基于透明质酸的地塞米松与mTOR siRNA共传递纳米体系的设计及抗炎活性的研究

发布时间：2021-04-26 17:36

　　炎症与癌症、动脉粥样硬化、哮喘等多种疾病密切相关。炎症发生时会在局部形成高活性氧和低pH值的微环境。炎症的治疗目前临床上主要采用糖皮质激素类和非甾体类抗炎药,其中以地塞米松为代表的糖皮质激素类药物以其高效、强大的抗炎作用被广泛用于各类炎症的治疗。但是长期大剂量使用该类药物会导致诸多不良反应,如消化道溃疡、柯式综合症、免疫力降低继而诱发或加重感染等。自噬是真核细胞在紧密调控下利用溶酶体降解细胞器及胞质成分从而完成物质周转的重要过程。近年来,自噬通路及相关蛋白在炎症发展中的潜在调节作用引起了人们的关注。有研究发现用LPS刺激单核细胞会激活雷帕霉素靶向蛋白（mTOR）,而雷帕霉素通过抑制mTOR信号通路增强细胞自噬可以降低LPS诱导的炎症反应和氧化应激,故mTOR可能是一个潜在的抗炎作用靶点。小干扰RNA（Small interfering RNA,siRNA）是一种长约21个核苷酸的双链RNA,可以特异性识别并降解目的mRNA,沉默同源基因的表达,特异性和高效性使其成为现代生物学、医学等领域研究的热点,但缺乏适宜的载体材料严重限制了siRNA的研究与应用。本课题为了探讨利用siRNA靶向性... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
中英文对照表
第一章 前言
    1.1 引言
    1.2 炎症的治疗
        1.2.1 糖皮质激素类药物
        1.2.2 非甾体类抗炎药
    1.3 炎症局部高ROS微环境
    1.4 炎症与 CD44
    1.5 CD44 配体-透明质酸
    1.6 炎症与细胞自噬
    1.7 基因干扰技术与磷酸钙载药体系
        1.7.1 基因干扰技术
        1.7.2 siRNA
        1.7.3 磷酸钙
    1.8 选题背景和依据
    1.9 选题目的和意义
    1.10 研究内容
第二章 HA-DSH的制备与表征
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验试剂及材料
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 合成步骤
        2.2.4 化合物的结构鉴定与表征
    2.3 结果与分析
        2.3.1 HA-DSH的合成及表征
        2.3.2 HA-DSH的 ROS响应性
    2.4 实验小结
第三章 CaP/siRNA/HA-DSA体系的构建及表征
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 实验试剂及细胞
        3.2.2 实验仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 CaP/siRNA/HA-DSH纳米体系的制备与形态表征
        3.3.2 纳米体系的胶体稳定性检测
        3.3.3 纳米体系对RNA酶的抵抗力检测
        3.3.4 HA-DSH和 CaP/siRNA/HA-DSH细胞毒性的检测
        3.3.5 细胞摄取实验
        3.3.6 数据处理
    3.4 结果与分析
        3.4.1 CaP/siRNA/HA-DSH的制备及形态表征
        3.4.2 胶体稳定性及对siRNA的保护作用
        3.4.3 细胞毒性
        3.4.4 细胞摄取率
    3.5 实验小结
第四章 CaP/siRNA/HA-DSH的体外转染及抗炎活性检测
    4.1 引言
    4.2 实验材料
        4.2.1 实验用化学试剂和细胞
        4.2.2 实验仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 细胞转染实验
        4.3.2 CaP/simTOR/HA-DSH体外抗炎活性检测
        4.3.3 实时荧光定量PCR
        4.3.4 数据处理
    4.4 结果与分析
        4.4.1 靶基因敲除效率检测
        4.4.2 炎性因子m RNA水平检测
    4.5 实验小结
第五章 研究结果与创新
    5.1 研究结果
    5.2 本论文创新点
参考文献
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]自噬在急性胰腺炎发生发展中的作用[J]. 李春云,刘瑞霞,阴赪宏.  临床肝胆病杂志. 2019(05)
[2]CD44在鼻咽恶性肿瘤中的研究进展[J]. 苏进,梅君,周海波,许新华.  巴楚医学. 2018(04)
[3]非甾体类抗炎药的不良反应表现及预防措施的探讨[J]. 张彩平,申慧珍.  世界最新医学信息文摘. 2018(95)
[4]非甾体类抗炎药的不良反应表现及预防措施的探讨分析[J]. 续艳姣.  世界最新医学信息文摘. 2017(49)

博士论文
[1]自噬在脂肪细胞慢性炎症反应中的调节作用及雷帕霉素的抗炎机制研究[D]. 尹嘉晶.上海交通大学 2015

硕士论文
[1]两种多糖药物载体的设计及其活性评价[D]. 王兆杰.西北农林科技大学 2018
[2]基于单壁碳纳米管和穿膜肽构建siRNA纳米投递系统[D]. 蒋兴禄.南方医科大学 2014
[3]mTOR siRNA及雷帕霉素对宫颈癌Hela细胞mTOR、4EBP1表达影响的研究[D]. 杨建萍.郑州大学 2012



本文编号：3161826