靶向MLL1-WDR5相互作用的小分子抑制剂的发现和研究

发布时间：2021-03-22 15:35

　　MLL1是MLL（Mixed lineage leukemia）蛋白家族成员之一,是催化组蛋白H3K4位点甲基化的重要甲基转移酶,需要与其它“伴侣”蛋白相互作用形成MLL1复合蛋白发挥其最佳的甲基化催化活性。这些“伴侣”蛋白包括WDR5（WD Repeat Domain 5）,RbBP5（Retinoblastoma-binding Protein 5）和 ASH2L（Absent,Small,or Homeotic2-like）,其中 WDR5 和 MLL1的蛋白-蛋白相互作用（PPI）对维持MLL1催化活性至关重要。实验研究证明,MLL1催化功能的失调与混合谱系白血病的发生密切相关,破坏MLL1-WDR5 PPI可以抑制白血病的发生发展。因此,MLL1-WDR5的PPI界面被认为是开发治疗白血病药物的潜在靶点。到目前为止,一些靶向MLL1-WDR5 PPI的模拟肽和非模拟肽小分子抑制剂已经被发现,但是这些抑制剂在成药性上都各自存在一定的不足,例如过膜性差导致细胞水平活性差、毒副作用大、选择性不佳等,这极大地限制了 MLL1体内外分子机制的研究及其小分子抑制剂在治疗白血病方面的应用。... 

【文章来源】：浙江理工大学浙江省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３．４?ＦＰ蛋白滴定曲线

ａ?ＮＤ表示未检测到．??４．３?ＳＰＲ?验证?ＤＣＪＶＩ４?１、ＤＣ—Ｍ５?２?与?ＷＤＲ５?的作用??ＳＰＲ实验广泛应用于测定两个分子之间的相互作用，如蛋白和蛋白、蛋白和??ＤＮＡ、蛋白和小分子、核酸和核酸，并可以求出反应的平衡解离常数ＫＤ值。在??本实验中，选取活性比较好的衍生物ＤＣ＿Ｍ４＿１和ＤＣ＿Ｍ５＿２，利用ＳＰＲ实验验??证它们与ＷＤＲ５的反应并求出平衡解离常数ＫＤ值。ＤＣ＿Ｍ４＿１和ＤＣ＿Ｍ５＿２的??ＳＰＲ实验结果见图４．２。由图４．２的结合解离曲线可知，在反应进行到１２０?ｓ的时??候ＤＣ＿Ｍ４＿１和ＤＣ＿Ｍ５＿２都已经完全与ＷＤＲ５蛋白结合，然后在反应进行到约??１８０?ｓ时ＤＣ＿Ｍ４＿１和ＤＣ＿Ｍ５＿２都与ＷＤＲ５蛋白快速解离。根据ＤＣ＿Ｍ４＿Ｉ和??ＤＣ＿Ｍ５＿２结合解离曲线拟合得到的ＫＤ值分别为１５．８?｜ｉＭ和１３．８?ｐＭ．。此实验结??果不仅验证了?ＤＣ＿Ｍ４Ｊ、ＤＣ＿Ｍ５＿２＊?ＷＤＲ５的直接结合，还说明了?ＤＣ＿Ｍ４＿１??和ＤＣ＿Ｍ５＿２是可逆抑制剂。??

殖的抑制效率。ＭＶ４－丨丨是急性髓系白血病细胞，携带ＭＬＬ－ＡＦ４融合蛋白，作??为实验组；Ｋ５６２是慢性髓系白血病细胞系，不携带任何ＭＬＬ融合蛋白，作为对??照组。图４．４显示了?ＤＣ＿Ｍ４＿１对ＭＶ４－１１和Ｋ５６２细胞的增殖抑制曲线。由图??可知，ＤＣ＿Ｍ４＿１对ＭＶ４－１１和Ｋ５６２的增殖均有抑制作用，但是对ＭＶ４－１１??（１Ｃ５〇＝３１．１６｜ｉＭ）的增殖抑制效果强于对Ｋ５６２?（丨Ｃ５〇＝７２．０９＾Ｍ）的增殖抑制效??果，表现出对ＭＬＬ１易位重组细胞系和非ＭＬＬ１易位重组细胞系的选择性。??４１??


本文编号：3094076