新型二甲基胺类p53-MDM2相互作用抑制剂cyz2017的发现及抗肿瘤机制初步研究

发布时间：2021-04-29 22:11

　　癌症是威胁人类健康与生命的一类重大疾病,目前尚无彻底治愈的方法,因此发现新的具有抗肿瘤活性的化合物以及研究其抗肿瘤机制是目前相关药物研发的主要方向。p53基因是一种抑癌基因,与人类肿瘤密切相关,其功能包括维持基因组稳定、抑制并且阻止细胞转化。超过一半的人类肿瘤与p53基因的突变有关,并且另一半p53基因未突变的肿瘤中,p53基因的表达和功能受到了明显的抑制。MDM2是p53基因的关键负反馈调节因子。在肿瘤细胞中,MDM2基因高表达,影响了p53蛋白的抑癌效果。而p53-MDM2相互作用的抑制剂能将p53蛋白从MDM2的抑制中释放出来,重新恢复p53蛋白“基因组卫士”的功能,故p53-MDM2相互作用一直是抗癌药物研发的重要靶标。目前已发现多种新型的p53-MDM2抑制剂,但仍没有相关药物上市。本课题对cyz系列化合物使用p53-MDM2通路抑制剂筛选细胞模型进行筛选,得到能诱导p53进入细胞核的化合物;并通过cck8法测定活性化合物的抗肿瘤细胞增殖活性,运用免疫印迹、免疫组化等方法验证p53、MDM2和p21蛋白的表达量的变化,从而验证化合物对p53通路的激活作用。并且通过检测Bax、... 

【文章来源】：华东师范大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1.1 肿瘤相关知识
    1.2 p53-MDM2 通路的作用机制
        1.2.1 p53 的生物学特性
        1.2.2 MDM2 的生物学特性
        1.2.3 p53-MDM2 通路的作用机制
    1.3 论文研究的目的和意义
第二章 新型p53-MDM2 相互作用抑制剂的发现、验证及抗肿瘤作用分析
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞株以及培养液
        2.1.2 试剂以及耗材
        2.1.3 实验仪器
        2.1.4 待测化合物
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 化合物对细胞的增殖抑制作用检测
        2.2.3 p53-MDM2 Redistribution?Assay
        2.2.4 化合物对细胞形态的影响
        2.2.5 细胞凋亡检测
        2.2.6 细胞周期检测
        2.2.7 免疫荧光检测
        2.2.8 免疫印迹检测
        2.2.9 体内抗肿瘤活性检测
    2.3 实验结果
        2.3.1 p53-MDM2 相互作用抑制剂的筛选
        2.3.2 不同基因型的肿瘤细胞验证p53-MDM2
        2.3.3 不同浓度cyz2017 诱导细胞进核情况
        2.3.4 cyz2017对HCT116 细胞p53-MDM2 通路蛋白表达的影响
        2.3.5 cyz2017 对不同p53 基因型肿瘤细胞增殖的抑制作用
        2.3.6 cyz2017对HCT116 细胞及细胞核形态的影响
        2.3.7 cyz2017对HCT116 细胞凋亡的影响
        2.3.8 cyz2017对HCT116 细胞周期的影响
        2.3.9 cyz2017 体内抗肿瘤活性
    2.4 讨论
第三章 cyz2017 化合物导致细胞聚合验证和初步探究
    3.1 实验材料
        3.1.1 细胞株以及培养液
        3.1.2 试剂以及耗材
        3.1.3 实验仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 细胞和细胞核形态学观察
        3.2.2 免疫荧光检测
        3.2.3 活细胞连续拍照观察
    3.3 实验结果
        3.3.1 cyz2017对HCT116 细胞和细胞核形态学观察
        3.3.2 cyz2017 作用其他细胞时细胞聚合情况
    3.4 讨论
第四章 总结
参考文献
在学期间所获得的科研成果
致谢



本文编号：3168265