维生素E及其衍生物对肠道屏障结构蛋白的保护作用研究
发布时间：2021-01-19 11:57
目的:临床治疗中许多疾病的产生和发展都与肠黏膜屏障功能有关,肠黏膜上皮细胞之间的连接方式是主要紧密连接,对维持肠黏膜屏障机械结构完整和正常功能发挥起重要作用。肠道黏膜屏障机理十分复杂,主要由四个部分化学屏障,生物屏障,机械屏障,及免疫屏障组成。肠上皮细胞与细胞间形成的完整连接构成了机械屏障的结构基础。研究发现肠道机械屏障在各种类型的炎症性肠道疾病的发病的过程和原因都有关键的作用,如果炎症反应得到控制同时肠道屏障损伤也会有所缓解,最终会使得肠道通透性的改善。本试验旨在探讨维生素E及其衍生物对紧密连接中结构蛋白以及脂多糖（LPS）诱导的损伤后紧密连接中结构蛋白的影响。方法:本实验选用猪小肠上皮细胞系ipec-j2细胞系和结构与生化特点类似于人类小肠上皮细胞的caco2细胞系,用不同浓度的维生素E处理正常组细胞和LPS组细胞,进行体外实验。本试验探讨了维生素E衍生物Tocofersolan对ipec-j2细胞系中紧密连接蛋白的影响以及衍生物与维生素的作用的对比。同时还研究了,用断奶仔猪作为动物模型,将断奶两周的仔猪经过添加不同浓度的维生素E喂养2周,检测仔猪的体重及血样指标的变化,分析肠道粘...
【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１：维生素Ｅ上调对ｉｐｅｃ－ｊ２细胞系和ｃａｃｏ２细胞系结构蛋白的表迗：１Ａ：在ｉｐｅｃ－ｊ２??细胞系中，不同浓度维生素Ｅ处理后紧密连接的结构蛋白ｏｃ?
?§??ｌｉｋｉｉｌ?！：Ｗｍｉｌ??图３－２：维生素Ｅ能够抑制脂多糖诱导炎症因子的高表达：２Ａ：在ｉｐｅｃ－ｊ２和ｃａｃｏ２细??胞系中，不同浓度维生素Ｅ处理后ｐ?ＮＦ－ｋＢ的蛋白表达；２Ｂ：在ｃａｃｏ２细胞系中，用维生素Ｅ??和ＬＰＳ处理细胞，将细胞分为对照组（未处理组），ＶＥ组，ＬＰＳ组，ＶＥ＋ＬＰＳ组，ＬＰＳ组相对于??对照组，炎症因子ＩＬ－６和ｐ?ＮＦ－ｋＢ的蛋白表达升高，而ＶＥ＋ＬＰＳ组相对于ＬＰＳ组炎症因子蛋白??表达明显降低，ＶＥ组相对于对照组没有明显变化（Ｐ＊＜０．０５，Ｐ＝ｍ＝＜０．０１）?；?２Ｃ：在ｉｐｅｃ－ｊ２??细胞系中，同上分组，ＬＰＳ组相对于对照组，炎症因子ＩＬ－６和ｐ?ＮＦ－ｋＢ的蛋白表达升高，而??ＶＥ＋ＬＰＳ组相对于ＬＰＳ组炎症因子蛋白表达明显降低，ＶＥ组相对于对照组没有明显变化（Ｐ＊＜??０．０５，Ｐ＊＊＜０．０１）?；?２Ｄ：用ＰＣＲ实验验证ｉｐｅｃ－ｊ２细胞中炎症因子的基因水平表达，同样ＬＰＳ??组相对于对照组
３－１Ｃ：用ＲＴ－ＰＣＲ验证ｉｐｅｃ－ｊ２细胞系中，ＶＥ组，ＬＰＳ组，ＶＥ＋ＬＰＳ组对结构蛋白的影响。（Ｐ＊＜??０．?０５，?Ｐ＊氺?＜?０．?０１）??３．?３．?２通过免疫荧光技术检测维生素Ｅ对结构蛋白的表达和定位??用２０｜〇＿Ｍ维生素Ｅ处理ｉｐｅｃ－ｊ２细胞，ＶＥ组相对于对照组，结构蛋白ｃｌａｕｄｉｎ－１??的荧光强度和完整性都有明显的提高。ＬＰＳ组对结构蛋白破坏明显，不仅荧光强??度降低，而且蛋白间的连接完整性也收到了破坏。维生素Ｅ＋ＬＰＳ组中，ｄａｕｄｉｎ－１??相对于ＬＰＳ组表达量明显上升，网状的破坏也得到了改善（图Ａ）。同样对结??