含钒多金属氧酸盐抗乳腺癌MCF-7细胞作用研究

发布时间：2017-04-20 15:17

  本文关键词：含钒多金属氧酸盐抗乳腺癌MCF-7细胞作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:恶性肿瘤是严重危害人类健康的重大疾病。A Cancer Journal for Clinicians杂志中《2015中国癌症统计》报告了我国癌症的发病率、死亡率以及生存率的预估值。女性五种常见肿瘤为乳腺癌、肺癌、胃癌、结直肠癌和食管癌,其中乳腺癌堪称女性杀手,死亡率达到15%,并呈现逐年递增趋势。因此,加强对乳腺癌治疗的研究一直是我国政府亟待解决的问题之一。化学治疗是肿瘤治疗的重点,研发高效、低毒、特异的抗肿瘤药物是肿瘤药物治疗的热点和难点。多酸是一类在分子水平上可设计的、结构明确的、性质可调控的、纳米尺度的簇合物,具有抗病毒、抗菌、抗肿瘤的生物活性。本课题的主要研究内容是合成系列含钒多金属氧酸盐,并研究其抗乳腺癌作用及其机制。方法:1.根据文献中报道方法合成6种含钒多金属氧酸盐,采用红外光谱、紫外光谱、元素分析的方法对6种含钒多金属氧酸盐进行表征;2.根据美国NCI抗癌化合物体外筛选方法进行含钒多金属氧酸盐的浓度梯度设定,采用MTT法检测含钒多金属氧酸盐的抗乳腺癌MCF-7细胞作用活性;3.采用紫外光谱、荧光光谱法研究含钒多金属氧酸盐与ct DNA之间的相互作用;4.采用紫外光谱、荧光光谱、同步荧光法检测含钒多金属氧酸盐与BSA之间相互作用;5.采用流式细胞术检测含钒多金属氧酸盐对细胞周期的影响;6.采用流式细胞术检测含钒多金属氧酸盐的诱导细胞凋亡作用;7.采用Hoechst33342/PI染色激光共聚焦显微镜观察MCF-7细胞的形态学改变。结果:1.合成6种含钒多金属氧酸盐;2.与对照组相比,三种多酸盐PW9V3、PMo10V2、V18O42对人乳腺癌MCF-7细胞均具有显著的生长抑制作用(p0.05)。并且随着多酸盐药物浓度(7.812,15.625,31.25,62.5,125,250,500μM)的逐渐增加,其抑制作用逐渐增强,在三种多酸盐PW9V3、PMo10V2、V18O42作用48h后,三种多酸盐在500μM时的抑制率高达73.61%,90.08%和80.24%。3.PW9V3、PMo10V2、V18O42与ct DNA的相互作用方式为静电作用或者沟槽作用,并且PW9V3、PMo10V2、V18O42与BSA之间存在相互作用,能够更好的与酪氨酸残基相结合,改变BSA的构像。4.PW9V3、PMo10V2、V18O42能够将细胞周期阻滞在G2/M和S期,并具有诱导细胞凋亡的作用。结论:1.含钒多金属氧酸盐PW9V3、PMo10V2、V18O42具有较好的抗乳腺癌作用活性;2.三种含钒多金属氧酸盐的抗乳腺癌MCF-7细胞活性作用V18O42PMo10V2PW9V3;3.PW9V3、PMo10V2、V18O42与ct DNA之间存在一定的相互作用;4.PW9V3、PMo10V2、V18O42与BSA之间存在一定的相互作用;5.PW9V3、PMo10V2、V18O42具有抑制细胞周期、诱导细胞凋亡的作用。
【关键词】：多金属氧酸盐 乳腺癌 细胞周期 细胞凋亡 ct DNA相互作用 BSA相互作用
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R96
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-12
• 第1章 前言12-23
• 1.1 多金属氧酸盐的概述及其抗肿瘤作用研究进展12-18
• 1.1.1 多金属氧酸盐概述12
