、更真实、更可靠的方法。鉴于 3D 细胞培养模型的优良性能，其已经被于细胞研究以及多种细胞培养研究的各个方面。在肿瘤研究方面，三维培养被认做是理想的肿瘤学体外药物测试模型，其能够再现体内实体瘤中的细信号传导、细胞异质性、细胞外微环境、生长动力学、内部结构特征和基因及耐药性[114;115]。因此，该技术在肿瘤生物学及药物活性筛选领域已成为研点[116]。由于 3D 细胞培养技术可以再现组织细胞的体内生长情况，现在已经在肿学、再生医学、药物筛选、病毒检测等各个领域逐渐应用并正在快速发展中[120]
【参考文献】：
期刊论文
[1]培养板悬滴法三维细胞培养模型建立及细胞活力检测方法比较[J]. 林鹤,王婉秋,焦佳媛,杨昊珅,任利翔,邢立国. 药物评价研究. 2017(08)
[2]分子影像技术在肿瘤细胞凋亡的研究现状及进展[J]. 刘岩,任佳忠,杨国仁. 肿瘤学杂志. 2017(06)
[3]山楂叶多酚的酶法提取及抗氧化活性研究[J]. 陈安徽,巫永华,刘恩岐,陈尚龙,邵颖. 食品科技. 2017(02)
[4]叶黄素纳米脂质体的制备工艺优化及其氧化稳定性[J]. 焦岩,李大婧,刘春泉,肖亚冬. 食品科学. 2017(18)
[5]桑葚的提取及其自由基清除活性研究[J]. 刘茜,唐洁. 食品研究与开发. 2017(03)
[6]配体介导的纳米脂质体作为肿瘤疫苗载体的可行性评价[J]. 李可欣,常莎莎,邸东华,修敬雅. 沈阳药科大学学报. 2017(01)
[7]脂质体在婴儿体外胃肠道消化的膜结构稳定性[J]. 冯炎雯,李娜,徐纪璇,邬琰泽,韩剑众,刘玮琳. 食品科学. 2017(13)
[8]抗肿瘤靶向脂质体的研究进展[J]. 姜雅萌,朱妍妍,赵轶男,甄宇红,张树彪. 生命科学. 2016(09)
[9]丁香精油纳米脂质体的制备及其在不同豆制品中的应用[J]. 林琳,代娅婕,周昌倩,陶贵泽,黎雅婷,崔海英. 中国食品添加剂. 2016(09)
[10]正交设计与响应面优化玄参黄酮提取工艺研究[J]. 索南卓玛,包显云,包锦渊. 分子科学学报. 2016(01)
博士论文
[1]类胡萝卜素脂质体的研究[D]. 谭晨.江南大学 2015
[2]杨梅花色苷对胰岛细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制探讨[D]. 张波.浙江大学 2010
[3]红景天苷纳米脂质体的研制[D]. 范明辉.江南大学 2008
硕士论文
[1]基于2D和3D Caco-2细胞培养研究纳米氧化锌的安全性[D]. 陶淼.中国计量大学 2016
[2]矢车菊素-3-葡萄糖苷对重金属镉、铅致大鼠损伤的的保护机制研究[D]. 蔺怀.沈阳大学 2016
[3]连翘酯苷对鸡胸腺组织中炎症因子及抗氧化的作用[D]. 吴悦.东北农业大学 2013
[4]小分子化合物木脂素VB6通过激活JNK信号通路诱导肿瘤细胞凋亡和自噬的机制研究[D]. 胡会永.浙江大学 2012
本文编号：2964623
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