人工红细胞膜泡的合成及其体外递送阿霉素的可行性

发布时间：2021-04-15 18:50

　　目的由于缺乏高效的纯化和载药方法,细胞外囊泡（extracellular vesicle,EV）在药物递送载体的应用受到明显限制。本研究在高效提取纯化红细胞膜的基础上,制备并表征EV类似物人工红细胞膜泡（artificial red blood cells membrane vesicle,ARBCMV）,评价其作为阿霉素递送载体的可行性。方法本研究用低渗裂解与物理挤出方法制备ARBCMV,以人乳腺癌MDA-MB-231细胞来源EV为对照,通过透射电子显微镜和纳米颗粒追踪分析技术比较两者形态、粒径分布及合成效率,用荧光光谱技术分析载阿霉素ARBCMV的载药量,在荧光显微镜下验证其与人乳腺癌MDA-MB-231细胞融合的可行性并探索其递送阿霉素进入细胞的能力。结果 ARBCMV和EV均为具有完整的膜性脂质双分子层的杯状结构,粒径峰值分别为（133.7±5.4）nm和（160.5±4.2）nm,ARBCMV粒径相对更均一;ARBCMV合成快速且高效,不依赖超高速离心机;载药实验证明ARBCMV具有负载阿霉素的能力;且细胞试验证明ARBCMV可与乳腺癌细胞融合,并可将阿霉素成功递入乳腺癌细胞... 

【文章来源】：实用医学杂志. 2020,36(15)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

ARBCMV制备过程

见表1。ARBCMV和EV的分离时间和提取量比较可知，提取EV需预先成功培养细胞，并超高速离心4 h，操作繁琐且耗时达2～3 d，而ARBCMV制备仅需普通冷冻高速离心机和挤出器即可完成实验，时长大约100 min。等量细胞可提取的MDA-MB-231 EV平均数量为2.04×1010个，ARBCMV平均数量为3.10×1010个，结果差异无统计学意义（P>0.05）。因此，在相同的细胞数量情况下，可以提取相近的囊泡数量，但制备ARBCMV无需培养细胞，更加快速且高效，不依赖超高速离心机，对实验室设备要求较低，因此更易于推广应用。2.3 ARBCMV与人乳腺癌MDA-MB-231细胞的融合

见图3。ARBCMV经过PKH-67膜染料染色后与细胞共孵育可使人乳腺癌MDA-MB-231细胞的细胞膜带荧光，说明ARBCMV与人乳腺癌MDA-MB-231细胞成功融合，具有作为药物载体并作用于癌细胞的潜力。2.4 载阿霉素ARBCMV的载药量分析

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3139898