构蛋白ｚｏ－１也进行了检测，ＶＥ组相对于对照组，结构蛋白ｚｏ－１的荧光强度和??完整性都有明显的提高。ＬＰＳ组对结构蛋白破坏明显，不仅荧光强度降低，而且??蛋白间的连接完整性也收到了破坏。维生素Ｅ＋ＬＰＳ组中，ｚｏ－１相对于ＬＰＳ组表??达量明显上升，网状的破坏也得到了改善（图Ｂ）。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]紧密连接蛋白与肠黏膜屏障损伤研究进展[J]. 马军宏,于向阳,张楠,周振理. 中国中西医结合外科杂志. 2015(01)
[2]精氨酸对仔猪肠道机械屏障的影响及相关机理[J]. 姜海龙,秦贵信,车东升,谷琳琳,张海全,赵金波. 吉林农业大学学报. 2015(01)
[3]骨髓间充质干细胞联合维生素E对急性肾损伤炎症反应的抑制作用[J]. 赵雷,冯业童,董超,周余来,刘朋飞. 中国病理生理杂志. 2014(10)
[4]维生素E对急行军后外周血细胞因子浓度的影响[J]. 张文,杨光,朱红霞,赵跃萍,崔雪元,邰贺. 武警后勤学院学报(医学版). 2014(09)
[5]Bovine immunoglobulin protein isolates for the nutritional management of enteropathy[J]. Bryon W Petschow,Anthony T Blikslager,Eric M Weaver,Joy M Campbell,Javier Polo,Audrey L Shaw,Bruce P Burnett,Gerald L Klein,J Marc Rhoads. World Journal of Gastroenterology. 2014(33)
[6]维生素E对LPS诱导的急性肺损伤中氧化应激的影响[J]. 张天杰,李雪飞. 湖南师范大学学报(医学版). 2013(01)
[7]Intestinal mucosal atrophy and adaptation[J]. Darcy Shaw,Kartik Gohil,Marc D Basson. World Journal of Gastroenterology. 2012(44)
[8]肠道屏障功能与细菌移位[J]. 何桂珍. 协和医学杂志. 2012(03)
[9]维生素E对育成金定鸭生长及免疫和抗氧化指标的影响[J]. 武江利,王安,张养东. 动物营养学报. 2008(06)
[10]维生素E对氧化应激及相关慢性病的影响[J]. 汪求真,马爱国. 国外医学(卫生学分册). 2008(06)
博士论文
[1]色氨酸调节慢性不可预知应激动物肠道屏障及免疫功能的机制研究[D]. 岳云双.中国农业大学 2017
[2]HO-1/CO通过调控TLR4/NF-κB修复胆汁淤积肝损伤肠屏障破坏的研究[D]. 张丽静.大连医科大学 2017
[3]水通道蛋白3和紧密连接蛋白的表达测定及在肠道屏障中的作用[D]. 栗凤霞.山西大学 2016
本文编号：2986944
【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１：维生素Ｅ上调对ｉｐｅｃ－ｊ２细胞系和ｃａｃｏ２细胞系结构蛋白的表迗：１Ａ：在ｉｐｅｃ－ｊ２??细胞系中，不同浓度维生素Ｅ处理后紧密连接的结构蛋白ｏｃ?