• 1.1.2 多金属氧酸盐抗肿瘤作用研究进展12-18
• 1.2 肿瘤的治疗方法及抗肿瘤机制研究18-21
• 1.2.1 肿瘤的概述18
• 1.2.2 肿瘤的治疗方法18-20
• 1.2.3 抗肿瘤作用的机制研究20-21
• 1.3 本课题研究的目的和意义21-23
• 第2章 材料与方法23-30
• 2.1 主要仪器与试剂23-24
• 2.1.1 主要仪器23
• 2.1.2 主要试剂23-24
• 2.2 6种含钒多金属氧酸盐的合成与表征24-25
• 2.2.1 α-Na_(10)[PW_(11)V(H_2O)O_(37)]·16H_2O的合成与表征24
• 2.2.2 α-Na_(10)[PW_9V_3(H_2O)O_(37)]·16H_2O的合成与表征24
• 2.2.3 α-K_5[SiW_(11)VO_(40)] 的合成与表征24
• 2.2.4 α-1，， 2， 3， - K_6H[SiW_9V_3O_(40)] 的合成与表征24
• 2.2.5 K_5PMo_(100V_2O_(40)的合成与表征24-25
• 2.2.6 K_(13)[V_(18)O_(42)(Cl)]·16H_2O的合成的合成与表征25
• 2.3 细胞培养25
• 2.3.1 细胞株25
• 2.3.2 细胞培养25
• 2.4 MTT法检测细胞生长抑制作用25-26
• 2.5 细胞形态学检测26
• 2.6 含钒多金属氧酸盐与ctDNA相互作用26-27
• 2.6.1 紫外光谱法26
• 2.6.2 荧光光谱法26-27
• 2.6.3 含钒多金属氧酸盐对DNA-EB荧光光谱的影响27
• 2.7 含钒多金属氧酸盐与BSA相互作用27-28
• 2.7.1 紫外光谱法27
• 2.7.2 荧光光谱法27
• 2.7.3 同步荧光法27-28
• 2.8 细胞周期检测28
• 2.9 细胞凋亡检测28-29
• 2.9.1 流式细胞术检测细胞凋亡28
• 2.9.2 Hoechst33342/PI双染法检测细胞凋亡28-29
• 2.10 统计学分析29-30
• 第3章 实验结果30-56
• 3.1 含钒多金属氧酸盐的表征30-33
• 3.1.1 含钒多金属氧酸盐的红外光谱30-31
• 3.1.2 含钒多金属氧酸盐的紫外光谱31-33
• 3.1.3 含钒多金属氧酸盐的元素分析33
• 3.2 含钒多金属氧酸盐对MCF-7 细胞的生长抑制作用33-37
• 3.3 含钒多金属氧酸盐与ctDNA相互作用37-43
• 3.3.1 紫外光谱法37-39
• 3.3.2 荧光光谱法39-43
• 3.4 含钒多金属氧酸盐与BSA相互作用43-50
• 3.4.1 紫外光谱法43-45
• 3.4.2 荧光光谱法45-50
• 3.5 含钒多金属氧酸盐对细胞周期的影响50-53
• 3.6 含钒多金属氧酸盐对细胞凋亡的影响53-56
• 3.6.1 Hoechst33342/PI双染检测53-55
• 3.6.2 Annexin V/PI检测细胞凋亡55-56
• 第4章 讨论56-61
• 4.1 含钒多金属氧酸盐的抗乳腺癌MCF-7 细胞活性56-57
• 4.2 含钒多金属氧酸盐与ctDNA之间相互作用57-58
• 4.3 含钒多金属氧酸盐与BSA之间的相互作用58
• 4.4 含钒多金属氧酸盐对细胞周期的影响58-59
• 4.5 含钒多金属氧酸盐对细胞凋亡的影响59-61
• 第5章 结论61-62
• 参考文献62-70
• 在学期间所取得的科研成果70-71
• 致谢71

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