?§??ｌｉｋｉｉｌ?！：Ｗｍｉｌ??图３－２：维生素Ｅ能够抑制脂多糖诱导炎症因子的高表达：２Ａ：在ｉｐｅｃ－ｊ２和ｃａｃｏ２细??胞系中，不同浓度维生素Ｅ处理后ｐ?ＮＦ－ｋＢ的蛋白表达；２Ｂ：在ｃａｃｏ２细胞系中，用维生素Ｅ??和ＬＰＳ处理细胞，将细胞分为对照组（未处理组），ＶＥ组，ＬＰＳ组，ＶＥ＋ＬＰＳ组，ＬＰＳ组相对于??对照组，炎症因子ＩＬ－６和ｐ?ＮＦ－ｋＢ的蛋白表达升高，而ＶＥ＋ＬＰＳ组相对于ＬＰＳ组炎症因子蛋白??表达明显降低，ＶＥ组相对于对照组没有明显变化（Ｐ＊＜０．０５，Ｐ＝ｍ＝＜０．０１）?；?２Ｃ：在ｉｐｅｃ－ｊ２??细胞系中，同上分组，ＬＰＳ组相对于对照组，炎症因子ＩＬ－６和ｐ?ＮＦ－ｋＢ的蛋白表达升高，而??ＶＥ＋ＬＰＳ组相对于ＬＰＳ组炎症因子蛋白表达明显降低，ＶＥ组相对于对照组没有明显变化（Ｐ＊＜??０．０５，Ｐ＊＊＜０．０１）?；?２Ｄ：用ＰＣＲ实验验证ｉｐｅｃ－ｊ２细胞中炎症因子的基因水平表达，同样ＬＰＳ??组相对于对照组
３－１Ｃ：用ＲＴ－ＰＣＲ验证ｉｐｅｃ－ｊ２细胞系中，ＶＥ组，ＬＰＳ组，ＶＥ＋ＬＰＳ组对结构蛋白的影响。（Ｐ＊＜??０．?０５，?Ｐ＊氺?＜?０．?０１）??３．?３．?２通过免疫荧光技术检测维生素Ｅ对结构蛋白的表达和定位??用２０｜〇＿Ｍ维生素Ｅ处理ｉｐｅｃ－ｊ２细胞，ＶＥ组相对于对照组，结构蛋白ｃｌａｕｄｉｎ－１??的荧光强度和完整性都有明显的提高。ＬＰＳ组对结构蛋白破坏明显，不仅荧光强??度降低，而且蛋白间的连接完整性也收到了破坏。维生素Ｅ＋ＬＰＳ组中，ｄａｕｄｉｎ－１??相对于ＬＰＳ组表达量明显上升，网状的破坏也得到了改善（图Ａ）。同样对结??构蛋白ｚｏ－１也进行了检测，ＶＥ组相对于对照组，结构蛋白ｚｏ－１的荧光强度和??完整性都有明显的提高。ＬＰＳ组对结构蛋白破坏明显，不仅荧光强度降低，而且??蛋白间的连接完整性也收到了破坏。维生素Ｅ＋ＬＰＳ组中，ｚｏ－１相对于ＬＰＳ组表??达量明显上升，网状的破坏也得到了改善（图Ｂ）。??
【参考文献】：
期刊论文
[1]紧密连接蛋白与肠黏膜屏障损伤研究进展[J]. 马军宏,于向阳,张楠,周振理. 中国中西医结合外科杂志. 2015(01)
[2]精氨酸对仔猪肠道机械屏障的影响及相关机理[J]. 姜海龙,秦贵信,车东升,谷琳琳,张海全,赵金波. 吉林农业大学学报. 2015(01)
[3]骨髓间充质干细胞联合维生素E对急性肾损伤炎症反应的抑制作用[J]. 赵雷,冯业童,董超,周余来,刘朋飞. 中国病理生理杂志. 2014(10)
[4]维生素E对急行军后外周血细胞因子浓度的影响[J]. 张文,杨光,朱红霞,赵跃萍,崔雪元,邰贺. 武警后勤学院学报(医学版). 2014(09)
[5]Bovine immunoglobulin protein isolates for the nutritional management of enteropathy[J]. Bryon W Petschow,Anthony T Blikslager,Eric M Weaver,Joy M Campbell,Javier Polo,Audrey L Shaw,Bruce P Burnett,Gerald L Klein,J Marc Rhoads. World Journal of Gastroenterology. 2014(33)
[6]维生素E对LPS诱导的急性肺损伤中氧化应激的影响[J]. 张天杰,李雪飞. 湖南师范大学学报(医学版). 2013(01)
[7]Intestinal mucosal atrophy and adaptation[J]. Darcy Shaw,Kartik Gohil,Marc D Basson. World Journal of Gastroenterology. 2012(44)
[8]肠道屏障功能与细菌移位[J]. 何桂珍. 协和医学杂志. 2012(03)
[9]维生素E对育成金定鸭生长及免疫和抗氧化指标的影响[J]. 武江利,王安,张养东. 动物营养学报. 2008(06)
[10]维生素E对氧化应激及相关慢性病的影响[J]. 汪求真,马爱国. 国外医学(卫生学分册). 2008(06)
博士论文
[1]色氨酸调节慢性不可预知应激动物肠道屏障及免疫功能的机制研究[D]. 岳云双.中国农业大学 2017
[2]HO-1/CO通过调控TLR4/NF-κB修复胆汁淤积肝损伤肠屏障破坏的研究[D]. 张丽静.大连医科大学 2017
[3]水通道蛋白3和紧密连接蛋白的表达测定及在肠道屏障中的作用[D]. 栗凤霞.山西大学 2016
本文编号：2986944
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